该手术方案为研究筋膜皮瓣缺血性预处理方案提供了一个可靠的模型,以改善这些手术的结果。该协议易于学习,可重复且可靠。与其他方案的主要区别在于使用股血管来引发缺血性预处理,避免伤害小血管。
它最终可以导致优化游离和带蒂皮瓣重建的缺血预处理方案,以提高皮瓣生存能力并减少皮瓣脆弱性的关键时期。该方法有助于重建手术领域,并非常适合缺血再灌注损伤的研究。首先,将适当镇静的动物置于仰卧位。
将腹部从腹股沟折痕下方剃到剑突水平以上。在剃须部位涂抹脱毛霜,等待五分钟后再清洁。使用无菌皮笔和尺子,首先标记动物腹部的中线,然后标记腹股沟折痕。
在做切口之前,通过画一个椭圆形或矩形来指示动物身体上所需皮瓣的位置,垂直长度可达六厘米,水平宽度约为三厘米,从腹股沟折痕向颅骨延伸。现在画五六个垂直于襟翼极限的等距标记。然后用一把拉格内尔剪刀,在腹股沟折痕上做一个三到四厘米的纵向切口。
一定要向上拉皮肤,以免损坏血管。使用 4 个珠宝商显微外科镊子暴露和识别股骨和上腹部血管,方法是打开和关闭镊子以分离筋膜并进入腹股沟脂肪垫下方的血管。使用腹股沟切口使用拉格内尔剪刀开始皮瓣切口。
注意破坏腹部肌肉上的皮肤和结缔组织的整个厚度。当皮瓣的尖端最初从周围皮肤中释放出来时,通过使用 Ragnell 剪刀尖端将皮瓣与肌肉分开,同时烧灼皮瓣周围的任何穿支血管和真皮丛血管,从而从远端到近端进行皮瓣获取。一旦皮瓣完全收获,旨在通过轻轻向上提起皮瓣以观察血管,用皮瓣包裹上腹部浅下动脉或SIEA的整个分支。
接下来,将皮瓣内侧和外侧下侧的脂肪垫分开。使用双极烧灼器仔细烧灼靠近切口边界的脂肪垫,而不会伤害浅表下上腹部蒂。在完成皮瓣收获后进行股血管准备之前,通过静脉向动物注射单剂量的17.5国际单位肝素钠。
为了更好地观察血管,请将动物放置在孤星自留性牵开器中。现在在具有40倍放大倍率的手术显微镜下工作,使用几个4个显微手术钳在近端和远端解剖股血管,直到出现浅表上腹部血管。在股骨远端血管上,清洁筋膜并轻轻地将神经从动脉和静脉中解放出来。
使用 8-0尼龙缝合线,通过绕过动脉和静脉下方的显微手术针架来结扎股骨远端血管,在上腹部血管出现后立即扣住缝合线并绑住这些血管,在椎弓根起源后留出一毫米的距离。在股骨近端血管上,重复清洁结缔组织的相同过程。但是,将动脉和静脉彼此分开,以便有效地钳夹。
为了诱发间歇性缺血,将显微手术夹分别放在每个股动脉近端和静脉上。缺血性损伤完成后,将皮瓣缝合到术前绘制的标记的原始位置。使用3-0尼龙在腹股沟折痕内侧,皮瓣周围,并在腹股沟折痕侧侧处缝合皮瓣。
为了验证皮瓣的血液供应,使用与先前注射相同的技术和工具将0.25毫升10%无菌荧光素钠注射到静脉中。三分钟后,用366纳米的长波紫外灯照射,以显示与灌注区域相对应的荧光区域。闭合和验证后,沿缝合线铺上粉碎的甲硝唑,以防止自动残缺,并在同一区域喷洒液体绷带。
为了在缺血性预处理期结束时从上腹部血液供应中去除皮瓣,沿皮瓣的下缘烧灼低于脂肪垫。术后第 0 天或 POD0 立即静脉注射荧光素血管造影显示仅通过 SIEA 使皮瓣完全血管化。组织,包括整个皮瓣桨,灌注良好。
POD5和POD10上阴性对照的血管造影显示襟翼桨的完全活力。该组中所有未在饲养血管上进行结扎的动物都保持健康。对于阳性对照组,结扎后立即没有绿色荧光,表明皮瓣没有灌注,证明没有新生血管形成。
这在POD10上得到证实,观察到85%的皮肤桨坏死。有趣的是,远端尖端是可行的和新生血管化的。POD10襟翼表面活力统计分析显示,阴性对照组存活率为99.5%,阳性对照组存活率为11.25%。
一个旨在研究缺血预处理的示例实验组显示出13.67%的存活率,表明特定的缺血预处理方案在该模型中效率低下。两个主要步骤是在显微镜下收获皮瓣和血管解剖。最重要的建议是拥有高质量的微型仪器。
下一个目标是通过改变缺血持续时间和节律来尝试不同的缺血预处理方案,以选择在早期血流中断后实现最佳皮瓣存活能力的方案。该技术通过为缺血融合损伤提供良好的模型,可以导致缺血预处理应用于现代重建手术和重建移植的新发现。