Cees Verlaan, Joyce Visser, Merel Schurink, e Grace Croft sono gentilmente riconosciuti per la loro eccellente assistenza tecnica con gli esperimenti sugli animali.

Tutti gli esperimenti in vivo sono stati condotti in conformità con la guida per la cura e l&#39;uso di animali da laboratorio preparati dall&#39;Istituto di Laboratorio risorse animali. Gli esperimenti sono stati approvati dal Comitato locale sperimentazione animale. 1. Farmaci, Anestesia, accesso venoso, e intubazione <ol><li> Farmaci e Anestesia <ol><li> Premedicazione <ol><li> Inizia amiodarone 150 mg / kg 10 giorni prima di un intervento chirurgico per prevenire le aritmie. Continua amiodarone in una dose di 100 mg / kg dal giorno della procedura fino al giorno 28. Ridurre il dosaggio a 50 mg / kg il giorno 29 e continuare fino alla fine dello studio. </li><li> Inizia terapia anti-piastrinica, 1 mg / kg clopidogrel dal giorno 3 prima dell&#39;intervento e 4,5 mg / kg di acido acetilsalicilico 1 giorno prima dell&#39;intervento. Continua clopidogrel 1 mg / kg al giorno e acido acetilsalicilico 80 mg / giorno. </li><li> Inizia farmaci antidolorifici 1 giorno prima dell&#39;intervento da patch Fentanyl, 25mcg / h per i suini ~ 70 kg. Continuare l&#39;uso di cerotti di fentanyl per 24 ore dopo l&#39;intervento per assicurare un adeguato farmaci antidolorifici. Inoltre, il monitor giornalmente eventuali segni di disagio putativo (cioè il comportamento, la respirazione, l&#39;andatura, la mobilità, ecc) per aumentare antidolorifici. </li><li> Digiunare l&#39;animale per 12 ore, mantenere l&#39;accesso illimitato all&#39;acqua. </li></ol></li><li> Anestesia <ol><li> Per prevenire lo stress e disagio inutile, sedare il maiale nel suo stabile mediante iniezione intramuscolare di una miscela di midazolam 0,4 mg / kg, ketamina 10 mg / kg, e atropina 0.014 mg / kg. </li><li> Ottenere l&#39;accesso venoso dal cannulating la vena orecchio con un iv cannula 18 G. Indurre anestesia mediante somministrazione endovenosa di 5 mg / kg sodiumthiopental, e dare 1.000 / 100 mg di amoxicillina / acido clavulanico per prevenire le infezioni. Il maiale riceverà 1000/100 mg amoxicillina / acido clavulanico il giorno dopo l&#39;intervento chirurgico come trattamento antibiotico. </li><li> Intubare il maiale utilizzando un endotrachtubo EAL (formato 8.5 di suini del peso di circa 70 kg). Se necessario eseguire pallone di ventilazione con una frequenza di 12/min e trasportare il maiale alla sala operatoria. </li><li> All&#39;arrivo sul teatro dell&#39;operazione, iniziare immediatamente la ventilazione a pressione meccanica positiva con FiO 2 0,50, 10 ml / kg di volume corrente, e una frequenza di 12/min sotto continua capnography. </li><li> Inizia anestesia bilanciata dalla continua infusione endovenosa di una combinazione di midazolam 0,5 mg / kg / ora, sufentanil 2,5 microg / kg / ora e pancuronio bromuro di 0,1 mg / kg / ora. Durante l&#39;intera operazione, il monitoraggio continuo ECG, pressione sanguigna arteriosa, temperatura e capnografia per misurare la profondità dell&#39;anestesia. Ad esempio, se una tachicardia sinusale è presente, verificare se farmaci antidolorifici e / o anestesia sono adeguate. </li><li> Infondere 4,3 mg / kg di amiodarone in 500 ml venofundin 6% per via endovenosa. </li><li> Controllo del ritmo cardiaco da un 5 conduce ECG. </li><li> Shave e pulire il collo e posteriore limzona b. </li><li> Inserire un catetere di Foley. </li></ol></li></ol></li></ol> 2. Ecocardiografia transtoracica <ol><li> Posto l&#39;animale in posizione laterale di destra. Nei suini Landrace come maiali Dalland, solo vista parasternale asse (lungo e corto) possono essere ottenuti. A causa della forma del torace, acquisizione vista apicale non è fattibile. </li><li> Orient ed ottenere parasternale vista lunga asse in 2D (B-mode). Determinare le dimensioni LV a fine diastole e sistole end in M-mode. </li><li> Ruotare la sonda eco di 90 ° in senso orario pur mantenendo la sua posizione parasternale di acquisire il punto di vista LV asse corto a livello della valvola mitrale, muscolo papillare e apice. L&#39;asse corto del muscolo papillare e apice può richiedere il posizionamento della sonda eco uno o due spazi intercostali inferiori rispetto alla posizione per il breve vista all&#39;asse della valvola mitrale. </li></ol> 3. Preparazione e vascolare chirurgica di accesso <ol><li> Disinfect aree chirurgiche con iodio 2% e utilizzare teli chirurgici sterili per coprire le parti non sterili del maiale. </li><li> Eseguire un&#39;incisione mediale del collo. Passare la linea alba per minimizzare i danni muscolari e senza mezzi termini avvicinarsi alla carotide e della vena giugulare interna accanto alla trachea. </li><li> Isolare con cura la carotide e la vena giugulare interna. Assicurarsi che il nervo vago è intatto. Posizionare suture Vicryl 2-0 intorno ad entrambi i vasi per ottenere il controllo dell&#39;imbarcazione. Realizzare un accesso arterioso dal cannulating carotide interna con una guaina 8F con la tecnica Seldinger. Fissare la guaina per l&#39;arteria, assicurarsi che l&#39;arteria non è completamente occlusa dalla sutura. Accesso venoso può essere acquisita da cannulating la vena giugulare con una guaina 9F anche con la tecnica Seldinger. Prima di fissare la guaina assicurarsi che la vena è legatura. In alternativa, l&#39;arteria femorale può essere utilizzato anche per l&#39;accesso arterioso. </li><li> Somministrare 100 IE / kg di eparina immediatamente dopo l&#39;inserimento della guainahs per inibire la formazione di trombi. </li><li> Per una misura stabile e costante pressione arteriosa, incannulare una delle arterie più piccoli in uno degli arti posteriori facendo una piccola incisione sopra l&#39;arteria. L&#39;arteria si trova appena sotto la pelle, pulsazioni può essere sentito attraverso la pelle. Isolare l&#39;arteria dal tessuto circostante. Mettere 2 punti di sutura Vicryl 2-0 intorno alla nave, 1 prossimale e distale 1. Legare la parte distale ed inserire un iv cannula 18 G e fissare saldamente collegare la pressione. </li></ol> 4. Pressione invasiva Volume Loop Analysis <ol><li> Inserire un catetere Swann-Ganz (SG) attraverso la guaina precedentemente posizionato nella vena giugulare interna. </li><li> Collegare un dispositivo gittata cardiaca alla parte del SG che culmina nel lume prossimale. </li><li> Iniettare 5 ml di soluzione fisiologica 0,9% nel lume prossimali del SG e misurare la gittata cardiaca; ripetere tre volte e la media degli indici. </li><li> Calibrare il sistema fotovoltaico utilizzando precedentementedeterminato gittata cardiaca. </li><li> Inserire il catetere conduttanza 7F attraverso l&#39;arteria carotide nel ventricolo sinistro sotto guida fluoroscopica. </li><li> Selezionare il segmento più grande presente nel LV per misure di volume ed eseguire la scansione di una linea di base in apnea. </li><li> Dopo