ייצור רשת Streptavidin-Affinity להכנת דגימת מיקרוסקופ אלקטרונים Cryo-Electron

לאחרונה חלו התפתחויות טכנולוגיות רבות ב- cryo-EM, כולל התקדמות בחומרת המיקרוסקופ עצמו המשפרת את האיכות הכוללת של התמונות, וגם התפתחויות בתוכנה המשמשת לעיבוד תמונות cryo-EM שיכולות להתחיל להתמודד עם כמויות גדולות של הטרוגניות הקיימות ברבות מהדגימות. הכנת הדגימה נותרה אחד מצווארי הבקבוק הגדולים ביותר ב- cryo-EM. כמות הדגימה עשויה להיות מגבילה וחלבונים נוטים להיספג לממשק אוויר-מים הידרופובי במהלך ויטריפיקציה.

זה יכול להוביל לדנטורציה של דגימה, פירוק של קומפלקסים חלבוניים גדולים יותר וכיווני חלקיקים מועדפים שנמצאים בתמונות cryo-EM. רשתות אלה מנצלות את האינטראקציה בעלת הזיקה הגבוהה בין סטרפטאווידין וביוטין כדי לקשור דגימות ביוטיניליות ולהגן עליהן מפני ממשק אוויר-מים הידרופובי. אנו יכולים לעבוד עם כמויות דגימה נמוכות מאוד, והתרוממות ביוטין אקראית של דגימות מציעה אסטרטגיה להתגבר על בעיות אוריינטציה מועדפות שניתן להבחין בהן בעת שימוש בשכבות תמיכה אחרות.