Apresentamos um pipeline padrão para obtenção de tumores MATC e apresentamos a dinâmica tumoral e informações patológicas. Este módulo ajudará os pesquisadores a entender a oncogênese tumoral e facilitará a descoberta de drogas. O MATC facilita a coleta de amostras de MATC em todo o curso da oncogênese tumoral, e cada uma é um modelo de espelho espontâneo, com o sistema imunológico completo e microambiente imune.
O MATC pode ser usado para estudar os efeitos de funções gênicas específicas sobre a ATC, entender os mecanismos de progressão do tumor de tireoide e, finalmente, melhorar o prognóstico de pacientes com ATC. Para começar, pese o tamoxifeno e dissolva-o em 15 mililitros de óleo de milho por ultrassom a uma concentração de 20 miligramas por mililitro. Em seguida, guarde-o em um recipiente marrom a quatro graus Celsius.
Por volta de oito semanas, pesar os camundongos com balanças eletrônicas e, em seguida, administrar tamoxifeno por via intraperitoneal duas vezes com intervalo de uma semana. Depois de preparar as ferramentas de dissecção e a solução de fixação de tecido de rato, encha uma placa limpa de 10 centímetros com cerca de 10 mililitros de PBS estéril para armazenamento temporário de tecidos e para lavar o sangue da superfície do tecido. Para extração da tireoide, colocar o camundongo eutanasiado na placa dissecante.
Depois de desinfetar a área do pescoço, use tesouras e pinças estéreis. Faça uma pequena incisão acima do centro da clavícula e continue na linha média até a boca. Localize a glândula submandibular e retire-a para expor a localização anatômica da tireoide, que fica próxima à cartilagem tireoide e traqueia.
Uma vez localizada a glândula tireoide, dissecada cuidadosamente do restante da região do pescoço com tesoura estéril e coloque-a na placa previamente preparada contendo PBS estéril. Remova o sangue da superfície do tecido tireoidiano e, com uma tesoura estéril, corte cuidadosamente a traqueia. Em seguida, coloque o tecido tireoidiano no pano estéril e meça o tamanho dos lobos esquerdo e direito da glândula tireoide usando paquímetro Vernier.
Usando uma lâmina estéril, divida os lobos esquerdo e direito da glândula tireoide em duas partes. Coloque uma parte em dois mililitros de solução de paraformaldeído a 4% para fixação e outra em nitrogênio líquido para preservação. Para extrair o pulmão e o fígado, aperte logo acima do pênis do rato depois de desinfetar a área.
Em seguida, faça uma pequena incisão e corte ao longo da linha média do abdome até o osso subclávio. Expor a cavidade abdominal. Depois de localizar o fígado na parte superior do abdômen, remova-o cuidadosamente e coloque-o em um novo prato contendo PBS estéril.
Observar e contar grosseiramente as metástases no pulmão e fígado, seguido da obtenção de uma imagem. Com uma lâmina estéril, divida os tecidos pulmonar e hepático em duas partes. Como demonstrado anteriormente, fixe uma parte e preserve a outra parte em nitrogênio líquido.
A curva de crescimento tumoral foi traçada para observar a alteração dinâmica do tamanho tumoral. Os tumores cresceram lentamente no estágio inicial, e se tornaram dramaticamente mais rápidos no estágio tardio. Por outro lado, uma curva de sobrevida foi traçada com base no tempo de sobrevida registrado.
A sobrevida mediana da CTAM foi de 130 dias. Além disso, aproximadamente 92% de metástases pulmonares foram encontradas na maioria dos MATC. Na coloração HE dos tumores primários e tecidos pulmonares metastáticos da MATC, os tecidos induzíveis de um mês mostraram características solidificadas incompletas e a coexistência de estruturas foliculares e células malignas, enquanto as estruturas foliculares da tireoide desapareceram e o tumor se solidificou completamente após dois meses de indução.
O tumor primário revelou que as células tumorais eram morfologicamente diversas, com células gigantes pleomórficas e células fusiformes. Além disso, a coloração HE dos tecidos pulmonares metastáticos mostrou que o tecido pulmonar normal era uma estrutura reticular com estruturas alveolares claras e espaços aéreos. No entanto, as metástases pulmonares mostraram perda da estrutura reticular normal, espessamento da cavidade aérea e parênquima pulmonar.
Enquanto isso, a coloração imuno-histoquímica do tumor MATC com diferentes anticorpos mostrou células tumorais altamente proliferativas, infiltração linfocitária, extensa infiltração de células mieloides, o que foi consistente com amostras clínicas. Durante a dissecção, a localização anatômica da glândula tireoide precisa ser corretamente compreendida. A glândula tireoide é colocada perto da cartilagem tireoide e da traqueia.