la calibratura del volume è completato, record di 10-15 battiti in apnea. </li><li> Rimuovere la SG e posizionare un catetere a palloncino nella vena cava inferiore al livello del diaframma sotto guida fluoroscopica. </li><li> Eseguire la riduzione precarico gonfiando il palloncino in apnea e registrare i corrispondenti PV-Loops. </li></ol> 5. Pressione intracoronarica e misurazione del flusso <ol><li> Diluire nitroglicerina in una concentrazione di 100 pg / ml e diluire adenosina in una concentrazione di 30 ug / ml. </li><li> Posizionare un catetere guida 8F in dell&#39;ostio della coronaria sinistra. </li><li> Posizionare il filo di pressione / flusso combinato nella parte prossimale della coronaria sinistra artery. </li><li> Somministrare 200 mg di nitroglicerina intracoronarica e normalizzare la pressione distale (Pd), misurata dal filo, con la pressione arteriosa. </li><li> Posizionare il filo nella metà parte del discendente anteriore sinistra dell&#39;arteria (LAD). </li><li> Avviare la misurazione della pressione e del flusso di base. Indurre iperemia con la somministrazione di 60 mg di adenosina intracoronarica, a filo con 2 ml di soluzione fisiologica e misurare la pressione e il flusso iperemica. Attendere che il flusso di ripristinare ai valori basali. Ripetere la misura due volte. </li><li> Infondere altri 200 mg di nitroglicerina intracoronarica e ripetere i passaggi 1,6 e 1,7 per la sinistra dell&#39;arteria coronaria circonflessa. </li></ol> 6. Induzione di MI <ol><li> Posizionare il catetere intracardiaca defibrillazione nel ventricolo destro utilizzando la guaina venoso. Gli elettrodi distali dovrebbe essere nel all&#39;apice del ventricolo, gli elettrodi prossimali nell&#39;atrio e / o vena cava superiore. Collegare il catetere al defibrillatore e impostarlo su 50J. </li><li> Misurare il diametro del distale LAD dalla seconda diagonale (D2) in AP e LAO 30 °. </li><li> Scegliere un palloncino angioplastica con un diametro secondo il diametro del distale LAD dal D2 (Figura 1). </li><li> Posizionare un filo di guida attraverso il catetere guida distalmente nel LAD. </li><li> Far avanzare il catetere a palloncino lungo il filo guida. Posizionare il palloncino distale dalla D2. </li><li> Somministrare 30 IE / kg di eparina. </li><li> Gonfiare il palloncino fino a che la pressione corrisponda al diametro destra del LAD. </li><li> Controllare l&#39;occlusione totale della LAD da angiografia (Figura 1). </li><li> Coprire il campo di lavoro sterile e la ferita al collo con panni teli sterili. Liberare il torace da qualsiasi copertura per renderlo disponibile per le compressioni toraciche o transtoracica defibrillazione. </li><li> Controllare la pressione nel palloncino durante il successivo 90 min e ripristinare la pressione se necessario. </li><li> In caso di fibrillazione ventricolare:<ol><li> Avviare immediatamente le compressioni toraciche con una frequenza di 100/min. </li><li> Somministrare 300 mg di amiodarone per via endovenosa in bolo veloce (~ 1 min). </li><li> Inizia defibrillazione intracardiaca, dare scosse di 50 J. </li><li> Dopo 5 colpi falliti, riavviare le compressioni toraciche. Cambiare defibrillazione intracardiaca di defibrillazione transtoracica e shock con 150 J. In caso di shock soccombente, cambiare a 200 J. </li><li> Se necessario, somministrare un&#39;altra dose di 150 mg Amiodaron e / o 1 mg di adrenalina. Ripetere adrenalina due volte con intervalli di 3-5 minuti, se necessario. </li><li> Continua compressioni toraciche, intervallati da defibrillazione transtoracica </li></ol></li></ol> Completamento della procedura chirurgica (per Long Term Follow Up) <ol><li> Dopo 90 min di arrivo mediante angiografia se la LAD è ancora completamente occluso. </li><li> Amministrare un altro 30 IE / kg di eparina e sgonfiare il palloncino. Verificare la presenza di riperfusione. Rimuovere il palloncino sgonfio con la guidzione catetere dalla guaina carotidea. </li><li> Rimuovere con cautela la guaina arteriosa e bloccare l&#39;arteria carotide immediatamente con un morsetto anastomosi (Figura 1). Usa prosegue punti (6-0 prolene) per chiudere la carotide. Rimuovere la fascetta e verificare la presenza di perdite. </li><li> Rimuovere il catetere defibrillazione interna e rimuovere la guaina dalla vena giugulare interna. Prossimale legare della voce guaina. </li><li> Chiudere il sottocute e la pelle del collo in due strati con 2-0 Vicryl. </li></ol> 7. Cardiac Magnetic Resonance Imaging <ol><li> Posto l&#39;animale sulla testa tabella MRI prima in posizione supina sotto anestesia continua. </li><li> Posizionare un-phased array coil cardiaco dedicata sul petto dell&#39;animale. </li><li> Per la pianificazione di immagini ottenere immagini da ricognizione in asse corto e una vista a due camere assi lungo. </li><li> Acquisire ECG-gated stato stazionario precessione libera (SSFP) cine asse corto (dal vertice alla base della LV) e due chamber visualizzazioni lungo assi. </li><li> Gadolinio tardi (LGE) può essere acquisito con un recupero di inversione 3D-turbo-gradient-echo-tecnica di 15 minuti dopo la doppia dose iniezione endovenosa in bolo di un agente di contrasto gadolinio based. </li><li> Eseguire l&#39;analisi offline con il software validato dei parametri funzionali. Valutare ventricolare sinistra frazione di eiezione (FEVS), massa ventricolare sinistra, fine del volume diastolico, il volume sistolico fine, gittata sistolica, gittata cardiaca, e la massa cicatrice. </li></ol> 8. Fine dello studio e Infarto Formato <ol><li> Alla fine dello studio, seguire protocolli 1-5 e 7 per acquisire follow-up misurazioni. </li><li> Fai una mediana 30-40 cm incisione da appena sotto soprasternale ad un punto appena sotto il processo xifoideo. Avanzare attraverso la linea alba fino allo sterno. Dividere il xifoidea e usare le forbici Klinkenberg per separare lo sterno posteriore dal pericardio con cautela. Dopo aver usato le forbici senza mezzi termini continuare ulteriore separazione. Eseguire una sternotomia by ad esempio utilizzando un martello e Lebsch coltello. Il midollo osseo sanguinamento è ridotto al minimo sfregamento cera osso sul midollo. Aprire il torace con un divaricatore sterno. </li><li> Entrare nello spazio pleurico 3 ° e individuare la vena cava inferiore nel mediastino. </li><li> Umanamente eutanasia l&#39;animale tagliando la vena cava inferiore sotto anestesia profonda. Rimuovere sangue con un dispositivo di aspirazione. Inserire una batteria 9 V sull&#39;apice per indurre fibrillazione ventricolare. </li><li> Dopo l&#39;asportazione del cuore, intercettato destro e ventricolo sinistro in cinque fette dalla base all&#39;apice e incubate in 1% di cloruro di trifenil-tetrazolio disciolto in soluzione fisiologica 0,9% a 37 ° C per 15 min. Successivamente, lavare le fette in soluzione fisiologica 0,9% e fotografare le fette da entrambi i lati. </li></ol>

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Questo lavoro è stato supportato dal HGG Group BV (SK), il &quot;Wijnand M. Pon Stichting&quot; (SC, SK). Questa ricerca fa parte del progetto P1.04 SmartCare dei materiali biomedici istituto, co-finanziato dal Ministero olandese degli Affari economici, dell&#39;agricoltura e dell&#39;innovazione (SJL, JG). Tutti gli autori hanno riferito che non hanno alcuna relazione da dichiarare.

Intracoronarica palloncino occlusione della LAD fornisce un modello preclinico MI riproducibile e coerente nei suini che può essere utilizzata per studiare la sicurezza e l&#39;efficacia di nuove terapie cardiovascolari che imita da vicino la situazione umana. Come mostrato in Figura 5, la ischemia / riperfusione del miocardio modello presentato fornisce la piattaforma che può essere ulteriormente adattata per indagare diverse fasi di MI e post-MI rimodellamento mentre il danno da ischemia / riperfusione iniziale è identica per entrambi. Il successo del protocollo descritto qui delineato dipende dalla ischemia miocardica come la fase più critica del protocollo. Corretto posizionamento del palloncino distale al secondo ramo diagonale della LAD è cruciale per raggiungere adeguate dimensioni dell&#39;infarto assicurando nel contempo un elevato tasso di sopravvivenza. Sulla base di questo modello MI, un tasso di mortalità ~ 15% è stato osservato, mentre la vasta segmenti medio e apicale del anteriore, settale e inferio pareti erano infartuati, come visto su CMR e colorazione TTC (Figure 2A e 2B). La durata di ischemia può essere adattato in base alle dimensioni dell&#39;infarto desideri. Anche se abbiamo utilizzato i maiali Landrace in questo protocollo, maialino (cioè maialino Göttingen) di solito richiedono durate più lunghe di ischemia miocardica (es. 150 min occlusione). Analisi di outcome in studi MI preclinici e clinici è spesso basata su LVEF. Anche se inferiore LVEF è stata saldamente associato a un aumento del rischio di mortalità cardiovascolare, rimane dipendente da parametri hemodynamical come precarico 9. Probabilmente, dato che in media è infartuato solo il 10-15% del ventricolo sinistro, diverse limitazioni concettuali e pratici sono legati a LVEF essere una misura globale della funzione sistolica VS piuttosto che riflettere un miglioramento locale 10. Pertanto, le misure proposte di outcome utilizzato in questo modello fanno luce su diversi aspetti della<html> MI e post-MI rimodellamento fornendo in tal modo i ricercatori i mezzi per valutare con precisione l&#39;efficacia di nuove terapie su più livelli. Per ottimizzare traduzione da modelli preclinici alla pratica clinica, abbiamo scelto utilizzando grandi maiali invece di maialino. Misure emodinamiche, dosaggi di farmaci e dispositivi chirurgici possono essere facilmente scambiati con la pratica clinica. Rispetto al maialino, grandi maiali guadagnano relativamente molto peso. Ciò può causare un problema di lungo periodo di follow-up, per quanto riguarda la comparabilità dei risultati seriali. Femmina suini Dalland Landrace pesano circa 70 kg all&#39;età di 6 mesi. Per evitare abbondante aumento di peso durante il periodo di follow-up, gli animali sono tenuti in una dieta ristretta. Suini ricevono 750 g di misura cibi a basso contenuto calorico (contiene: proteine ​​15,6%, grassi 2,0%, fibre 14,8%, ceneri 8,8%, calcio 0,9%, fosforo 0,57%, 0,29% di magnesio e potassio 0,18%) due volte al giorno e guadagnare circa 10 kg di peso in 4 settimane. e_content &quot;&gt; McCall e colleghi hanno già pubblicato un protocollo simile per infarto miocardico nei suini 11. esiste una notevole sovrapposizione tra questo protocollo e la loro, sottolineando la preferenza per il LAD, piuttosto che l&#39;arteria circonflessa sinistra (LCX) o l&#39;arteria coronaria destra (RCA ). Nella nostra esperienza, vi è una misura minore di dimensioni dell&#39;infarto del ventricolo sinistro totale secondo il LCX mentre il miocardio RCA è accompagnata con maggiore probabilità di disturbi di conduzione indesiderati (quali disfunzione del nodo del seno, disfunzione AV-nodo). Una differenza tra i due protocolli riguarda l&#39;uso di una maggiore inibizione piastrinica farmacologica in questo protocollo, come abbiamo osservato più alti tassi di no-reflow basato sulla formazione di trombo come il risultato di 90 min dell&#39;emostasi nell&#39;arteria coronaria occlusa. Questa osservazione è in linea con ipercoagulabilità nota osservato nei suini 12. Sebbene McCall ha proposto di utilizzare un unico, ad alte dosi, bolo di eparina, this protocollo si basa sull&#39;utilizzo di eparina in dosi multiple basse sparse chirurgia per minimizzare complicazioni trombotiche. In sintesi, presentiamo un modello suino MI che consente ai ricercatori di fare uso di un pratico grandi modello animale efficace, riproducibile e soprattutto di malattie dell&#39;uomo studiare nuove terapie come un passo essenziale verso first-in-man sperimentazione clinica.

A correction was made to <a href="/video/51269">Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs</a>. An author's middle initial was omitted at publication.
The author's name was updated from:
Sanne Jansen of Lorkeers
to:
Sanne J. Jansen of Lorkeers

A correction was made to <a href="/video/51269">Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs</a>.
The middle initial J. has been added to author Sanne Jansen of Lorkeers.

Erratum: Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Infarto miocardico acuto (AMI) e la sua sequele a lungo termine, come l&#39;insufficienza cardiaca cronica (CHF) influenzano profondamente la prognosi del paziente e la qualità della vita, per non parlare dei vincoli di costo elevato imposti sulle nostre risorse sanitarie disponibili 1. La prevalenza di CHF nel mondo occidentale è stimato al 1-2%, di cui ~ 60% dei casi sono la conseguenza di AMI come causa primaria 2. Nei soli Stati Uniti, circa 5,7 milioni di pazienti affetti da CHF pari a circa $ 30 miliardi di costi sanitari annui nel 2008, con un triplice copia prevista in aumento dei costi di 97 miliardi dollari l&#39;anno nel 2030 1. Presi insieme, questi numeri fanno un argomento forte per l&#39; sviluppo di nuovi trattamenti cardioregenerative che, per la traduzione rapida, si basano su un animale grande infarto miocardico modello riproducibile e affidabile che simula con precisione lo scenario umano. Suini (Sus scrofa) sono sempre più utilizzati in cardiovala ricerca lar per farmacologica e tossicologica test 3. Uno dei tratti responsabili di questo successo come strumento di ricerca traslazionale è la loro somiglianza in funzione cardiaca e anatomia con il 4,5 cuore umano. Ad esempio, maiale cuore a corpo rapporto peso, le dimensioni cardiache e distribuzione arteria anatomia coronarica hanno tutti dimostrato di essere molto simile all&#39;uomo 4. Inoltre, il metabolismo dei cardiomiociti, le proprietà elettrofisiologiche e risposta ad un insulto ischemico come AMI sono stati segnalati a mostrare alti livelli di intesa con il 6,7 situazione umana. In definitiva, a soddisfare i criteri sopra descritti, un MI-protocollo standardizzato che produce solido e sostenibile MI per la sperimentazione di nuovi farmaci in fase di sperimentazione (IND) è necessario. Qui, presentiamo un tale modello standardizzato che utilizza un 90 min-torace chiuso palloncino occlusione coronarica discendente anteriore sinistra (LAD) seguita da riperfusione, creando così miocardica riproducibilefarction copre il anteroapical, settale e pareti inferoseptal del ventricolo sinistro.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="726">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">0.9% Saline</td>
			<td style="width:224px;">Braun</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">6-0 Prolene</td>
			<td style="width:224px;">Ethicon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Acetylsalicylic acid</td>
			<td style="width:224px;">80 mg (Ratiopharm)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Adenosine</td>
			<td style="width:224px;">3mg/ml apotheek UMCU</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">AdVantage PV loop system</td>
			<td style="width:224px;">Transonic Scisence</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="43" rowspan="2" style="height:43px;width:216px;">Amiodarone</td>
			<td style="width:224px;">Cordarone I.V. (Sanofi)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:224px;">Amiodaron HCl (PCH)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Amoxicilline/ clavulaanzuur</td>
			<td style="width:224px;">500/50mg (Sandoz)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Atropinesulfaat</td>
			<td style="width:224px;">0,5 mg/ml (PCH)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Bone Marrow Wax</td>
			<td style="width:224px;">Syneture</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Cardiac Defibrillator</td>
			<td style="width:224px;">Philips</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Clopidogrel</td>
			<td style="width:224px;">Clopidrogel 75A (Apothecon B.V.)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Contrast agent</td>
			<td style="width:224px;">Telebrix</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Endotracheal tube</td>
			<td style="width:224px;">Covidien</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Fentanyl patch</td>
			<td style="width:224px;">Durogesic&#174; 25 mcg/h (Janssen-Cilag)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Fogarty catheter</td>
			<td style="width:224px;">Edwards Lifesciences</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Gadolinium</td>
			<td style="width:224px;">Gadovist</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Guidewire</td>
			<td style="width:224px;">Abbott</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Heparin</td>
			<td style="width:224px;">Leo</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">I.V. cannula</td>
			<td style="width:224px;">Abbocath&#174; (Hospira venisystems)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Iodine</td>
			<td style="width:224px;">Jodiumtictuur 2% (Eurovet)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Ketamine</td>
			<td style="width:224px;">Narketan&#174; 10 V&#233;toquinol</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Midazolam</td>
			<td style="width:224px;">5mg/ml (Actavis)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Nitroglycerin</td>
			<td style="width:224px;">1mg/ml Pohl Boskamp</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Pancuronium bromide</td>
			<td style="width:224px;">2mg/ml</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Seldinger vascular sheath 8F</td>
			<td style="width:224px;">Arrow</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Sufentanil&#160;</td>
			<td style="width:224px;">50 mcg/ml (Sufentanil-hameln)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Swann-Ganz catheter</td>
			<td style="width:224px;">Criticath ref 680078 (Argon)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Synolux</td>
			<td style="width:224px;">250 mg (Pfizer)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Tetra-polar catheter</td>
			<td style="width:224px;">Transonic Scisence</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Thiopental</td>
			<td style="width:224px;">0,5 g (Inresa)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Triphenyl-tetrazolium chloride</td>
			<td style="width:224px;">Merck</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Venofundin</td>
			<td style="width:224px;">Braun</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Vicryl 2-0</td>
			<td style="width:224px;">Ethicon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">Volcano ComboMap system</td>
			<td style="width:224px;">Volcano</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

myocardial infarction and functional outcome assessment in pigs

Introduzione di terapie cardiovascolari recentemente scoperti negli studi first-in-man dipende da un percorso etico e giuridico strettamente regolamentato. Una premessa importante è una buona comprensione di tutti gli aspetti di sicurezza ed efficacia ottenuti in un grande modello animale che rispecchiano validamente lo scenario umano di infarto del miocardio (MI). I maiali sono ampiamente utilizzati in questo proposito, poiché le loro dimensioni cardiaca, emodinamica, e anatomia coronarica sono vicine a quella degli esseri umani. Qui, presentiamo un protocollo efficace per l&#39;utilizzo del modello MI porcino utilizzando un chiuso-torace palloncino coronarico occlusione della discendente anteriore sinistra (LAD), seguita da riperfusione. Questo approccio si basa su 90 minuti di ischemia miocardica, inducendo grande ventricolo sinistro del miocardio anteriore, settale e pareti inferoseptal. Inoltre, vi presentiamo i protocolli per le varie misure di esito che offrono una vasta gamma di informazioni sul cuore, come sistolica cardiaca e funzione diastolica, hemodynamics, velocità di flusso coronarico, resistenza microvascolare, e la dimensione dell&#39;infarto. Questo protocollo può essere facilmente personalizzato per soddisfare studiare requisiti specifici per la validazione di nuovi farmaci biologici cardioregenerative in fasi diverse (cioè subito dopo l&#39;insulto ischemico acuto, nel contesto subacuta o anche in MI cronica una volta la formazione di cicatrici è stata completata). Questo modello fornisce quindi un utile strumento traslazionale per studiare MI, conseguente rimodellamento negativo, e il potenziale di agenti cardioregenerative nuovi.

Mortalità e Infarto Formato Nel nostro centro, di 32 suini (Donna Dalland Landrace, 6 mesi di età, ~ 70 kg) che sono stati sottoposti a questo protocollo MI, cinque (15,6%) sono morti a causa di refrattarietà fibrillazione ventricolare durante l&#39;ischemia. Questo protocollo crea un infarto copre circa il 10-15% del ventricolo sinistro, si trova nella (Figura 2A) anterosettale, settale e pareti inferoseptal. Se la valutazione non invasiva della seriale dimensioni dell&#39;infarto è garantito, gadolinio tardi (LGE) su CMR può essere utilizzata per seguire la zona infartuata non vitali nel tempo (Figura 2B). Funzione cardiaca e rimodellamento Quattro settimane dopo infarto miocardico, parametri globali e regionali che riflettono sulla funzione cardiaca devono essere diminuiti rispetto ai valori basali sani. In particolare, frazione di eiezione VS (FEVS) dovrebbe diminuire di circa il% ~ 35-45 quattro settimane post-MI. Oltre alla funzione sistolica globale,diversi parametri che riflettono post-MI rimodellamento avverso possono essere misurati, come LV morfologia e diametri utilizzando CMR ed ecocardiografia (Figure 3A e 3B). Quattro settimane dopo infarto miocardico, un aumento del volume di fine diastole (EDV) come segno di rimodellamento avverso può attendere (Figure 3A e 3B). Parametri di flusso e pressione coronarico L&#39;angiogenesi e la formazione di nuovi capillari sono spesso considerati come obiettivi terapeutici importanti cardiopatia ischemica 8. Valutazione della resistenza microvascolare può basarsi indirettamente sulla misurazione combinata di pressione intracoronarica e velocità del flusso. Pressione Rappresentante e misura della velocità del flusso in condizioni e iperemia massimale normale è mostrato in Figura 4. Quattro settimane dopo infarto miocardico, la resistenza microvascolare iperemica dovrebbe essere aumentata nel coronarica infarto correlate (LAD) rispettoalla situazione di partenza 8. <img alt="Figura 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51269/51269fig1highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51269/51269fig1.jpg" /> . Figura 1 modello MI basa su LAD palloncino di occlusione (A) apparecchi chirurgici standard con:. 1) fascette asciugamano; 2) zanzare; 3) dissezione forcipe; 4) Contenitore rotondo; 5) i titolari aghi (fine e ruvida); 6) Klinkenberg forbice; 7) dissezione forbici (dritto e curvo); 9) pinza (De-Bakey, fine e ruvida); 10) fascetta; 11) morsetto anastomosi; 12) garze; 13) matita elettrobisturi; 14) titolare del bisturi; 15) Dreesman (aspirazione); 16) divaricatore; 17) portalampade. (B) anteriore sinistra obliqua vista fluoroscopica della LAD e LCX. (C) Dopo la visualizzazione del secondo ramo diagonale, posizionare le due marker radiopachi (vedi riquadro, frecce nere) del pallone appena distale del D2. InflatE e garantire che il flusso sanguigno coronarico è bloccato da iniezione di contrasto (vedi asterisco). Intracardiaca piombo defibrillatore può essere visto nel ventricolo destro (vedi freccia bianca). LAD indica discendente anteriore sinistra dell&#39;arteria; LCX denota sinistra dell&#39;arteria circonflessa; LAO denota anteriore sinistra obliqua; AP denota anteriore vista posteriore; D1 denota primo ramo diagonale; D2 indica secondo ramo diagonale. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51269/51269fig1highres.jpg" target="_blank">Clicca qui per vedere l&#39;immagine ingrandita.</a> <img alt="Figura 2" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51269/51269fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51269/51269fig2.jpg" /> Figura 2. Dimensione infartuale dopo infarto miocardico. (A) 90 min palloncino occlusione del LAD porta a ingenti danni del miocardio e la formazione di cicatrici (colore bianco), visualizzati da TTC colorazione ad 1 mese di follow-up.(B) distribuzione infarto schematica che mostra l&#39;infarto si trova nella anteriore, segmenti anterosettale e inferoseptal del cuore. (C, D) asse corto e lungo ritardo gadolinio immagini CMR migliorate mostrano la vasta cicatrice infartuale (bianco segnale, vedi frecce nere) localizzata in anteriore, segmenti anterosettale e inferoseptal del cuore. LGE-CMR denota la fine di gadolinio maggiore risonanza magnetica cardiaca. Barra della scala denota 3 cm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51269/51269fig2highres.jpg" target="_blank">Clicca qui per vedere l&#39;immagine ingrandita.</a> <img alt="Figura 3" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51269/51269fig3highres.jpg" width="400" /> Figura 3. Valutazione della funzione cardiaca nei modelli ischemici MI. (A) Rappresentante CMR immagini cine-loop a fine diastole e sistole fine mostrano compromissione funzionale del infsegmenti arct cicatrice. (B) immagine M-Mode di 2D parasternale asse lungo da ecocardiografia, mostrando LV dilatazione (aumento del LVIDd) 1 mese dopo infarto miocardico, così come compromissione funzionale (assenza di ispessimento settale). EDV denota il volume telediastolico; ESV denota il volume sistolico finale; LVIDd denota diametro interno del ventricolo sinistro in diastole e LVIDs denota sinistra diametro interno del ventricolo in sistole. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51269/51269fig3highres.jpg" target="_blank">Clicca qui per vedere l&#39;immagine ingrandita.</a> <img alt="Figura 4" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51269/51269fig4highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51269/51269fig4.jpg" /> Figura 4. Intracoronarica velocità di pressione e portata parametri derivati. Pressione intracoronarica e registrazioni di velocità di flusso utilizzando il Combowire mostrando valori (A) di riferimento precedenti MI con alti response per iperemia (freccia nera). (B) 1 mese dopo infarto miocardico, l&#39;infarto correlato arteria (LAD) ha una risposta iperemica diminuzione della velocità di flusso coronarico (frecce nere). Come risultato, la pressione e velocità di flusso parametri derivati ​​(HMR) o flow velocity (CFR) sono diminuiti rispetto al basale. BAPV denota velocità di picco medio basale; pAPV denota velocità di picco media di picco; CFR denota riserva di flusso coronarico; HMR denota resistenza microvascolare hyperemic. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51269/51269fig4highres.jpg" target="_blank">Clicca qui per vedere l&#39;immagine ingrandita.</a> <img alt="Figura 5" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/51269/51269fig5highres.jpg" src="/files/ftp_upload/51269/51269fig5.jpg" /> Figura 5. Panoramica dei disegni di studio diversi. (A) Schema di più progetti possibili di studio per convalidare in fase di sperimentazione nuovi farmaci(IND) in varie fasi di MI che utilizzano questo modello suino KOP MI. A seconda della fase di scelta di IM che è sotto inchiesta, analisi funzionale può essere eseguita appena prima l&#39;allocazione trattamento come valore di base e la valutazione della zona a rischio. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51269/51269fig5highres.jpg" target="_blank">Clicca qui per vedere l&#39;immagine ingrandita.</a>

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Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Questo protocollo descrive il modello suino infarto del miocardio (MI) con un 90 min-torace chiuso palloncino occlusione coronarica discendente anteriore sinistra (LAD), seguita da riperfusione. Inoltre, il protocollo per diversi parametri di risultato, come la funzione cardiaca, emodinamica, resistenza microvascolare e dimensioni dell&#39;infarto, sono anche presentato.

Infarto miocardico e funzionale Outcome Assessment in Pigs

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

myocardial-infarction-and-functional-outcome-assessment-in-pigs

Research

JoVE Journal

Medicine

27.7K Views.  University Medical Center Utrecht.  Questo protocollo descrive il modello suino infarto del miocardio (MI) con un 90 min-torace chiuso palloncino occlusione coronarica discendente anteriore sinistra (LAD), seguita da riperfusione. Inoltre, il protocollo per diversi parametri di risultato, come la funzione cardiaca, emodinamica, resistenza microvascolare e dimensioni dell'infarto, sono anche presentato. 

Video: Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Acute Myocardial Infarction in Rats

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular diseases. Animal models that mimic human cardiac disease, such as myocardial infarction (MI) and ischemia-reperfusion (IR) that induces heart failure as well as pressure-overload (transverse aortic constriction) that induces cardiac hypertrophy and heart failure (Goldman and Tarnavski), are useful models to study cardiovascular disease. In particular, myocardial ischemia (MI) is a leading cause for cardiovascular morbidity and mortality despite controlling certain risk factors such as arteriosclerosis and treatments via surgical intervention (Thygesen). Furthermore, an acute loss of the myocardium following myocardial ischemia (MI) results in increased loading conditions that induces ventricular remodeling of the infarcted border zone and the remote non-infarcted myocardium. Myocyte apoptosis, necrosis and the resultant increased hemodynamic load activate multiple biochemical intracellular signaling that initiates LV dilatation, hypertrophy, ventricular shape distortion, and collagen scar formation. This pathological remodeling and failure to normalize the increased wall stresses results in progressive dilatation, recruitment of the border zone myocardium into the scar, and eventually deterioration in myocardial contractile function (i.e. heart failure). The progression of LV dysfunction and heart failure in rats is similar to that observed in patients who sustain a large myocardial infarction, survive and subsequently develops heart failure (Goldman). The acute myocardial infarction (AMI) model in rats has been used to mimic human cardiovascular disease; specifically used to study cardiac signaling mechanisms associated with heart failure as well as to assess the contribution of therapeutic strategies for the treatment of heart failure. The method described in this report is the rat model of acute myocardial infarction (AMI). This model is also referred to as an acute ischemic cardiomyopathy or ischemia followed by reperfusion (IR); which is induced by an acute 30-minute period of ischemia by ligation of the left anterior descending artery (LAD) followed by reperfusion of the tissue by releasing the LAD ligation (Vasilyev and McConnell). This protocol will focus on assessment of the infarct size and the area-at-risk (AAR) by Evan's blue dye and triphenyl tetrazolium chloride (TTC) following 4-hours of reperfusion; additional comments toward the evaluation of cardiac function and remodeling by modifying the duration of reperfusion, is also presented. Overall, this AMI rat animal model is useful for studying the consequence of a myocardial infarction on cardiac pathophysiological and physiological function.

The rat model of acute myocardial infarction (AMI) is useful to study the consequence of a MI on cardiac pathophysiological and physiological function.

Infarto acuto del miocardio in topi

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Ricerca

Medicina

Induction of Myocardial Infarction in Adult Zebrafish Using Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and teleost fish retain a remarkable capacity for cardiac regeneration with little or no scarring throughout life2,3. It is not known why only some non-mammalian vertebrates can recreate a complete organ from remnant tissues4,5. To understand the molecular and cellular differences between regenerative responses in different species, we need to use similar approaches for inducing acute injuries.
In mammals, the most frequently used model to study cardiac repair has been acute ischemia after a ligation of the coronary artery or tissue destruction after cryoinjury6,7. The cardiac regeneration in newts and zebrafish has been predominantly studied after a partial resection of the ventricular apex2,3. Recently, several groups have established the cryoinjury technique in adult zebrafish8-10. This method has a great potential because it allows a comparative discussion of the results obtained from the mammalian and non-mammalian species.
Here, we present a method to induce a reproducible disc-shaped infarct of the zebrafish ventricle by cryoinjury. This injury model is based on rapid freezing-thawing tissue, which results in massive cell death of about 20% of cardiomyocytes of the ventricular wall. First, a small incision was made through the chest with iridectomy scissors to access the heart. The ventricular wall was directly frozen by applying for 23-25 seconds a stainless steel cryoprobe precooled in liquid nitrogen. To stop the freezing of the heart, fish water at room temperature was dropped on the tip of the cryoprobe. The procedure is well tolerated by animals, with a survival rate of 95%.
To characterize the regenerative process, the hearts were collected and fixed at different days after cryoinjury. Subsequently, the specimen were embedded for cryosectioning. The slides with sections were processed for histological analysis, in situ hybridization and immunofluorescence. This undertaking enhances our understanding of the factors that are required for the regenerative plasticity in the zebrafish, and provide new insights into the machinery of cardiac regeneration. A conceptual and molecular understanding of heart regeneration in zebrafish will impact both developmental biology and regenerative medicine.

Zebrafish represents a valuable model to study the mechanisms of heart regeneration in vertebrates. Here, we present a protocol for induction of a heart infarct in adult zebrafish using cryoinjury. This method results in massive cell death within 20% of the ventricular wall, similar to that observed in mammalian infarcts.

L&#39;induzione di infarto miocardico in Zebrafish adulti usando Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and ...

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ideal model for testing novel therapeutic strategies.
In vivo magnetic resonance imaging (MRI) gives excellent views of the heart noninvasively with clear anatomical detail, which can be used for accurate functional assessment. Contrast agents can provide basic measures of tissue viability but these are nonspecific. Positron emission tomography (PET) is a complementary technique that is highly specific for molecular imaging, but lacks the anatomical detail of MRI. Used together, these techniques offer a sensitive, specific and quantitative tool for the assessment of the heart in disease and recovery following treatment.
In this paper we explain how these methods are carried out in mouse models of acute myocardial infarction. The procedures described here were designed for the assessment of putative protective drug treatments. We used MRI to measure systolic function and infarct size with late gadolinium enhancement, and PET with fluorodeoxyglucose (FDG) to assess metabolic function in the infarcted region. The paper focuses on practical aspects such as slice planning, accurate gating, drug delivery, segmentation of images, and multimodal coregistration. The methods presented here achieve good repeatability and accuracy maintaining a high throughput.

We describe how to perform MRI and PET imaging of the mouse heart. The protocol is tailored to assess treatment efficacy in models of myocardial infarction and heart failure.

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last decades. For clarification of the underlying mechanisms and the development of new therapeutic strategies, the availability of valid animal models are mandatory. Since we need new insights into pathomechanisms of cardiovascular diseases under in vivo conditions to combat myocardial infarction, the validity of the animal model is a crucial aspect. However, protection of animals are highly relevant in this context. Therefore, we establish a minimally invasive and simple model of myocardial infarction in mice, which assures a high reproducibility and survival rate of animals. Thus, this models fulfils the requirements of the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction) for animal experiments and assure the scientific information needed for further developing of therapeutical strategies for cardiovascular diseases.

A highly reproducible model for myocardial infarction in mice with minimal invasive manipulations is described. The model can be easily performed, resulting in a high reproducibility and survival rate. Thus, the described model will reduce the number of required animals as requested by the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction).

Minimal procedura chirurgica invasiva di indurre infarto miocardico nei topi

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are therefore required to confine cardiac damage, promote survival and reduce the disease burden of heart failure. Large animal experiments are an essential part in the translational process from experimental to clinical therapies. To optimize clinical translation, robust and representative outcome measures are mandatory. The present manuscript aims to address this need by describing the assessment of three clinically relevant outcome modalities in a pig acute myocardial infarction (AMI) model: infarct size in relation to area at risk (IS/AAR) staining, 3-dimensional transesophageal echocardiography (TEE) and admittance-based pressure-volume (PV) loops. Infarct size is the main determinant driving the transition from AMI to heart failure and can be quantified by IS/AAR staining. Echocardiography is a reliable and robust tool in the assessment of global and regional cardiac function in clinical cardiology. Here, a method for three-dimensional transesophageal echocardiography (3D-TEE) in pigs is provided. Extensive insight into cardiac performance can be obtained by admittance-based pressure-volume (PV) loops, including intrinsic parameters of myocardial function that are pre- and afterload independent. Combined with a clinically feasible experimental study protocol, these outcome measures provide researchers with essential information to determine whether novel therapeutic strategies could yield promising targets for future testing in clinical studies.

Reliable and accurate outcome assessment is the key for translation of preclinical therapies into clinical treatment. The current paper describes how to assess three clinically relevant primary outcome parameters of cardiac performance and damage in a pig acute myocardial infarction model.

La valutazione dell&#39;outcome primario in un modello suino di infarto miocardico acuto

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and regeneration, and to define new targets for therapeutics. For decades, models of complete heart regeneration existed in amphibians and fish, but a mammalian counterpart was not available. The recent discovery of a postnatal window during which mice possess regenerative capabilities has led to the establishment of a mammalian model of cardiac regeneration. A surgical model of mammalian cardiac regeneration in the neonatal mouse is presented herein. Briefly, postnatal day 1 (P1) mice are anesthetized by isoflurane and placed on an ice pad to induce hypothermia. After the chest is opened, and the left anterior descending coronary artery (LAD) is visualized, a suture is placed around the LAD to inflict myocardial ischemia in the left ventricle. The surgical procedure takes 10-15 min. Visualizing the coronary artery is crucial for accurate suture placement and reproducibility. Myocardial infarction and cardiac dysfunction are confirmed by triphenyl-tetrazolium chloride (TTC) staining and echocardiography, respectively. Complete regeneration 21 days post myocardial infarction is verified by histology. This protocol can be used to as a tool to elucidate mechanisms of mammalian cardiac regeneration after myocardial infarction.

