Optische Klärung und Markierung für die Lichtblatt-Fluoreszenzmikroskopie in der großflächigen Bildgebung des menschlichen Gehirns

Das menschliche Gehirn ist ein komplexes Organ, das verschiedene Fähigkeiten umfasst. Um seine Funktionsweise zu verstehen, ist es wichtig, eine detaillierte Zellsensorik über das gesamte Gehirn hinweg zu konstruieren. Unser routinemäßiges Hochdurchsatzprotokoll ermöglicht die Analyse der 3D-Zytoarchitektur von volumetrischen Bereichen des menschlichen Gehirns mit Mikrometerauflösung und ermöglicht so die strukturelle Charakterisierung.

Die volumetrische Rekonstruktion großer Bereiche des menschlichen Gehirns stellt mehrere experimentelle Herausforderungen dar, die mit den massiven Abmessungen der Gehirnproben, der komplexen biologischen Zusammensetzung, den variablen postmortalen Fixierungs- und Lagerbedingungen und den autofluoreszierenden Signalen von lipofuszinartigen Pigmenten zusammenhängen. All dies kann die optische Reinigungseffizienz und die Demonstrationsqualität beeinträchtigen. Im Vergleich zu anderen Clearing-Techniken kann die Kurzgewebstransformationsmethode in Kombination mit der Lichtblattmikroskopie für die schnelle und gleichzeitige Verarbeitung mehrerer menschlicher Hirnschnitte verwendet werden.

Diese führen zu einer 3D-Gehirnrekonstruktion mit subzellulärer Auflösung.