Мы представляем стандартный конвейер для получения опухолей MATC и представляем динамику опухоли и патологическую информацию. Этот модуль поможет исследователям понять онкогенез опухоли и облегчит открытие лекарств. MATC облегчает сбор образцов MATC во всем ходе онкогенеза опухоли, и каждый из них представляет собой спонтанную зеркальную модель с полной иммунной системой и иммунным микроокружением.
MATC может быть использован для изучения влияния определенных функций генов на ATC, понимания механизмов прогрессирования опухоли щитовидной железы и, в конечном итоге, улучшения прогноза пациентов с ATC. Для начала взвесьте тамоксифен и растворите его в 15 миллилитрах кукурузного масла с помощью ультразвука в концентрации 20 миллиграмм на миллилитр. Затем храните его в коричневом контейнере при температуре четыре градуса Цельсия.
Примерно через восемь недель взвесьте мышей с помощью электронных весов, а затем дважды введите тамоксифен внутрибрюшинно с интервалом в одну неделю. После приготовления инструментов для вскрытия и фиксирующего раствора мышиной ткани наполните чистую 10-сантиметровую посуду примерно 10 миллилитрами стерильного PBS для временного хранения тканей и для смывания крови с поверхности ткани. Для извлечения щитовидной железы поместите усыпленную мышь на доску для препарирования.
После дезинфекции области шеи используйте стерильные ножницы и щипцы. Сделайте небольшой разрез над центром ключицы и продолжайте по средней линии до рта. Найдите подчелюстную железу и удалите ее, чтобы обнажить анатомическое расположение щитовидной железы, которая находится рядом со щитовидным хрящом и трахеей.
После того, как щитовидная железа будет обнаружена, аккуратно рассекают остальную область шеи с помощью стерильных ножниц и помещают ее в заранее подготовленную посуду, содержащую стерильный PBS. Удалите кровь с поверхности ткани щитовидной железы, а стерильными ножницами аккуратно отрежьте трахею. Затем положите ткань щитовидной железы на стерильную ткань и измерьте размер левой и правой долей щитовидной железы с помощью штангенциркуля.
С помощью стерильного лезвия разделите левую и правую доли щитовидной железы на две части. Поместите одну часть в два миллилитра 4%-ного раствора параформальдегида для фиксации, а другую - в жидкий азот для консервации. Для извлечения легких и печени ущипните чуть выше пениса мыши после дезинфекции области.
Затем делают небольшой надрез и разрезают по средней линии живота до подключичной кости. Обнажить брюшную полость. Найдя печень в верхней части живота, осторожно извлеките ее и поместите в новую посуду, содержащую стерильный PBS.
Грубо наблюдают и подсчитывают метастазы в легких и печени с последующим получением снимка. Стерильным лезвием разделите ткани легких и печени на две части. Как было показано ранее, зафиксируйте одну часть, а другую оставьте в жидком азоте.
Кривая роста опухоли была построена для наблюдения за динамическим изменением размера опухоли. Опухоли росли медленно на ранней стадии и стали значительно быстрее на поздней стадии. С другой стороны, кривая выживаемости была построена на основе зарегистрированного времени выживания.
Медиана выживаемости MATC составила 130 дней. Кроме того, примерно 92% метастазов в легких было обнаружено в большинстве MATC. При ПЭ-окрашивании первичных опухолей и метастатических тканей легких MATC индуцируемые ткани в течение одного месяца показали неполные затвердевшие черты и сосуществование фолликулярных структур и злокачественных клеток, тогда как фолликулярные структуры щитовидной железы исчезли, и опухоль полностью затвердела после двухмесячной индукции.
Первичная опухоль показала, что опухолевые клетки были морфологически разнообразными, с плеоморфными гигантскими клетками и веретенообразными клетками. Кроме того, ОФ-окрашивание метастатических тканей легких показало, что нормальная легочная ткань представляет собой ретикулярную структуру с четкими альвеолярными структурами и воздушными пространствами. Тем не менее, метастазы в легких показали потерю нормальной ретикулярной структуры, утолщение воздушной полости и паренхиму легких.
Между тем, иммуногистохимическое окрашивание опухоли MATC различными антителами показало высокую пролиферацию опухолевых клеток, инфильтрацию лимфоцитов, обширную инфильтрацию миелоидных клеток, что соответствовало клиническим образцам. Во время рассечения нужно правильно понимать анатомическое расположение щитовидной железы. Щитовидная железа расположена рядом с щитовидным хрящом и трахеей.
