Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.

В этой статье

  • Резюме
  • Аннотация
  • Введение
  • протокол
  • Результаты
  • Обсуждение
  • Раскрытие информации
  • Благодарности
  • Материалы
  • Ссылки
  • Перепечатки и разрешения

Резюме

Этот протокол представляет собой технику индукции моделей синдрома поликистозных яичников (СПКЯ) у мышей с помощью контролируемого высвобождения летрозола с помощью мини-насосов. Под адекватной анестезией мини-помпа была имплантирована подкожно, и СПКЯ был успешно индуцирован у мышей после определенного периода выпуска мини-помпы.

Аннотация

Синдром поликистозных яичников (СПКЯ) является одной из ведущих причин бесплодия у женщин. Животные модели широко используются для изучения этиологических механизмов СПКЯ и для разработки связанных с ним лекарств. Мышиные модели, индуцированные летрозолом, воспроизводят метаболические и репродуктивные фенотипы пациентов с СПКЯ. Традиционный метод лечения летрозолом у мышей с СПКЯ требует ежедневного дозирования в течение определенного периода, что может быть трудоемким и вызывать значительный стресс у мышей. В этом исследовании описан простой и эффективный метод индуцирования СПКЯ у мышей путем имплантации контролируемого мини-насоса, высвобождающего летрозол. Мини-насос, способный стабильно непрерывно высвобождать количественное количество летрозола, был изготовлен и имплантирован подкожно мышам под наркозом. Это исследование показало, что мышиная модель успешно имитировала особенности СПКЯ после имплантации мини-помпы летрозола. Материалы и оборудование, использованные в этом исследовании, легко доступны для большинства лабораторий и не требуют специальной настройки. В совокупности эта статья представляет собой уникальный, простой в исполнении метод индуцирования СПКЯ у мышей.

Введение

Синдром поликистозных яичников (СПКЯ) является одним из наиболее распространенных состояний среди женщин репродуктивного возраста1. Он поражает до 18% женщин во всем мире и является основной причиной женского бесплодия во всем мире 2,3. СПКЯ характеризуется рядом взаимосвязанных репродуктивных аномалий, включая нарушение секреции гонадотропинов, хроническую ановуляцию, повышенную выработку андрогенов и морфологию поликистозных яичников4. Помимо гинекологических нарушений, СПКЯ также повышает риск сердечно-сосудистых заболеваний

протокол

Все протоколы экспериментов на животных в этом исследовании были одобрены Комитетом по этике животных Фуданьского университета. Здесь использовали самок мышей C57BL/6J в возрасте 4 недель. Подробная информация о животных, реагентах и оборудовании, использованных в этом исследовании, приведена в Таблице материалов.

1. Подготовка мини-насоса

  1. Возьмите порошок летрозола (50 мг), хранящийся в оригинальной упаковке, центрифугируйте порошок летрозола во флаконе при 300 х г в течение 5 с (при комнатной температуре), затем откройте крышку.
  2. Медленно добав....

Результаты

Протокол эксперимента и некоторые критические шаги показаны на рисунках 1 и 2. Уровни тестостерона в сыворотке крови показаны на рисунке 3А. У мышей, получавших лечение мини-помпой Летрозола (далее именуемых мышами LTZ), на.......

Обсуждение

В этом отчете демонстрируется простой протокол для индуцирования СПКЯ у мышей с использованием легкодоступных материалов. Мышиная модель СПКЯ имеет важное значение для изучения механизмов СПКЯ и скрининга лекарственных препаратов26. Из доступных метод?.......

Раскрытие информации

Авторам нечего раскрывать.

Благодарности

Исследование выполнено при поддержке Национальной программы ключевых исследований и разработок Китая (гранты 2021YFC2700701), Национального фонда естественных наук Китая (гранты 82088102, 82071731, 82171613, 8227034, 81601238), Инновационного фонда медицинских наук Китайской академии медицинских наук по медицинским наукам (грант 2019-I2M-5-064), Комиссии по науке и технологиям муниципалитета Шанхая (гранты 21Y11907600), Шанхайской муниципальной комиссии по здравоохранению и планированию семьи (грант 20215Y0216), Совместная инновационная программа Шанхайской муниципальной комиссии по здравоохранению (грант 2020CXJQ01), План клинически....

Материалы

NameCompanyCatalog NumberComments
SyringeBofeng BiotechBD3008411ML (sterile)
Centrifugation tubeBiological Hope1850-K15ML (sterile)
PipetteEppendorf3123000268-A100μL-1000μL (sterile)
PipetteTopPette701010100810μL-100μL (sterile)
Letrozole powderSigmaL6545-50MGPrimary acting drugs (sterile)
PEG(Poly(ethylene glycol))SolarbioP8250Used for dissolution (sterile)
Sterile Physiological Saline SolutionBiosharpBL158AMini-pump storage
Osmotic PumpsALZET1004Letrozole storage and sustained release (sterile)
Dimethyl sulfoxideBiosharpBS087Used for dissolution (sterile)
Small Animal Anesthesia MachineRWD R500IPUsed for anesthesia
Isoflurane RWD20071302Used for anesthesia
HemostatsBiosharpBS-HF-S-125Surgical instrument
ScissorsBiosharpBS-SOR-S-100PSurgical instrument
Needle holderShangHaiJZJ32010Surgical instrument
ForcepsRWD F12028Surgical instrument
Needle and the 4-0 absorbable sutureJINGHUANCR413Surgical instrument
Povidone-iodine swabsSingleLadyGB26368-2010Skin disinfection
Depilatory creamZIKER BIOTECHNOLOGYZK-L2701 Depilation agent for laboratory animals
Nitrile GlovesBiosharpBC040-LUsed for aseptic operation
Sterile gauzeZHENDEBA69087Used for wiping liquids
C57BL/6J MiceShanghai Model Organisms CenterN/AAge: 4 weeks
Pet Eye LubricantBAITESHF021153Used for mouse eye lubricant
Meloxicam InjectionMEIDAJIAR21064-21Used for mouse analgesia (sterile)

Ссылки

  1. Dapas, M., Dunaif, A. Deconstructing a syndrome: Genomic insights into PCOS causal mechanisms and classification. Endocr Rev. 43 (6), 927-965 (2022).
  2. Teede, H., et al. Anti-mül....

Перепечатки и разрешения

Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи

Запросить разрешение

Смотреть дополнительные статьи

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Исследования

Образование

О JoVE

Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены