Wir stellen eine Standard-Pipeline zur Gewinnung von MATC-Tumoren vor und präsentieren Tumordynamik und pathologische Informationen. Dieses Modul wird Forschern helfen, die Onkogenese von Tumoren zu verstehen und die Entdeckung von Medikamenten zu erleichtern. Das MATC erleichtert die Entnahme von MATC-Proben während des gesamten Tumor-Onkogenese-Verlaufs, und jede ist ein spontanes Spiegelmodell mit dem gesamten Immunsystem und der Immunmikroumgebung.
MATC kann verwendet werden, um die Auswirkungen bestimmter Genfunktionen auf ATC zu untersuchen, die Mechanismen der Progression von Schilddrüsentumoren zu verstehen und letztendlich die Prognose von ATC-Patienten zu verbessern. Wiegen Sie zunächst Tamoxifen ab und lösen Sie es in 15 Millilitern Maisöl per Ultraschall in einer Konzentration von 20 Milligramm pro Milliliter auf. Anschließend in einem braunen Behälter bei vier Grad Celsius lagern.
Nach etwa acht Wochen werden die Mäuse mit einer elektronischen Waage gewogen und Tamoxifen dann zweimal im Abstand von einer Woche intraperitoneal verabreicht. Füllen Sie nach der Vorbereitung der Dissektionswerkzeuge und der Maus-Gewebe-Fixierlösung eine saubere 10-Zentimeter-Schale mit etwa 10 Millilitern sterilem PBS zur vorübergehenden Gewebelagerung und zum Abwaschen des Blutes von der Gewebeoberfläche. Für die Schilddrüsenentnahme legen Sie die euthanasierte Maus auf das Sezierbrett.
Verwenden Sie nach der Desinfektion des Halsbereichs eine sterile Schere und Pinzette. Machen Sie einen kleinen Schnitt über der Mitte des Schlüsselbeins und fahren Sie an der Mittellinie bis zum Mund fort. Lokalisieren Sie die Unterkieferdrüse und entfernen Sie sie, um die anatomische Lage der Schilddrüse freizulegen, die sich in der Nähe des Schildknorpels und der Luftröhre befindet.
Sobald die Schilddrüse lokalisiert ist, wird sie mit einer sterilen Schere vorsichtig vom Rest der Halsregion präpariert und in die zuvor zubereitete Schale mit sterilem PBS gelegt. Entfernen Sie das Blut von der Oberfläche des Schilddrüsengewebes und schneiden Sie die Luftröhre vorsichtig mit einer sterilen Schere ab. Legen Sie dann das Schilddrüsengewebe auf das sterile Tuch und messen Sie die Größe des linken und rechten Schilddrüsenlappens mit Messschiebern.
Teilen Sie mit einer sterilen Klinge den linken und rechten Schilddrüsenlappen in zwei Teile. Geben Sie einen Teil zur Fixierung in zwei Milliliter 4%ige Paraformaldehydlösung und einen anderen zur Konservierung in flüssigen Stickstoff. Um die Lunge und Leber zu extrahieren, kneifen Sie nach der Desinfektion des Bereichs direkt über den Penis der Maus.
Machen Sie dann einen kleinen Schnitt und schneiden Sie entlang der Mittellinie des Bauches bis zum Schlüsselbeinknochen. Lege die Bauchhöhle frei. Nachdem Sie die Leber im oberen Teil des Bauches lokalisiert haben, entfernen Sie sie vorsichtig und legen Sie sie in eine neue Schale mit sterilem PBS.
Grob beobachten und zählen Sie die Metastasen in Lunge und Leber und machen Sie sich anschließend ein Bild. Teilen Sie mit einer sterilen Klinge das Lungen- und Lebergewebe in zwei Teile. Wie zuvor gezeigt, fixieren Sie ein Teil und bewahren Sie das andere Teil in flüssigem Stickstoff auf.
Die Tumorwachstumskurve wurde aufgetragen, um die dynamische Veränderung der Tumorgröße zu beobachten. Die Tumore wuchsen im Frühstadium langsam und im Spätstadium dramatisch schneller. Zum anderen wurde eine Überlebenskurve auf der Grundlage der aufgezeichneten Überlebenszeit erstellt.
Die mediane Überlebenszeit von MATC betrug 130 Tage. Darüber hinaus wurden bei den meisten MATC etwa 92 % Lungenmetastasen gefunden. Bei der HE-Färbung der Primärtumoren und metastasierten Lungengewebe von MATC zeigten die einmonatigen induzierbaren Gewebe unvollständige verfestigte Merkmale und die Koexistenz von follikulären Strukturen und malignen Zellen, während die follikulären Strukturen der Schilddrüse verschwanden und der Tumor nach zweimonatiger Induktion vollständig verfestigte.
Der Primärtumor zeigte, dass die Tumorzellen morphologisch vielfältig waren, mit pleomorphen Riesenzellen und spindelförmigen Zellen. Des Weiteren zeigte die HE-Färbung von metastasiertem Lungengewebe, dass es sich bei dem normalen Lungengewebe um eine retikuläre Struktur mit klaren alveolären Strukturen und Lufträumen handelte. Nichtsdestotrotz zeigten die Lungenmetastasen einen Verlust der normalen retikulären Struktur, eine Verdickung der Lufthöhle und ein Lungenparenchym.
Währenddessen zeigte die immunhistochemische Färbung des MATC-Tumors mit verschiedenen Antikörpern hochproliferative Tumorzellen, Lymphozyteninfiltration, eine ausgedehnte Infiltration myeloischer Zellen, die mit klinischen Proben übereinstimmte. Während der Dissektion muss die anatomische Lage der Schilddrüse richtig verstanden werden. Die Schilddrüse befindet sich in der Nähe des Schildknorpels und der Luftröhre.
