La miopatia atriale può provocare fibrillazione atriale, che è l'aritmia più comune negli esseri umani. Il modello di pericardite sterile è un modello animale affidabile e di grandi dimensioni che assomiglia alla patogenesi della miopatia atriale. Questo modello fornisce una rapida induzione della miopatia atriale nel giro di poche settimane.
Inoltre, ripetuti studi di elettrofisiologia possono essere facilmente eseguiti in un periodo di follow-up senza la necessità di cateterizzazioni ripetute. A causa della somiglianza nell'anatomia e nella fisiologia rispetto agli esseri umani, il modello minipig qui presentato può essere utilizzato per studiare la fisiopatologia della miopatia atriale e della fibrillazione atriale, ma può anche essere utilizzato nella scoperta di farmaci pre-clinici. Inizia preparando il sistema di conduzione della pressione.
Aggiungere 5.000 unità internazionali di eparina a un sacchetto IV con 500 millilitri di 0,9% salino. Posizionare l'animale in posizione supina, quindi estendere la gamba e localizzare l'arteria femorale utilizzando gli ultrasuoni con la sonda vascolare nell'impostazione carotidea. Disinfettare la zona inguinale con clorexidina.
Perforare l'arteria femorale utilizzando la guida ecografica e inserire una guaina francese 3 utilizzando la tecnica Seldinger. Fissare la guaina con la sutura e collegarla al trasduttore per sciacquare. Monitorare la pressione arteriosa in tempo reale.
Fai un'incisione di cinque centimetri nel solco sul bordo mediale del muscolo sternocleidomastoideo. Quindi sezionare senza mezzi termini fino a raggiungere la vena giugulare interna. Rimuovere il tessuto fibroso intorno alla vena e posizionare una sutura quadrata Prolene 6 per 0 attorno al sito di cateterizzazione desiderato per ottenere il controllo dei vasi.
Cannulare la vena giugulare interna con un CVC a 3 tripli lumen francesi utilizzando la tecnica Seldinger. Quindi stringere la sutura Prolene 6-0 attorno al catetere. Fissare l'impugnatura del catetere al muscolo sternocleidomastoideo.
Tunnel i tre cateteri lumina separatamente e fissare saldamente le estremità alla pelle. Indossare la porta di iniezione senza ago, quindi chiudere il sito di incisione in due strati. Fai un manubrio di incisione mediana dello sterno a tre centimetri sotto il processo xifoide fino a quando lo sterno diventa evidente.
Sezionare senza mezzi termini caudalmente dal processo xifoideo. Metti un dito o una forbice smussata sul lato viscerale dello sterno e rimuovi il tessuto connettivo seguendo il più lontano possibile la superficie sternale viscerale. Usa la sega dello sterno per fendere lo sterno.
Quindi utilizzare lo spandibore per allargare l'accesso alla cavità toracica, evitando di danneggiare la pleura. Aprire il pericardio con attenzione e utilizzare suture di sospensione per tenerlo fuori dal campo chirurgico. Dopo aver testato il meccanismo di estensione e retrazione della vite di fissaggio del piombo, posizionare la punta del piombo su una pinza curva e curvare lo stylet di 60 gradi, se necessario.
Metti un impacco sul ventricolo sinistro e tiralo delicatamente da parte per ottenere una vista dell'atrio sinistro. Dopo la visualizzazione dell'atrio sinistro, posizionare saldamente la punta di piombo sulla sua parete il più vicino possibile alle vene polmonari e il più lontano possibile dal ventricolo. Avvitarlo estendendo l'elica nel tessuto atriale, preferibilmente con una leggera inclinazione.
Lavorare rapidamente e rilasciare immediatamente la pressione sul ventricolo sinistro. Misurare la soglia di rilevamento e stimolazione e l'impedenza del piombo utilizzando uno stimolatore elettrico programmabile o un programma di pacemaker. Assicurarsi che non vi sia una sovra-cattura ventricolare durante la stimolazione ad alte tensioni.
Posizionare un guinzaglio pacemaker sull'atrio destro completamente analogo al posizionamento del cavo atriale sinistro. Assicurarsi che entrambi i cavi lascino il torace sulla linea mediana. Il piombo atriale sinistro deve essere scavato attraverso il grasso sottocutaneo addominale dal processo xifoide al fianco sinistro e il piombo atriale destro al fianco destro.
