El trasplante de páncreas es un tratamiento curativo para las personas con diabetes. Sin embargo, los órganos son escasos y se necesitan estrategias para mejorar el grupo de donantes. La perfusión Normothermic Ex Vivo ya ha tenido éxito para otros órganos que potencialmente podrían permitir la evaluación y reparación de los aloinjertos del páncreas.
El páncreas es el órgano que se descarta con mayor frecuencia para trasplante. Esta técnica tiene el potencial de aumentar el conjunto de órganos para las personas que viven con diabetes complicada. Este método también nos permitirá comprender mejor la lesión por isquemia-reperfusión e identificar biomarcadores de daño pancreático.
La configuración puede ser un poco complicada, y teniendo en cuenta que el páncreas es un órgano muy sensible, es necesaria la práctica para su recuperación. Para comenzar, desinfectar y cubrir el campo quirúrgico. Realice una incisión en la línea media desde la xifoidea hasta la sínfisis púbica y extienda el campo quirúrgico con una incisión lateral izquierda para una mejor exposición.
Diseccionar la vena cava inferior de la aorta abdominal. Libera aún más la aorta del tejido circundante y liga las pequeñas ramas aórticas lumbares. Identificar y colocar ligaduras alrededor de ambas arterias renales.
Una vez que la parte posterior de la aorta esté libre, pase dos ligaduras a su alrededor donde la ligadura inferior eventualmente se atará justo por encima de la bifurcación de la arteria ilíaca, y la ligadura superior se atará cinco centímetros por encima de la corbata anterior. Después de diseccionar el hilio hepático, ate todas las arterias lo más cerca posible del hígado. Luego identifique el conducto biliar común.
Coloque dos ligaduras cerca del hígado y divida la estructura. A continuación, identifique y diseccione alrededor de la porción suprahepática de la aorta y coloque un lazo alrededor de ella. Luego, abra el saco menor para permitir que el hielo enfríe el páncreas y movilice el páncreas lo menos posible antes de enjuagar.
Luego administre 500 unidades internacionales de heparina por kilogramo de peso del donante a través de la vía central, y comience la recolección de sangre en bolsas de citrato, fosfato, dextrosa, solución salina, adenina, glucosa y manitol utilizando el catéter yugular. Después de atar la ligadura aórtica inferior, canulación de la aorta con una línea de enrasamiento por encima del lazo de bifurcación ilíaca. Asegure la cánula con el lazo superior y liga ambas arterias renales.
Una vez que se haya recolectado suficiente sangre, ate la aorta supracelíaca y coloque una pinza sobre la corbata. A continuación, inicie una descarga con la Solución de preservación de la Universidad de Wisconsin. Luego corte una abertura en la vena porta y cava para ventilar.
Después de enjuagar un litro de la Universidad de Wisconsin Solution, evalúe la cola del páncreas y el circuito C del duodeno. Y una vez que se enjuague adecuadamente, comience la disección identificando y sujetando los vasos mesentéricos. Recuperar el injerto pancreático, y un segmento de la cava o vena ilíaca, para la extensión de la vena porta.
Y coloque el órgano dentro de una bolsa de órganos que se coloca dentro de un recipiente lleno de hielo. Después de quitar la línea de lavado de la parte distal de la aorta, ciérrela con un lazo y llene la bolsa del órgano con la solución UW restante. A continuación, realice la extensión de la vena porta utilizando cava o vena ilíaca previamente recuperada con Proleno 6-0, y canule la vena porta y la aorta proximal con un cuarto veces 3/8 Reductor.
Luego canular la parte distal del duodeno con un catéter Malecot y amarrar. A continuación, sujete el extremo del catéter para evitar derramar el contenido duodenal y supervisó los vasos mesentéricos con Prolene 4-0. Después de registrar el peso del injerto, mantener el injerto en almacenamiento estático en frío hasta el inicio de la Perfusión de Páncreas Ex Vivo.
