我们提出了一个标准管道来获取MATC肿瘤,并呈现肿瘤动力学和病理信息。该模块将帮助研究人员了解肿瘤肿瘤发生并促进药物发现。MATC便于在整个肿瘤肿瘤发生过程中收集MATC样本,并且每个样本都是自发镜像模型,具有完整的免疫系统和免疫微环境。
MATC可用于研究特定基因功能对ATC的影响,了解甲状腺肿瘤进展的机制,最终改善ATC患者的预后。首先,称量他莫昔芬并通过超声波将其溶解在15毫升玉米油中,浓度为每毫升20毫克。然后将其存放在四摄氏度的棕色容器中。
在大约八周时,用电子秤称量小鼠,然后以一周的间隔腹膜内注射他莫昔芬两次。准备好解剖工具和小鼠组织固定溶液后,用约10毫升无菌PBS填充干净的10厘米培养皿,用于临时组织储存,并洗去组织表面的血液。对于甲状腺提取,将安乐死的小鼠放在解剖板上。
对颈部区域进行消毒后,使用无菌剪刀和镊子。在锁骨中心上方做一个小切口,然后继续在中线到嘴。找到下颌下腺并将其移除,以暴露甲状腺的解剖位置,该位置靠近甲状腺软骨和气管。
找到甲状腺后,使用无菌剪刀从颈部区域的其余部分仔细解剖,并将其放入先前制备的含有无菌PBS的培养皿中。从甲状腺组织表面取出血液,并用无菌剪刀小心地切断气管。然后将甲状腺组织放在无菌布上,并使用游标卡尺测量甲状腺左右叶的大小。
使用无菌刀片,将甲状腺的左叶和右叶分成两部分。将一部分放入两毫升4%多聚甲醛溶液中固定,另一部分放入液氮中保存。为了提取肺和肝脏,在对该区域进行消毒后,请捏住小鼠阴茎上方。
然后做一个小切口,沿着腹部中线切到锁骨下骨。暴露腹腔。将肝脏定位在腹部上部后,小心地将其取出并将其放入含有无菌PBS的新培养皿中。
粗略观察并计数肺和肝脏的转移,然后获得图片。用无菌刀片将肺和肝组织分成两部分。如前所述,固定一部分并将另一部分保存在液氮中。
绘制肿瘤生长曲线以观察肿瘤大小的动态变化。肿瘤在早期生长缓慢,在晚期变得明显更快。另一方面,根据记录的生存时间绘制生存曲线。
MATC的中位生存期为130天。此外,在大多数MATC中发现了约92%的肺转移。在MATC原发肿瘤和转移性肺组织的HE染色中,1个月诱导组织表现出不完全固化特征,滤泡结构与恶性细胞并存,而甲状腺滤泡结构消失,诱导2个月后肿瘤完全凝固。
原发肿瘤显示肿瘤细胞形态多样,具有多形性巨细胞和纺锤形细胞。此外,转移性肺组织的HE染色显示,正常肺组织为网状结构,肺泡结构和气腔清晰。然而,肺转移显示正常网状结构丧失、气腔增厚和肺实质。
同时,不同抗体对MATC肿瘤的免疫组化染色显示肿瘤细胞高度增殖,淋巴细胞浸润,骨髓细胞广泛浸润,与临床样本一致。在解剖过程中,需要正确了解甲状腺的解剖位置。甲状腺位于甲状腺软骨和气管附近。