クリーンルーム環境と細胞療法のための微生物制御およびモニタリング戦略

要約

このプロトコルは、クリーンルーム環境で微生物のバイオバーデンを最小限に抑えるためのベストプラクティスを要約し、環境モニタリング、プロセスモニタリング、製品無菌試験などの戦略が含まれています。これは、現在の適正組織慣行基準および現在の適正製造基準を満たす必要がある製造および試験施設に関連しています。

要約

堅牢なガウン、クリーニング、環境モニタリング、および人員モニタリング対策を組み込んだ十分に検証された全体的なプログラムは、細胞療法製造スイートおよび対応する試験所の微生物バイオバーデンを最小限に抑えて、施設が管理状態で稼働していることを確認するために重要です。無菌試験などの品質管理手段 による 製品の安全性の確保は、最小限の操作(セクション361)と最小限の操作(セクション351)の両方のヒト細胞、組織、および細胞および組織ベースの製品(HCT / Ps)の規制要件です。このビデオでは、米国薬局方(USP<71>)および国立衛生研究所(NIH)の代替無菌試験方法が提供する、ガウン、洗浄、材料のステージング、環境モニタリング、プロセスモニタリング、直接接種を使用した製品無菌試験など、クリーンルーム環境で操作するための最良の無菌プラクティスを開発および組み込む方法についての段階的なガイドを提供します。このプロトコルは、現在の適正組織基準(cGTP)および現在の適正製造基準(cGMP)を満たすことが期待される施設向けのリファレンスガイドとして意図されています。

概要

環境モニタリング(EM)、プロセスモニタリング、および製品無菌試験を通じて強力な微生物モニタリングプログラムを実施することは、細胞療法ラボにおける現在の適正組織慣行(cGTP)および現在の適正製造基準(cGMP)の規制要件です¹。さらに、米国食品医薬品局(FDA)は、製品の品質管理(QC)テストを実施する研究所も、無菌充填作業に使用されるものに匹敵する施設と管理を採用する必要があることを期待しています²。

このプロトコルには4つの主要なセクションがあります:1)人員のガウン、クリーニング、および材料のステージングを含む無菌慣行。2)生存可能な空気および表面培養および非生存粒子空気モニタリングを含むEM。3)セトリングプレートや手袋をはめた指先のサンプリングを含むプロセスモニタリング。4)公定書米国薬局方(USP)<71>方法³またはNIH代替無菌試験方法⁴による製品無菌試験。これらの対策を一緒に使用すると、施設を管理状態に保つための効果的な方法になります。

ここで説明する手法は目新しいものではありません。しかし、規制当局や専門機関からの現在の基準には詳細が欠けているため、特に現場での製造と製品の無菌性試験が急速に....

プロトコル

1.無菌の慣行

1. クリーンルームスペースの人員ガウン
   注:この手順は、未分類のスペースでの最初のガウン、その後の国際標準化機構(ISO)8エリア、次にISO7エリアへの入場に基づいています。この手順は、既存のスペースをクリーンルーム機能に変換しようとするラボに関連しています。理想的には、すべての初期ガウンはISO8分類スペースで行われます(未分類スペースではありません)。
   1. ゆるい髪を固定します。手を洗い、スクラブに着替えます(長袖のスクラブトップとフルレングスのスクラブパンツが望ましい)。靴カバーをかぶったクリーンルームの靴に集まって着替えます。
   2. アルコールベースの手指消毒剤を使用して手を消毒し、次に次の各ステップの間にもう一度消毒します:非滅菌手袋を着用し、該当する場合はあごひげカバー(目に見える顔の毛の量)を着用します。非滅菌のブーファンを着用し、長袖のスクラブトップが使用されていない場合は、前腕を非滅菌スリーブで覆います。
   3. 靴カバーを外した後、ISO8控室のドアの前にある粘着性のあるマットに足を踏み入れて、靴カバーを取り外します。入る前に、足全体が粘着性のあるマットに接触していることを確認してください。靴カバーを廃棄し、手袋とドアハンドルを70%滅菌イソプロピルアルコール(sIPA)で除染します。ISO8控室に入ります。
   4. 滅菌フード、滅菌フェイスマスク、滅菌つなぎ服、滅菌ブーツカバー、およ....

ディスカッション

このプロトコルには、クリーンルームやBSC内の無菌技術や一方向の気流の維持など、いくつかの重要な領域があります。 ベストプラクティスには、乱気流を最小限に抑えるためにゆっくりと慎重に移動することが含まれます。無菌操作は、上からではなく、製品の側面から実行する必要があります。クローズドシステム処理と最終滅菌原料の使用が推奨されます。重要な場所で話したり、壁.......

資料

Name	Company	Catalog Number	Comments
20-25°C Incubator			Lab preference
30-35°C Incubator			Lab preference
Alcohol-based hand sanitizer			Lab preference
BacT/ALERT Dual-T instrument	BioMerieux Industry
Beard cover			Lab preference
Biosafety cabinet (BSC)			Lab preference
Cleanroom shoes			Lab preference
Fluidthioglycollate medium (FTM)	Hardy Diagnostics	U84	USP
Handheld cleaning mop	Contec	2665LF
Hypodermic needle			Lab preference
iFA+ BacT/ALERT bottle	Biomerieux	412990
iFN+ BacT/ALERT bottle	Biomerieux	412991
Isokinetic head			Lab preference
Laser particle counter	TSI Incorporated	9500-01
LpH III	Steris	1S16CX
Mirror			Lab preference
Non-sterile bouffant			Lab preference
Non-sterile gloves			Lab preference
Non-sterile shoe covers			Lab preference
Non-sterile sleeve covers			Lab preference
Parafilm			Lab preference
Peridox RTU	Contec	CR85335IR
Plastic bag			Lab preference
Sabouraud Dextrose Agar with Lecithinase and Tween (SABLT)	Hardy Diagnostics	P595	USP, irradiated
Sabouraurd Dextrose Agar (SAB)	Hardy Diagnostics	W565	USP, irradiated
Safety glasses			Lab preference
Scrubs (top and bottom)			Lab preference
Spor-Klenx RTU	Steris	6525M2
Sterile 70% isopropyl alcohol (IPA)	Decon CiDehol	8316
Sterile alcohol wipe			Lab preference
Sterile boot covers	Kimberly Clark		Cat# varies based on size
Sterile coveralls	Kimberly Clark		Cat# varies based on size
Sterile face mask			Lab preference
Sterile gloves			Lab preference
Sterile hood	Kimberly Clark		Cat# varies based on size
Sterile low-lint wipes	Texwipe	TX3210
Sterile mop cleaning pads	Contec	MEQT0002SZ
Sterile sleeve covers	Kimberly Clark	36077
Sterile spreading rod	Fisher Scientific	14665231
Sterile syringe			Lab preference
Tacky mats			Lab preference
Tryptic Soy Agar (TSA)	Hardy Diagnostics	W570R	USP, irradiated
Tryptic Soy Agar with Lecithinase and Tween (TSALT)	Hardy Diagnostics	P520R	USP, irradiated
Tryptic Soy Broth (TSB)	Hardy Diagnostics	U46	USP
Tubing			Lab preference
Vesphene III	Steris	1S15CX
Viable air sampler	Hardy Diagnostics	BAS22K
Vortex			Lab preference