אסטרטגיות בקרה וניטור מיקרוביאליות עבור סביבות חדרים נקיים וטיפולים תאיים

Summary

הפרוטוקול מסכם את שיטות העבודה המומלצות למזעור העומס הביולוגי המיקרוביאלי בסביבת חדר נקי וכולל אסטרטגיות כגון ניטור סביבתי, ניטור תהליכים ובדיקת סטריליות מוצרים. הוא רלוונטי למתקני ייצור ובדיקה הנדרשים לעמוד בתקני פרקטיקה של רקמות טובות ובתקני שיטות ייצור טובות הנוכחיים.

Abstract

תוכנית הוליסטית מתוקפת היטב המשלבת אמצעי ניקוי, ניטור סביבתי וניטור כוח אדם חזקים היא קריטית למזעור הנטל הביולוגי המיקרוביאלי בחדרי הייצור של הטיפול התאי ובמעבדות הבדיקה המתאימות, כדי להבטיח שהמתקנים פועלים במצב של שליטה. הבטחת בטיחות המוצר באמצעות אמצעי בקרת איכות, כגון בדיקות סטריליות, היא דרישה רגולטורית הן עבור מניפולציה מינימלית (סעיף 361) והן עבור יותר ממניפולציה מינימלית (סעיף 351) עבור תאים אנושיים, רקמות ומוצרים מבוססי תאים ורקמות (HCT/Ps). בסרטון זה, אנו מספקים מדריך מדורג כיצד לפתח ולשלב את שיטות העבודה האספטיות הטובות ביותר לפעולה בסביבת חדר נקי, כולל חלוק, ניקוי, בימוי חומרים, ניטור סביבתי, ניטור תהליכים ובדיקת סטריליות מוצרים באמצעות חיסון ישיר, המסופק על ידי הפרמקופיאה של ארצות הברית (USP<71>) ושיטת בדיקת הסטריליות האלטרנטיבית של המכונים הלאומיים לבריאות (NIH). פרוטוקול זה מיועד לשמש כמדריך עזר למפעלים הצפויים לעמוד בשיטות הקיימות של רקמות טובות (cGTP) ובשיטות הייצור הטובות הנוכחיות (cGMP).

Introduction

יישום תוכנית ניטור מיקרוביאלית חזקה באמצעות ניטור סביבתי (EM), ניטור תהליכים ובדיקות סטריליות של מוצרים הוא דרישה רגולטורית עבור שיטות קיימות של רקמות טובות (cGTP) ושיטות ייצור נאותות נוכחיות (cGMP) במעבדות לטיפול תאי¹. בנוסף, מנהל המזון והתרופות האמריקני (FDA) מצפה כי המעבדה המבצעת את בדיקות בקרת האיכות (QC) של המוצר צריכה גם להעסיק מתקנים ובקרות דומים לאלה המשמשים לפעולות מילוי אספטי².

פרוטוקול זה כולל ארבעה חלקים עיקריים: 1) פרקטיקות אספטיות, כולל הלבשת כוח אדם, ניקוי ובימוי חומרים; 2) EM, כולל תרביות אוויר ופני שטח בנות קיימא וניטור אוויר חלקיקים שאינו בר קיימא; 3) ניטור תהליכים, כולל צלח....

Protocol

1. פרקטיקות אספטיות

1. שמלת כוח אדם לחלל חדר נקי
   הערה: הליך זה מבוסס על גלימה ראשונית בחלל לא מסווג, ולאחר מכן כניסה לאזור ארגון התקינה הבינלאומי (ISO) 8 ולאחר מכן לאזור ISO7. הליך זה רלוונטי למעבדות המנסות להסב חלל קיים לפונקציה של חדר נקי. באופן אידיאלי, כל השמלות הראשוניות יתרחשו בחלל מסווג ISO8 (לא בחלל לא מסווג).
   1. הבטיחו שיער רפוי. שטפו ידיים, והחליפו לקרצוף (חולצות קרצוף עם שרוולים ארוכים ומכנסי קרצוף באורך מלא עדיפים). אספו והחליפו לנעליים נקיות עם כיסויי נעליים.
   2. יש לחטא את הידיים באמצעות חומר חיטוי ידיים על בסיס אלכוהול תחילה ולאחר מכן שוב בין כל אחד מהשלבים הבאים: לבישת כפפות לא סטריליות ולאחר מכן כיסוי זקן (לכל כמו....

תוצאות

התוצאות הצפויות מתוארות בטבלה 1. יש לבדוק את נתוני EM ולעקוב אחריהם עם חקירה מתאימה ותגובה לפעולה, התראה או טיולי הגבלת ISO. אם מתרחש טיול עבור חלקיקים שאינם בני קיימא, יש להמשיך לפי ISO 14644-Annex A, sec A.5.5⁷. אם ניתן לייחס את הטיול להתרחשות חריגה הניתנת לזיהוי מיידי, יש לתעד את תו?.......

Discussion

ישנם מספר תחומים קריטיים בפרוטוקול זה, כולל תחזוקה של טכניקה אספטית וזרימת אוויר חד-כיוונית בתוך חדרים נקיים ו- BSC. שיטות עבודה מומלצות כוללות תנועה איטית ומכוונת כדי למזער מערבולות. מניפולציות אספטיות צריכות להתבצע מצד המוצר, לא מלמעלה. מומלץ לבצע עיבוד מערכת סגורה ושימוש בחומרי גלם מעוק?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
20-25°C Incubator			Lab preference
30-35°C Incubator			Lab preference
Alcohol-based hand sanitizer			Lab preference
BacT/ALERT Dual-T instrument	BioMerieux Industry
Beard cover			Lab preference
Biosafety cabinet (BSC)			Lab preference
Cleanroom shoes			Lab preference
Fluidthioglycollate medium (FTM)	Hardy Diagnostics	U84	USP
Handheld cleaning mop	Contec	2665LF
Hypodermic needle			Lab preference
iFA+ BacT/ALERT bottle	Biomerieux	412990
iFN+ BacT/ALERT bottle	Biomerieux	412991
Isokinetic head			Lab preference
Laser particle counter	TSI Incorporated	9500-01
LpH III	Steris	1S16CX
Mirror			Lab preference
Non-sterile bouffant			Lab preference
Non-sterile gloves			Lab preference
Non-sterile shoe covers			Lab preference
Non-sterile sleeve covers			Lab preference
Parafilm			Lab preference
Peridox RTU	Contec	CR85335IR
Plastic bag			Lab preference
Sabouraud Dextrose Agar with Lecithinase and Tween (SABLT)	Hardy Diagnostics	P595	USP, irradiated
Sabouraurd Dextrose Agar (SAB)	Hardy Diagnostics	W565	USP, irradiated
Safety glasses			Lab preference
Scrubs (top and bottom)			Lab preference
Spor-Klenx RTU	Steris	6525M2
Sterile 70% isopropyl alcohol (IPA)	Decon CiDehol	8316
Sterile alcohol wipe			Lab preference
Sterile boot covers	Kimberly Clark		Cat# varies based on size
Sterile coveralls	Kimberly Clark		Cat# varies based on size
Sterile face mask			Lab preference
Sterile gloves			Lab preference
Sterile hood	Kimberly Clark		Cat# varies based on size
Sterile low-lint wipes	Texwipe	TX3210
Sterile mop cleaning pads	Contec	MEQT0002SZ
Sterile sleeve covers	Kimberly Clark	36077
Sterile spreading rod	Fisher Scientific	14665231
Sterile syringe			Lab preference
Tacky mats			Lab preference
Tryptic Soy Agar (TSA)	Hardy Diagnostics	W570R	USP, irradiated
Tryptic Soy Agar with Lecithinase and Tween (TSALT)	Hardy Diagnostics	P520R	USP, irradiated
Tryptic Soy Broth (TSB)	Hardy Diagnostics	U46	USP
Tubing			Lab preference
Vesphene III	Steris	1S15CX
Viable air sampler	Hardy Diagnostics	BAS22K
Vortex			Lab preference