이 연구는 BALB/c 마우스를 사용하여 NEC 모델을 확립하는데, 이는 T 세포에 대한 질병 연구에 도움이 될 것입니다. 5일째에, 두 그룹은 바디 크기에 유의한 차이를 보여주지 않습니다. 그러나, 10일째에 NEC 마우스는 대조군 마우스보다 현저히 얇아졌다.
NEC 군에서 마우스의 무게는 서서히 증가하고, 모델 설립 5일 동안 생존율이 점차 감소했다. NEC 모델은 T 세포 편광을 연구하는 데 유리할 수 있습니다. 절차를 시연하는 것은 내 실험실에서 대학원 생인 얀 티안(Yan Tian)이 될 것입니다.
LPS의 20~30마이크로리터를 가진 마우스를 가리게 하고, 5일째에 40~50마이크로리터의 포뮬러로 공급한다. 5일부터 저산소증 장치에 90초 동안 5%의 산소를 공급하고 3분 동안 다시 산소를 공급합니다. 다음으로, 마우스를 섭씨 4도 환경에 15분 동안 배치하여 인큐베이터로 옮기습니다.
밀접하게 모든 마우스를 관찰, 매일 무게, 유도 기간 동안 마우스의 생존을 기록하고 자신의 대변이 피 묻은 끈적 여부를 기록. 위관을 오른손에 쥐고 마우스의 머리에 검지 손가락으로 마우스의 머리를 부드럽게 앞뒤로 누르십시오. 입의 왼쪽 모서리에서 위관을 삽입하고 천천히 입의 중앙에 2 ~ 3 센티미터를 이동합니다.
40~50마이크로리터의 포뮬러 또는 20~30마이크로리터의 LPS를 소화관에 밀어 넣습니다. 마우스가 강한 구토 반사를 가지고 있고 위관이 기관으로 들어가면 부드럽게 꺼내서 마우스가 다시 gavage를 시도하기 전에 휴식을 취할 수 있습니다. 신선한 마우스 일루 조직을 10% 포르말린에 담그고, 파라핀에 조직을 포함하고 4마이크로미터 섹션으로 자른다.
섹션을 분리하려면 자일렌에 넣습니다. 절대 에탄올, 95%에탄올, 80%에탄올, 70%에탄올, 증류수에 5분간 담그세요. 다음으로, 헤마톡슬린 용액으로 단면을 5분간 염색하고, 5초 동안 1%의 염산과 70%의 알코올로 분화합니다.
마지막으로, 1 분 동안 eosin 용액으로 그들을 얼룩시키고, 40 배율에서 장 조직의 조직 병리학을 검사합니다. 대장 병리학 점수의 사진 현미경 사진은 0에서 4까지의 장 병리 점수가 손상되지 않고 정상적인 점막, 온화한 부막 및 라미나 프로피나 분리, 적당한 부막 및 라미나 프로피나 분리, 심한 부막 및 라미나 프로프리아 분리, 장 내 괴사및 장 간사 비실종을 보였다. 장 병리학 점수는 0.001 미만의 P 값을 가진 대조군보다 NEC 그룹에서 상당히 높았다.
대변은 액체 의자와 함께 3에 잘 형성 된 펠릿제로 0에서 득점되었다. 10일 선관위 그룹의 대변 점수는 0.001 미만의 P값으로 NEC 그룹에서 상당히 높았다. 5일째, 두 그룹은 신체 크기에 큰 차이를 보이지 않았다.
그러나, 10일째에, NEC 군의 마우스는 대조군내 마우스보다 머리에서 꼬리까지 현저히 얇고 작아졌다. NEC 군에서 마우스의 무게는 서서히 증가하고 모델 설립 5일 동안 생존율이 점차 감소했다. NEC 환자로부터 장 조직의 절제 된 일레오세칼 영역은 장 점막 조직의 괴사를 보였다.
이 연구에서, NEC 그룹의 마우스는 또한 일레오세칼 출혈과 괴사를 개발했습니다. 마우스를 구비할 때 마우스가 위관 삽입에 영향을 미치지 않도록 하는 데 어려움을 겪지 않도록 하십시오. LPS의 20~30마이크로리터를 가진 마우스를 Gavage하고 5일째에 40~50마이크로리터의 포뮬러로 공급합니다.
5일부터 저산소증 장치에 90초 동안 5%의 산소를 공급하고 3분 동안 재산소를 공급합니다. 이 모델은 T 세포에 NEC 질병 연구에 도움이 될 수 있으며 NEC에서 Th2 세포 반응을 연구하는 데 도움이 될 수 있습니다.
