מחקר זה משתמש בעכברים BALB / c כדי להקים את מודל NEC, אשר יהיה מועיל לחקר מחלות על תאי T. ביום החמישי, שתי הקבוצות לא מראות הבדל משמעותי בגודל הגוף. עם זאת, ביום 10 עכברי NEC היו דקים יותר מעכברי הבקרה באופן משמעותי.
משקלם של העכברים בקבוצת NEC עלה לאט, ושיעור ההישרדות ירד בהדרגה במהלך חמשת ימי הקמת המודל. מודל NEC יכול להיות יתרון לחקר קיטוב תאי T. להדגים את ההליך יהיה יאן טיאן, בוגר תואר ראשון מהמעבדה שלי.
Gavage העכברים עם 20 עד 30 מיקרוליטרים של LPS, ולהאכיל אותם עם 40 עד 50 מיקרוליטרים של נוסחה ביום החמישי. מהיום החמישי ואילך, מניחים אותם במכשיר היפוקסיה ב 5% חמצן במשך 90 שניות, ולחמצן אותם מחדש במשך שלוש דקות. לאחר מכן, מניחים את העכברים בסביבה של ארבע מעלות צלזיוס למשך 15 דקות ומעבירים אותם לאינקובטור.
התבונן מקרוב בכל העכברים, שקל אותם כל יום, תיעד את הישרדות העכברים במהלך תקופת האינדוקציה ותיעד אם השרפרף שלהם מדמם ודביק. החזקת צינור הקיבה ביד ימין, לתקן את ראשו של העכבר עם האצבע המורה על ראשו של העכבר נלחץ בעדינות אחורה ולמטה. הכנס את צינור הקיבה מהפינה השמאלית של הפה והזז אותו לאט שניים עד שלושה סנטימטרים למרכז הפה.
לדחוף 40 עד 50 מיקרוליטרים של נוסחה או 20 עד 30 מיקרוליטרים של LPS לתוך מערכת העיכול. אם לעכבר יש רפלקס הקאות חזק וצינור הקיבה נכנס לקנה הנשימה, שלפו בעדינות ואפשרו לעכבר לנוח לפני שתנסו שוב את gavage. לטבול את רקמת illum העכבר טרי ב 10% פורמלין, להטמיע את הרקמות בפרפין ולחתוך אותם של ארבעה מקטעי מיקרומטר.
כדי deparaffinize את החלקים, לשים אותם קסילן. השרו במשך חמש דקות בהצלחה באתנול מוחלט, 95% אתנול, 80% אתנול, 70% אתנול ומים מזוקקים. לאחר מכן, להכתים את החלקים עם פתרון המטוקסילין במשך חמש דקות, ולהבדיל אותם 1% חומצה הידרוכלורית ו 70% אלכוהול במשך חמש שניות.
לבסוף, להכתים אותם עם פתרון אאוזין במשך דקה אחת, ולבחון את ההיסטופתולוגיה של רקמת המעי בהגדלה פי 40. פוטומיקרוגרפים של ציון פתולוגיה מעיים מאפס לארבע הראו רירית שלמה ונורמלית, הפרדת תת-מולקולה קלה ולמינה פרופריה, הפרדת תת-מולקולה מתונה ולאמינה פרופוריה, הפרדת תת-מולקולה חמורה ולמינה פרופריה, והיעלמות וילי מעיים עם נמק מעיים. הציון של פתולוגיה מעיים היה גבוה באופן משמעותי בקבוצת NEC מאשר בשליטה עם ערך P של פחות מ 0.001.
השרפרף הובקע מאפס עם כדורים מעוצבים היטב לשלושה עם שרפרפים נוזליים. ביום 10, ציוני השרפרף של קבוצות NEC היו גבוהים משמעותית בקבוצת NEC עם ערך P של פחות מ 0.001. ביום החמישי, שתי הקבוצות לא הראו הבדל משמעותי בגודל הגוף.
עם זאת, ביום 10, העכברים בקבוצת NEC היו דקים יותר באופן משמעותי וקטנים יותר מהראש לזנב מאשר העכברים בקבוצת הביקורת. משקלם של העכברים בקבוצת NEC עלה לאט ושיעור ההישרדות ירד בהדרגה במהלך חמשת ימי הקמת המודל. אזור ileocecal החתוך של רקמת המעי מחולי NEC הראה נמק של רקמת הרירית במעיים.
במחקר זה, העכברים בקבוצת NEC פיתחו גם דימום ileocecal ונמק. בעת gavaging העכבר, ודא כי העכבר אינו נאבק כדי למנוע השפעה על החדרת צינור הקיבה. Gavage העכברים עם 20 עד 30 מיקרוליטרים של LPS ולהאכיל אותם עם 40 עד 50 מיקרוליטרים של נוסחה ביום החמישי.
מהיום החמישי ואילך, מניחים אותם במכשיר היפוקסיה ב-5% חמצן למשך 90 שניות ומכניסים אותם מחדש למשך שלוש דקות. מודל זה יכול להיות מועיל עבור מחקר מחלת NEC על תאי T ועשוי לעזור ללמוד תגובות תא Th2 ב- NEC.
