Schneller Nachweis von bakteriellen Krankheitserregern, die Infektionen der unteren Atemwege verursachen, durch mikrofluidische Chip-basierte schleifenvermittelte isotherme Amplifikation

Zusammenfassung

Verschiedene bakterielle Krankheitserreger können Atemwegsinfektionen verursachen und zu ernsthaften Gesundheitsproblemen führen, wenn sie nicht genau erkannt und sofort behandelt werden. Der schnelle und genaue Nachweis dieser Erreger durch schleifenvermittelte isotherme Amplifikation ermöglicht ein effektives Management und eine effektive Kontrolle von Atemwegsinfektionen im klinischen Umfeld.

Zusammenfassung

Atemwegsinfektionen (RTIs) gehören zu den häufigsten Problemen im klinischen Umfeld. Die schnelle und genaue Identifizierung bakterieller Krankheitserreger wird praktische Leitlinien für das Management und die Behandlung von RTI liefern. Diese Studie beschreibt eine Methode zum schnellen Nachweis von bakteriellen Krankheitserregern, die Atemwegsinfektionen verursachen, mittels Mehrkanalschleifen-vermittelter isothermer Amplifikation (LAMP). LAMP ist ein empfindliches und spezifisches Diagnosewerkzeug, das bakterielle Nukleinsäuren schnell und mit hoher Genauigkeit und Zuverlässigkeit nachweist. Die vorgeschlagene Methode bietet einen erheblichen Vorteil gegenüber herkömmlichen bakteriellen Kultivierungsmethoden, die zeitaufwändig sind und oft eine höhere Empfindlichkeit für den Nachweis niedriger Mengen an bakteriellen Nukleinsäuren erfordern. In diesem Artikel werden repräsentative Ergebnisse der K . pneumoniae-Infektion und ihrer multiplen Koinfektionen mit LAMP zum Nachweis von Proben (Sputum, Bronchialspülflüssigkeit und Alveolarspülflüssigkeit) aus den unteren Atemwegen vorgestellt. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die Mehrkanal-LAMP-Methode ein schnelles und effizientes Mittel zur Identifizierung einzelner und mehrerer bakterieller Krankheitserreger in klinischen Proben bietet, was dazu beitragen kann, die Ausbreitung bakterieller Krankheitserreger zu verhindern und die angemessene Behandlung von RTIs zu unterstützen.

Einleitung

Atemwegsinfektionen (RTIs), die durch bakterielle Krankheitserreger verursacht werden, tragen weltweit in erster Linie zur Morbidität und Mortalität bei¹. Es ist definiert als alle Symptome der oberen oder unteren Atemwege, die von 2-3 Tagen anhaltendem Fieber begleitet werden. Während Infektionen der oberen Atemwege häufiger sind als Infektionen der unteren Atemwege, sind chronische und wiederkehrende Atemwegsinfektionen auch häufige klinische Erkrankungen, die große Risiken für den Einzelnen darstellen und eine erhebliche Belastung für die Gesundheitssysteme darstellen². Zu den häufigen bakteriellen Erregern von RTIs g....

Protokoll

Alle Proben für diese Studie wurden vom Ethikprüfungsausschuss des Volkskrankenhauses der Provinz Guangdong bewertet und genehmigt (Zulassungsnummer: KY2023-1114-01). Alle Teilnehmer unterschrieben vor den Experimenten eine schriftliche Einverständniserklärung. Die für die Studie verwendeten Reagenzien und Geräte sind in der Materialtabelle aufgeführt. Die im Protokoll verwendeten Abkürzungen sind in der ergänzenden Tabelle 1 aufgeführt.

1. Entnahme klinischer Proben aus den unteren Atemwegen

1. Sputum-Sammlung
   1. Reinigen Sie die Mundhöhle und die Zähne mit sauberem Wasser und s....

Diskussion

Atemwegsinfektionen sind weit verbreitete Krankenhausinfektionen, die schwerwiegende Folgen für die Patienten haben und die Sterblichkeitsraten in die Höhe treiben¹⁶. Die rechtzeitige und genaue Identifizierung potenzieller Krankheitserreger, gefolgt von wirksamen Antibiotika, ist der Schlüssel zu einer erfolgreichen Behandlung und einer Verbesserung der Prognose, insbesondere angesichts der Einschränkungen traditioneller Kulturmethoden¹⁷. In dieser Studie haben wir ein.......

Materialien

Name	Company	Catalog Number	Comments
Bath Incubator(MK2000-2)	ALLSHENG		Provide a constant temperature environment
Bronchial lavage fluid collector head	TIANPINGHUACHANG	SEDA 20172081375	Collecting bronchoalveolar lavage fluid
Fiberoptic bronchoscope	OLYMPUS	SEDA 20153062703	A flexible bronchoscope equipped with a fiberoptic light source and camera, to visually examine the airways and structures within the lungs. Assist in collecting bronchoalveolar lavage
HR1500-B2	Haier	SEDA 20183541642	Biosafety cabinet
NAOH	MACKLIN	S817977	Liquefy viscous lower respiratory tract sample
Nucleic acid detection kit for respiratory tract pathogens	Capitalbio Technology	SEDA 20173401346	Testing for bacteria infection
Nucleic acid extraction reagent	Capitalbio Technology	SEDA 20160034	For DNA extraction
RTisochip-W	Capitalbio Technology	SEDA 20193220539	Loop-mediated Isothermal Amplification
THERMO ST16R	Thermo Fisher Scientific	SEDA 20180585	Centrifuge the residual liquid off the wall of the tube.
Vortex mixer VM-5005	JOANLAB		For mixing reagent