This protocol describes a highly reproducible model of cardiac regeneration by surgical induction of myocardial infarction in the left ventricle of postnatal day 1 mice. The method involves induction of hypothermic anesthesia and ligation of the left anterior descending coronary artery.

Infarto del miocardio in topi neonati, un modello di rigenerazione cardiaca

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any potential therapeutic approach directed against acute left ventricular (LV) dysfunction. Current imaging modalities (e.g., echocardiography and magnetic resonance imaging) have several limitations since data on LV pressure cannot directly be measured. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion could serve as a novel method for a real-time evaluation of LV function.
At the beginning of the procedure, mice were anesthetized followed by endotracheal intubation. For LV catheterization, the right carotid artery was exposed via middle-neck incision. The catheter was introduced and placed into the LV cavity. Left thoracotomy was conducted and the left main coronary artery (LCA) was ligated. To induce reperfusion, the suture was released after 45 min. Pressure-volume data was recorded at all times.
Ligation of the LCA caused a decrease in LV systolic function as evidenced by a 30% reduction in stroke volume, LV ejection fraction (EF), and cardiac output. Maximum dP/dt as a parameter for LV contractility was also significantly reduced and diastolic function was severely impaired (minimum dP/dt -40%). Reperfusion over a period of 20 min did not lead to a complete recovery of LV function.
Real-time pressure-volume analysis served as a valid procedure for monitoring cardiac function during acute myocardial infarction in mice. Maintaining stable anesthesia and a standardized surgical approach was crucial to ensure valid results. As the early phase of acute myocardial infarction is critical for morbidity and mortality, the delineated method could be beneficial for preclinical evaluation of new strategies for cardioprotection.

Acute myocardial infarction in mice induces acute but incompletely characterized changes in left ventricular (LV) function. LV catheterization in mice undergoing coronary artery occlusion serves as a novel method for a real-time evaluation of LV function.

Analisi in tempo reale pressione-volume di infarto miocardico acuto nei topi

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

Digital PCR for Quantifying Circulating MicroRNAs in Acute Myocardial Infarction and Cardiovascular Disease

Circulating serum microRNAs (miRNAs) have shown promise as biomarkers for the cardiovascular disease and acute myocardial infarction (AMI), being released from the cardiovascular cells into the circulation. Circulating miRNAs are highly stable and can be quantified. The quantitative expression of specific miRNAs can be linked to the pathology, and some miRNAs show high tissue and disease specificity. Finding novel biomarkers for cardiovascular diseases is of importance for medical research. Quite recently, digital polymerase chain reaction (dPCR) has been invented. dPCR, combined with fluorescent hydrolysis probes, enables specific direct absolute quantification. dPCR exhibits superior technical qualities, including a low variability, high linearity, and high sensitivity compared to the quantitative polymerase chain reaction (qPCR). Thus, dPCR is a more accurate and reproducible method for directly quantifying miRNAs, particularly for the use in large multi-center cardiovascular clinical trials. In this publication, we describe how to effectively perform digital PCR in order to assess the absolute copy number in serum samples.

Circulating microRNAs have shown promise as biomarkers for cardiovascular diseases and acute myocardial infarctions. In this study, we describe a protocol for miRNA extraction, reverse transcription, and digital PCR for the absolute quantification of miRNAs in the serum of patients with cardiovascular disease.

PCR digitale per quantificare circolanti microRNA nell'infarto miocardico acuto e la malattia cardiovascolare

Circulating serum microRNAs (miRNAs) have shown promise as biomarkers for the cardiovascular disease and acute myocardial infarction (AMI), being released ...

A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we demonstrate a murine cryoinjury infarct model that generates precise infarct sizes with high reproducibility and replicability. In brief, after intubation and sternotomy of the animal, the heart is lifted from the thorax. The probe of a handheld liquid nitrogen delivery system is applied onto the myocardial wall to induce cryoinjury. Impaired ventricular function and electrical conduction can be monitored with echocardiography or optical mapping. Transmural myocardial remodeling of the infarcted area is characterized by collagen deposition and loss of cardiomyocytes. Compared to other models (e.g., LAD-ligation), this model utilizes a handheld liquid nitrogen delivery system to generate more uniform infarct sizes.

This article demonstrates a model to study cardiac remodeling after myocardial cryoinjury in mice.

Un modello di criolesionismo per studiare l'infarto miocardico nel mouse

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we ...

Semi-Minimal Invasive Method to Induce Myocardial Infarction in Rats and the Assessment of Cardiac Function by an Isolated Working Heart System

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily and highly reproducible MI induction procedure is required to obtain further insight and better understanding of the underlying pathological changes. This procedure can also be used to evaluate the effects or potency of new and promising treatments (as drugs or interventions) in acute MI, subsequent remodeling and heart failure (HF). After intubation and pre-operative preparation of the animal, an anesthetic protocol with isoflurane was performed, and the surgical procedure was conducted&#160;quickly. Using a minimally invasive approach, the left anterior descending artery (LAD) was located and occluded by a ligature. The occlusion can be performed acutely for subsequent reperfusion (ischemia/reperfusion injury). Alternatively, the vessel can be ligated permanently to investigate the development of chronic MI, remodeling or HF. Despite common pitfalls, the drop-out rates are minimal. Various treatments such as remote ischemic conditioning can be examined for their cardioprotective potential pre-, peri- and post-operatively. The post-operative recovery was quick as the anesthesia was precisely controlled and the duration of the operation was short. Post-operative analgesia was administered for three days. The minimally invasive procedure reduces the risk of infection and inflammation. Furthermore, it facilitates rapid recovery. The &#8220;working heart&#8221; measurements were performed ex vivo and enabled precise control of preload, afterload and flow. This procedure requires specific equipment and training for adequate performance. This manuscript provides a detailed step-by-step introduction for conducting these measurements.

This article presents an efficient method to perform myocardial ischemia and subsequent chronic reperfusion in rats using a minimally invasive approach. In addition, left ventricular hemodynamic function of rats is assessed by echocardiography and isolated working heart methods.&#160;

Metodo semi-minimo invasivo per indurre l'infarto miocardico nei ratti e la valutazione della funzione cardiaca da parte di un sistema cardiaco funzionante isolato

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily ...