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En este artículo

  • Resumen
  • Resumen
  • Introducción
  • Protocolo
  • Resultados Representativos
  • Discusión
  • Divulgaciones
  • Agradecimientos
  • Materiales
  • Referencias
  • Reimpresiones y Permisos

Resumen

Este protocolo introduce una técnica para inducir modelos de síndrome de ovario poliquístico (SOP) en ratones mediante la liberación controlada de letrozol utilizando minibombas. Bajo la anestesia adecuada, la minibomba se implantó por vía subcutánea y se indujo con éxito el SOP en los ratones después de un cierto período de liberación de la minibomba.

Resumen

El síndrome de ovario poliquístico (SOP) es una de las principales causas de infertilidad en las mujeres. Los modelos animales se utilizan ampliamente para estudiar los mecanismos etiológicos del síndrome de ovario poliquístico y para el desarrollo de fármacos relacionados. Los modelos de ratón inducidos por letrozol replican los fenotipos metabólicos y reproductivos de los pacientes con SOP. El método tradicional de tratamiento con letrozol en ratones con SOP requiere una dosis diaria durante un cierto período, lo que puede ser laborioso y causar un estrés significativo a los ratones. Este estudio describe un método sencillo y eficaz para inducir el síndrome de ovario poliquístico en ratones mediante la implantación de una minibomba liberadora de letrozol controlada. Se fabricó una minibomba capaz de liberar de forma estable y continua una cantidad cuantitativa de letrozol y se implantó por vía subcutánea en ratones bajo anestesia. Este estudio demostró que el modelo de ratón imitó con éxito las características del SOP después de la implantación de la minibomba de letrozol. Los materiales y equipos utilizados en este estudio están fácilmente disponibles para la mayoría de los laboratorios, sin necesidad de una personalización especial. En conjunto, este artículo proporciona un método único y fácil de realizar para inducir el SOP en ratones.

Introducción

El síndrome de ovario poliquístico (SOP) es una de las afecciones más comunes entre las mujeres en edad reproductiva1. Afecta hasta el 18% de las mujeres a nivel mundial y es la principal causa de infertilidad femenina en todo el mundo 2,3. El síndrome de ovario poliquístico se caracteriza por una serie de anomalías reproductivas interrelacionadas, como la secreción alterada de gonadotropinas, la anovulación crónica, el aumento de la producción de andrógenos y la morfología ovárica poliquística4. Además de los trastornos ginecoló....

Protocolo

Todos los protocolos experimentales con animales de este estudio fueron aprobados por el Comité de Ética Animal de la Universidad de Fudan. Aquí se utilizaron ratones hembra C57BL/6J, de 4 semanas de edad. Los detalles de los animales, reactivos y equipos utilizados en este estudio se enumeran en la Tabla de Materiales.

1. Preparación de la minibomba

  1. Tome el polvo de letrozol (50 mg) almacenado en el frasco de embalaje original, centrifugue el polvo de letrozol en el frasco a 300 x g durante 5 s (a temperatura ambiente) y luego abra el tapón.
  2. Ag....

Resultados Representativos

El protocolo experimental y algunos pasos críticos se muestran en la Figura 1 y la Figura 2. Los niveles séricos de testosterona se muestran en la Figura 3A. Los ratones tratados con letrozol con minibomba (en lo sucesivo denominados ratones LTZ) mostraron niveles de testosterona sérica significativamente elevados en comparación con los ratones de control hembra. Mientras tanto, el análisis his.......

Discusión

Este informe muestra un protocolo simple para inducir el síndrome de ovario poliquístico en ratones utilizando materiales de fácil acceso. El modelo de SOP en ratones es esencial para explorar los mecanismos del SOP y el cribado de fármacos26. De los métodos disponibles para inducir modelos de SOP en ratones, la inducción de letrozol es uno de los más utilizados. El uso de letrozol puede desarrollar y mantener una condición hiperandrogénica al inhibir la .......

Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

El estudio contó con el apoyo del Programa Nacional de Investigación y Desarrollo Clave de China (subvenciones 2021YFC2700701), la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (subvenciones 82088102, 82071731, 82171613, 8227034, 81601238), el Fondo de Innovación de la Academia China de Ciencias Médicas para Ciencias Médicas (subvención 2019-I2M-5-064), la Comisión de Ciencia y Tecnología del Ayuntamiento de Shanghái (subvenciones 21Y11907600), la Comisión Municipal de Salud y Planificación Familiar de Shanghái (subvención 20215Y0216), Programa de Innovación Colaborativa de la Comisión Municipal de Salud de Shanghái (subvención 2....

Materiales

NameCompanyCatalog NumberComments
SyringeBofeng BiotechBD3008411ML (sterile)
Centrifugation tubeBiological Hope1850-K15ML (sterile)
PipetteEppendorf3123000268-A100μL-1000μL (sterile)
PipetteTopPette701010100810μL-100μL (sterile)
Letrozole powderSigmaL6545-50MGPrimary acting drugs (sterile)
PEG(Poly(ethylene glycol))SolarbioP8250Used for dissolution (sterile)
Sterile Physiological Saline SolutionBiosharpBL158AMini-pump storage
Osmotic PumpsALZET1004Letrozole storage and sustained release (sterile)
Dimethyl sulfoxideBiosharpBS087Used for dissolution (sterile)
Small Animal Anesthesia MachineRWD R500IPUsed for anesthesia
Isoflurane RWD20071302Used for anesthesia
HemostatsBiosharpBS-HF-S-125Surgical instrument
ScissorsBiosharpBS-SOR-S-100PSurgical instrument
Needle holderShangHaiJZJ32010Surgical instrument
ForcepsRWD F12028Surgical instrument
Needle and the 4-0 absorbable sutureJINGHUANCR413Surgical instrument
Povidone-iodine swabsSingleLadyGB26368-2010Skin disinfection
Depilatory creamZIKER BIOTECHNOLOGYZK-L2701 Depilation agent for laboratory animals
Nitrile GlovesBiosharpBC040-LUsed for aseptic operation
Sterile gauzeZHENDEBA69087Used for wiping liquids
C57BL/6J MiceShanghai Model Organisms CenterN/AAge: 4 weeks
Pet Eye LubricantBAITESHF021153Used for mouse eye lubricant
Meloxicam InjectionMEIDAJIAR21064-21Used for mouse analgesia (sterile)

Referencias

  1. Dapas, M., Dunaif, A. Deconstructing a syndrome: Genomic insights into PCOS causal mechanisms and classification. Endocr Rev. 43 (6), 927-965 (2022).
  2. Teede, H., et al. Anti-mül....

Reimpresiones y Permisos

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