Crea una tasca per pacemaker nel grasso sottocutaneo sul fianco sinistro e destro del maiale. Collegare un pacemaker in grado di eseguire un ritmo a raffica da 50 Hertz con il cavo atriale sinistro e un pacemaker di un altro produttore con il piombo degli atri destro, quindi posizionarli all'interno delle tasche. Esporre nuovamente gli atri tirando delicatamente da parte i ventricoli, quindi coprire i ventricoli con una garza.
Spruzzare il talco sterile sulla superficie epicardica di entrambi gli atri usando il dispenser. Lasciare uno strato di garza sterile sulla superficie epicardica degli atri. Controllare la posizione dei lead del pacemaker un'ultima volta prima di iniziare la chiusura.
Chiudere il pericardio usando monocryl 3-0 e lo sterno usando il filo di acciaio inossidabile, quindi chiudere sottocutaneo e la pelle usando rispettivamente Vicryl zero e monocryl 3-0. Dopo che la ferita sternale è guarita, pesare di nuovo il maiale per il follow-up, quindi posizionare l'animale in una fionda di contenimento e portarlo in sala operatoria. Collegare il monitoraggio ECG e saturazione e posizionare le teste del programmatore sopra i pacemaker corrispondenti.
Interroga il pacemaker. Controllare le impostazioni del pacemaker per il verificarsi di AF spontanea. Un avvertimento ventricolare è normale quando si utilizza un pacemaker a doppia camera. Determinare l'impedenza e le soglie di rilevamento e stimolazione.
Determinare il periodo refrattario effettivo atriale approssimato dalla lunghezza del ciclo più breve alla quale viene mantenuta una cattura del rapporto uno a uno durante la stimolazione di scoppio. Determinare il tempo di conduzione tra i cavi atriali sinistro e destro misurando il tempo tra l'inizio del picco di stimolazione e la depolarizzazione atriale sul piombo atriale destro. Eseguire tre protocolli come descritto nel manoscritto di testo.
Notando la durata della FA e l'inducibilità della FIB per ciascun protocollo, quindi consentire all'animale di risvegliarsi o continuare con altre procedure. Un graduale aumento della soglia di tensione e dell'impedenza del piombo atriale sinistro sono stati osservati nel tempo, indicando un aumento della fibrosi. I protocolli di stimolazione dannosa e di stimolazione a raffica a 50 Hertz hanno avuto più successo del protocollo di stimolazione AERP più 30 millisecondi.
L'inducibilità della fibrillazione atriale ha iniziato ad aumentare due settimane dopo l'intervento chirurgico fino a circa il 25% Il protocollo AERP più 30 millisecondi è stato il meno efficace, mostrando circa il 10% di inducibilità AF. Il ritmo dannoso e il ritmo a raffica a 50 Hertz hanno aumentato l'inducibilità della FA a circa il 40% Questo elettrogramma atriale del pacemaker atriale sinistro mostra l'induzione di un episodio di AF dopo cinque secondi di stimolazione a raffica di 50 Hertz. Mentre in questo, non c'è induzione AF.
La colorazione tricroma di Masson del tessuto atriale sinistro ha mostrato livelli più elevati di fibrosi interstiziale o paravascolare negli animali sterili pericardite rispetto ai sham. La quantificazione in cieco della percentuale di area del tessuto fibrotico blu rispetto all'area miocardica totale ha mostrato che la pericardite sterile induce più fibrosi paravascolare e interstiziale nel tessuto atriale rispetto alla chirurgia fittizia. La cosa più importante è ottenere un buon posizionamento dei cavi pacemaker con soglia di tensione adeguata e senza cattura ventricolare.
È molto difficile correggere i problemi con i cavi del pacemaker dopo l'intervento chirurgico iniziale perché l'estesa fibrosi osservata in questo modello vieta la sostituzione dei cavi. Questo protocollo si concentra sugli studi chirurgici ed elettrofisiologici, ma il modello può essere utilizzato anche per l'istologia e l'imaging cardiaco, tra cui TC e risonanza magnetica. Inoltre, rispetto ai roditori, la maggiore quantità di tessuto atriale consente studi trascrittomici e proteomici dettagliati.