Coloca la cámara del páncreas sobre una mesa de Mayo e introduce el tubo arterial y venoso a través de los orificios destinados a este fin. Conecte y encienda la unidad de calefacción externa. Después de colocar el tubo de succión dentro de la bomba de rodillos, conecte un extremo al tubo que sale de la cámara para recoger los fluidos, y el otro extremo al depósito venoso para recoger toda la pérdida de órganos de perfusión.
Luego conecte el tubo de oxígeno al tanque de gas que contiene la mezcla de carbono y el oxigenador. Luego conecte el tubo de la unidad de bomba del calentador al oxigenador. Pinza arterius y líneas de salida venosa, así como la salida del reservorio venoso.
Después de llenar el reservorio venoso con el perfusión, usando una bomba de jeringa administrar continuamente el vasodilatador a ocho mililitros por hora en la línea arterial. Luego, usando una segunda bomba de jeringa, administre continuamente el inhibidor enzimático directamente en el reservorio venoso. Después de encender la máquina corazón-pulmón, encienda los paneles de presión, temperatura y temporizador.
Luego encienda la bomba del calentador para calentar la solución de perfusión a 38 grados centígrados y abra el suministro de dióxido de carbono de oxígeno. Luego retire la abrazadera de tubo colocada en la salida del depósito venoso y encienda la bomba centrífuga, llevándola hasta 1, 500 RPM. A continuación, sujete el tubo sin pasar por el filtro arterial.
Y liberar aire del filtro arterial. Después, cero las líneas de presión arterial y venosa. Después de abrir la bolsa de órganos donde se almacena el páncreas, enjuague con 200 mililitros de albúmina a través de la cánula arterial.
Luego retire el páncreas del hielo y colóquelo dentro de la cámara del órgano, asegurándose de que los tubos arteriales y venosos estén libres de aire. Luego, después de liberar la pinza del lado arterial, sujete el atajo entre el tubo arterial y venoso. Una vez que la sangre comience a salir del tubo arterial, conecte la línea a la cánula arterial.
Luego ajuste la presión arterial a 20 a 25 milímetros de mercurio regulando la velocidad de la bomba centrífuga y conecte el tubo venoso una vez que la sangre comience a salir de la cánula venosa. A continuación, administre un vial de verapamilo directamente en el lado arterial cuando el páncreas esté completamente conectado y no se observen hemorragias de medida. Después de registrar los diversos parámetros descritos en el manuscrito.
Tomar las muestras para su análisis. Desconecte los tubos arteriales y venosos cuando termine la perfusión. después de retirar el injerto de la cámara del órgano, enjuague con la solución fría de la Universidad de Wisconsin y pese.
Luego guarde el injerto en hielo en una bolsa de órganos estéril hasta el momento del trasplante. La presión y el flujo se midieron a través de toda la perfusión, y los resultados demostraron que permanece estable. La actividad metabólica se estimó calculando el consumo medio de oxígeno del injerto.
Los resultados muestran que las mediciones de pH, sodio, calcio y bicarbonato estuvieron dentro de los valores fisiológicos durante toda la perfusión. Se observó que los niveles de lactato y potasio disminuyeron durante la perfusión y alcanzaron valores cercanos a los normales a las tres horas. Dado que el circuito es un sistema cerrado, se esperaba que los niveles de amilasa y lipasa aumentaran durante la perfusión.
Sin embargo, el aumento en los niveles no parece correlacionarse con el daño al injerto. Es muy importante recordar que el páncreas debe manipularse lo menos posible antes del lavado y durante la extracción. Esperamos que en el futuro, este modelo permita intervenciones terapéuticas para reparar órganos no aptos para trasplantes.
Esta técnica permitirá a los investigadores estudiar más a fondo la lesión por isquemia-reperfusión pancreática, preservación, evaluación y, finalmente, reparación.
