Bu yazıda MATC tümörleri elde etmek ve tümör dinamikleri ile patolojik bilgiler sunmak için standart bir boru hattı sunulmaktadır. Bu modül, araştırmacıların tümör onkogenezini anlamalarına ve ilaç keşiflerini kolaylaştırmalarına yardımcı olacaktır. MATC, tüm tümör onkogenezi seyrinde MATC örneklerinin toplanmasını kolaylaştırır ve her biri tam bağışıklık sistemi ve bağışıklık mikroçevresi ile spontan bir ayna modelidir.
MATC, spesifik gen fonksiyonlarının ATC üzerindeki etkilerini incelemek, tiroid tümörü progresyonunun mekanizmalarını anlamak ve sonuçta ATC hastalarının prognozunu iyileştirmek için kullanılabilir. Başlamak için, tamoksifeni tartın ve mililitre başına 20 miligramlık bir konsantrasyonda ultrasonla 15 mililitre mısır yağı içinde çözün. Sonra dört santigrat derecede kahverengi bir kapta saklayın.
Yaklaşık sekiz haftada, fareleri elektronik terazilerle tartın ve ardından tamoksifeni bir hafta arayla iki kez intraperitoneal olarak uygulayın. Diseksiyon aletlerini ve fare-doku sabitleme solüsyonunu hazırladıktan sonra, geçici doku depolaması ve doku yüzeyindeki kanı yıkamak için yaklaşık 10 mililitre steril PBS ile temiz bir 10 santimetrelik kabı doldurun. Tiroid ekstraksiyonu için, ötenazi fareyi diseksiyon tahtasına yerleştirin.
Boyun bölgesini dezenfekte ettikten sonra steril makas ve forseps kullanın. Klavikulanın merkezinin üzerinde küçük bir kesi yapın ve orta hatta ağza kadar devam edin. Submandibuler bezi bulun ve tiroid kıkırdağı ve trakeaya yakın olan tiroidin anatomik yerini ortaya çıkarmak için çıkarın.
Tiroid bezi yerleştirildikten sonra, steril makas kullanarak boyun bölgesinin geri kalanından dikkatlice diseke edin ve steril PBS içeren önceden hazırlanmış kaba koyun. Kanı tiroid dokusunun yüzeyinden çıkarın ve steril makasla trakeayı dikkatlice kesin. Daha sonra tiroid dokusunu steril bezin üzerine koyun ve Vernier kumpaslarını kullanarak tiroid bezinin sol ve sağ loblarının boyutunu ölçün.
Steril bir bıçak kullanarak, tiroid bezinin sol ve sağ loblarını iki parçaya bölün. Bir parçayı sabitleme için iki mililitre% 4 paraformaldehit çözeltisine, diğerini ise koruma için sıvı azota koyun. Akciğeri ve karaciğeri çıkarmak için, bölgeyi dezenfekte ettikten sonra farenin penisinin hemen üstüne sıkıştırın.
Daha sonra küçük bir kesi yapın ve karın orta çizgisi boyunca subklaviyen kemiğe kesin. Karın boşluğunu açığa çıkarın. Karaciğeri karnın üst kısmına yerleştirdikten sonra, dikkatlice çıkarın ve steril PBS içeren yeni bir kaba yerleştirin.
Akciğer ve karaciğerdeki metastazı büyük ölçüde gözlemleyin ve sayın, ardından bir resim elde edin. Steril bir bıçakla, akciğer ve karaciğer dokularını iki parçaya bölün. Daha önce gösterildiği gibi, bir parçayı sabitleyin ve diğer kısmı sıvı azotta koruyun.
Tümör büyüme eğrisi, tümör boyutunun dinamik değişimini gözlemlemek için çizildi. Tümörler erken evrede yavaş büyüdü ve geç evrede çarpıcı bir şekilde daha hızlı hale geldi. Öte yandan, kaydedilen hayatta kalma süresine dayanarak bir hayatta kalma eğrisi çizildi.
MATC'nin medyan sağkalımı 130 gündü. Ek olarak, çoğu MATC'de yaklaşık% 92 akciğer metastazı bulundu. MATC'nin primer tümörleri ve metastatik akciğer dokularının HE boyamasında, bir aylık indüklenebilir dokular eksik katılaşmış özellikler ve foliküler yapılar ile malign hücrelerin bir arada bulunmasını gösterirken, tiroid foliküler yapıları kayboldu ve tümör iki aylık bir indüksiyondan sonra tamamen katılaştı.
Primer tümör, tümör hücrelerinin morfolojik olarak farklı olduğunu, pleomorfik dev hücreler ve iğ şeklindeki hücreler olduğunu ortaya koydu. Ayrıca, metastatik akciğer dokularının HE boyaması, normal akciğer dokusunun açık alveoler yapılara ve hava boşluklarına sahip retiküler bir yapı olduğunu göstermiştir. Bununla birlikte, akciğer metastazları normal retiküler yapı kaybı, hava boşluğu kalınlaşması ve akciğer parankimini gösterdi.
Bu arada, MATC tümörünün farklı antikorlarla immünohistokimyasal boyanması, klinik örneklerle tutarlı olan yüksek proliferatif tümör hücreleri, lenfosit infiltrasyonu, miyeloid hücrelerin geniş bir infiltrasyonunu gösterdi. Diseksiyon sırasında, tiroid bezinin anatomik yerinin doğru anlaşılması gerekir. Tiroid bezi tiroid kıkırdağının ve trakeanın yanına yerleştirilir.
