Nous présentons un pipeline standard pour obtenir des tumeurs MATC et présenter la dynamique tumorale et les informations pathologiques. Ce module aidera les chercheurs à comprendre l’oncogenèse tumorale et facilitera la découverte de médicaments. Le MATC facilite la collecte d’échantillons MATC dans l’ensemble du cours d’oncogenèse tumorale, et chacun est un modèle miroir spontané, avec le système immunitaire complet et le microenvironnement immunitaire.
MATC peut être utilisé pour étudier les effets de fonctions génétiques spécifiques sur l’ATC, comprendre les mécanismes de la progression des tumeurs thyroïdiennes et, en fin de compte, améliorer le pronostic des patients ATC. Pour commencer, pesez le tamoxifène et dissolvez-le dans 15 millilitres d’huile de maïs par ultrasons à une concentration de 20 milligrammes par millilitre. Ensuite, conservez-le dans un récipient brun à quatre degrés Celsius.
Vers huit semaines, pesez les souris avec des balances électroniques, puis administrez le tamoxifène par voie intrapéritonéale deux fois à un intervalle d’une semaine. Après avoir préparé les outils de dissection et la solution de fixation du tissu de souris, remplissez une boîte propre de 10 centimètres avec environ 10 millilitres de PBS stérile pour le stockage temporaire des tissus et pour laver le sang de la surface des tissus. Pour l’extraction thyroïdienne, placez la souris euthanasiée sur la planche de dissection.
Après avoir désinfecté la région du cou, utilisez des ciseaux et des pinces stériles. Faites une petite incision au-dessus du centre de la clavicule et continuez à mi-chemin jusqu’à la bouche. Localisez la glande sous-maxillaire et retirez-la pour exposer l’emplacement anatomique de la thyroïde, qui se trouve près du cartilage thyroïdien et de la trachée.
Une fois la glande thyroïde localisée, disséquez-la soigneusement du reste de la région du cou à l’aide de ciseaux stériles et mettez-la dans le plat préalablement préparé contenant du PBS stérile. Retirez le sang de la surface du tissu thyroïdien et, avec des ciseaux stériles, coupez soigneusement la trachée. Ensuite, placez le tissu thyroïdien sur le tissu stérile et mesurez la taille des lobes gauche et droit de la glande thyroïde à l’aide d’étriers Vernier.
À l’aide d’une lame stérile, divisez les lobes gauche et droit de la glande thyroïde en deux parties. Mettre une partie dans deux millilitres de solution de paraformaldéhyde à 4% pour la fixation et une autre dans de l’azote liquide pour la conservation. Pour extraire le poumon et le foie, pincez juste au-dessus du pénis de la souris après avoir désinfecté la zone.
Ensuite, faites une petite incision et coupez le long de la ligne médiane de l’abdomen jusqu’à l’os sous-clavier. Exposez la cavité abdominale. Après avoir localisé le foie dans la partie supérieure de l’abdomen, retirez-le délicatement et placez-le dans un nouveau plat contenant du PBS stérile.
Observez grossièrement et comptez les métastases dans les poumons et le foie, puis obtenez une image. Avec une lame stérile, divisez les tissus pulmonaires et hépatiques en deux parties. Comme démontré précédemment, fixez une partie et conservez l’autre partie dans de l’azote liquide.
La courbe de croissance tumorale a été tracée pour observer l’altération dynamique de la taille de la tumeur. Les tumeurs se sont développées lentement au stade précoce et sont devenues considérablement plus rapides à un stade avancé. D’autre part, une courbe de survie a été tracée en fonction du temps de survie enregistré.
La survie médiane du MATC était de 130 jours. De plus, environ 92 % de métastases pulmonaires ont été observées dans la plupart des MATC. Dans la coloration HE des tumeurs primaires et des tissus pulmonaires métastatiques de MATC, les tissus inductibles d’un mois ont montré des caractéristiques solidifiées incomplètes et la coexistence de structures folliculaires et de cellules malignes, tandis que les structures folliculaires thyroïdiennes ont disparu et la tumeur s’est solidifiée complètement après une induction de deux mois.
La tumeur primaire a révélé que les cellules tumorales étaient morphologiquement diverses, avec des cellules géantes pléomorphes et des cellules fusiformes. De plus, la coloration HE des tissus pulmonaires métastatiques a montré que le tissu pulmonaire normal était une structure réticulaire avec des structures alvéolaires et des espaces aériens clairs. Néanmoins, les métastases pulmonaires ont montré une perte de la structure réticulaire normale, un épaississement de la cavité aérienne et un parenchyme pulmonaire.
Pendant ce temps, la coloration immunohistochimique de la tumeur MATC avec différents anticorps a montré des cellules tumorales hautement prolifératives, une infiltration lymphocytaire, une infiltration étendue de cellules myéloïdes, ce qui était cohérent avec les échantillons cliniques. Pendant la dissection, l’emplacement anatomique de la glande thyroïde doit être correctement compris. La glande thyroïde est placée près du cartilage thyroïdien et de la trachée.
