Electroporation-Based DNA Plasmids Delivery to Induce In Vivo Mutations in the Mouse

Commencez l’administration de plasma d’ADN par électroporation en plaçant un morceau carré de film de paraffine sur la table et en pressant le gel d’électrode sur le dessus du film. Appliquez ensuite une quantité généreuse de gel d’électrode sur chaque palette pour recouvrir complètement les palettes d’électrode. Ensuite, tenez le chiot micro-injecté avec le mélange d’ADN plasmidique dans la main non dominante, en gardant les doigts derrière la tête.

Pour positionner la tête du chiot pour l’électroporation, faites glisser doucement un doigt sur la face dorsale suivante, postérieure à la tête, et positionnez l’électrode positive à l’extérieur de la tête où le ventricule est ciblé. Placez l’électrode sur l’œil du chiot et pressez légèrement les palettes de l’électrode sur la partie rostrale de la tête du chiot. Appuyez sur la pédale de l’électrode pour démarrer l’électroporation.

À chaque impulsion, tournez légèrement les palettes d’électrode, dans le sens inverse des aiguilles d’une montre, de sorte que la palette positive se déplace vers le haut de la tête. Après la dernière impulsion, retirez les palettes et mettez-les de côté. Les souris étaient moribondes cinq mois après l’électroporation, avec une croissance tumorale complète détectée par la protéine rapporteure et l’analyse histologique.