Questo protocollo chirurgico fornisce un modello affidabile per studiare il regime di precondizionamento ischemico nei lembi fasciocutanei per migliorare i risultati di questi interventi chirurgici. Questo protocollo è facile da imparare, riproducibile e affidabile. La principale differenza con altri protocolli è l'uso di vasi femorali per provocare il precondizionamento ischemico, evitando di danneggiare i piccoli vasi.
Alla fine può portare all'ottimizzazione di un protocollo di precondizionamento ischemico per la ricostruzione del lembo libero e peduncolare per migliorare la sopravvivenza del lembo e ridurre il periodo critico della vulnerabilità del lembo. Questo metodo può contribuire al campo della chirurgia ricostruttiva e si presta bene allo studio delle lesioni da ischemia da riperfusione. Per iniziare, posizionare l'animale correttamente sedato in posizione supina.
Rasare l'addome da sotto la piega inguinale al di sopra del livello del processo xifoideo. Applicare una crema depilatoria sulla zona rasata e attendere cinque minuti prima di pulirla. Usando una penna di pelle sterile e un righello, prima segna la linea mediana dell'addome dell'animale e poi segna la piega inguinale.
Prima di effettuare l'incisione, indicare la posizione del lembo desiderato sul corpo dell'animale disegnando un ovale o un rettangolo, con una lunghezza verticale fino a sei centimetri e una larghezza orizzontale di circa tre centimetri che si estende cranialmente dalla piega inguinale. Ora disegna cinque o sei segni equidistanti perpendicolarmente ai limiti del lembo. Quindi, usando un paio di forbici Ragnell, fai un'incisione longitudinale di tre o quattro centimetri sulla piega inguinale.
Assicurati di tirare la pelle verso l'alto per evitare di danneggiare i vasi. Esporre e identificare i vasi femorali ed epigastrici utilizzando una pinza microchirurgica 4 gioiellieri aprendo e chiudendo la pinza per separare la fascia e accedere ai vasi sotto il cuscinetto di grasso inguinale. Utilizzare l'incisione inguinale per iniziare l'incisione del lembo usando le forbici Ragnell.
Prestare attenzione a minare l'intero spessore della pelle e il tessuto connettivo sopra il muscolo addominale. Poiché la punta del lembo viene inizialmente liberata dalla pelle circostante, continuare l'approvvigionamento del lembo minando dalla parte distale a quella prossimale usando le punte a forbice Ragnell per separare il lembo dal muscolo mentre cauterizzando eventuali vasi perforatori e vasi del plesso dermico attorno al lembo. Una volta che il lembo è stato interamente raccolto, mirare a incapsulare la totalità di entrambi i rami dell'arteria epigastrica inferiore superficiale o SIEA con il lembo sollevando delicatamente il lembo verso l'alto per visualizzare i vasi.
Quindi, separare i cuscinetti di grasso sull'aspetto inferiore su entrambi i lati mediale e laterale del lembo. Utilizzare il cauterizzazione bipolare per cauterizzare i cuscinetti di grasso vicino al bordo dell'incisione con attenzione senza danneggiare il peduncolo epigastrico inferiore superficiale. Prima di procedere alla preparazione dei vasi femorali dopo il completamento della raccolta del lembo, iniettare all'animale una singola dose di 17,5 unità internazionali di eparina di sodio attraverso la vena del pene.
Per consentire una migliore visione dei vasi, posizionare l'animale all'interno di un riavvolgitore auto-ritenente a stella solitaria. Ora lavorando sotto un microscopio chirurgico con un ingrandimento 40X, utilizzare un paio di 4 pinze microchirurgiche per sezionare i vasi femorali sia prossimalmente che distalmente fino alla comparsa dei vasi epigastrici superficiali. Sui vasi femorali distali, pulire la fascia e liberare delicatamente il nervo dall'arteria e dalla vena.
Usando un 8-0 sutura di nylon, ligare i vasi femorali distali aggirando il supporto dell'ago microchirurgico sotto l'arteria e la vena, stringendo la sutura e legando questi vasi subito dopo l'emergere dei vasi epigastrici, lasciando una distanza di un millimetro dopo l'origine del peduncolo. Sui vasi femorali prossimali, ripetere lo stesso processo di pulizia del tessuto connettivo. Tuttavia, separare l'arteria e la vena l'una dall'altra per consentire un serraggio efficiente.
Per indurre ischemia intermittente, posizionare i morsetti microchirurgici separatamente su ciascuna arteria e vena femorale prossimale. Quando le lesioni ischemiche sono completate, suturare il lembo nella sua posizione originale che riveste i segni disegnati preoperatoriamente. Suturare il lembo usando una sutura corrente con nylon 3-0 sulla piega inguinale medialmente, attorno al lembo, e terminando lateralmente sulla piega inguinale.
Per verificare l'afflusso di sangue al lembo, iniettare 0,25 millilitri di fluoresceina sodica sterile al 10% nella vena del pene utilizzando la stessa tecnica e gli stessi strumenti descritti per l'iniezione precedente. Dopo tre minuti, far brillare una lampada UV a onde lunghe a 366 nanometri per rivelare le aree fluorescenti corrispondenti alle aree perfese. Dopo la chiusura e la verifica, distribuire metronidazolo frantumato lungo le suture per prevenire l'automutilazione e spruzzare bende liquide sulla stessa area.
Per rimuovere il lembo dall'afflusso di sangue epigastrico alla fine del periodo di precondizionamento ischemico, cauterizzare inferiore al cuscinetto adiposo lungo il bordo inferiore del lembo. L'angiografia endovenosa immediata con fluoresceina al giorno zero postoperatorio o POD0 ha mostrato una vascolarizzazione completa del lembo da parte della sola SIEA. Il tessuto, compresa l'intera paletta del lembo, era ben perfuso.
L'angiografia del controllo negativo su POD5 e POD10 ha mostrato la piena vitalità della paletta del lembo. Tutti gli animali di questo gruppo in cui non è stata eseguita alcuna legatura sui vasi di alimentazione sono rimasti sani. Per il gruppo di controllo positivo, l'assenza di fluorescenza verde immediatamente dopo la legatura non ha mostrato alcuna perfusione del lembo, dimostrando l'assenza di neovascolarizzazione.
Ciò è stato confermato su POD10 con necrosi osservata dell'85% della paletta cutanea. È interessante notare che la punta distale era vitale e neovascolarizzata. L'analisi statistica della vitalità della superficie del lembo su POD10 ha mostrato una sopravvivenza del 99,5% da parte del gruppo di controllo negativo, mentre il gruppo di controllo positivo ha mostrato una sopravvivenza dell'11,25%.
Un gruppo sperimentale di esempio destinato a studiare il precondizionamento ischemico ha mostrato una sopravvivenza del 13,67% dimostrando che il particolare protocollo di precondizionamento ischemico era inefficiente in questo modello. I due passaggi principali sono la raccolta dei flap e la dissezione dei vasi al microscopio. Il consiglio più importante è quello di avere micro strumenti di buona qualità.
Il prossimo obiettivo è quello di provare diversi protocolli di precondizionamento ischemico variando le durate e i ritmi dell'ischemia per selezionare il regime che consente la migliore sopravvivenza del lembo dopo l'interruzione precoce del flusso. Questa tecnica, fornendo un buon modello per le lesioni da fusione dell'ischemia, può portare a nuove scoperte sul precondizionamento ischemico applicato alla moderna chirurgia ricostruttiva e al trapianto ricostruttivo.
