Estratégias de Controle e Monitoramento Microbiano para Ambientes de Salas Limpas e Terapias Celulares

Resumo

O protocolo resume as melhores práticas para minimizar a carga biológica microbiana em um ambiente de sala limpa e inclui estratégias como monitoramento ambiental, monitoramento de processo e teste de esterilidade do produto. É relevante para instalações de fabricação e teste que são necessárias para atender aos padrões atuais de boas práticas de tecidos e aos padrões atuais de boas práticas de fabricação.

Resumo

Um programa bem validado e holístico que incorpore medidas robustas de avental, limpeza, monitoramento ambiental e monitoramento de pessoal é fundamental para minimizar a carga biológica microbiana em suítes de fabricação de terapia celular e nos laboratórios de teste correspondentes para garantir que as instalações estejam operando em um estado de controle. Garantir a segurança do produto por meio de medidas de controle de qualidade, como testes de esterilidade, é um requisito regulatório tanto para células, tecidos e produtos à base de células celulares e tecidos (seção 361) minimamente manipulados (seção 361) e mais do que minimamente manipulados (seção 351) de células, tecidos e produtos à base de células e tecidos (HCT/Ps). Neste vídeo, fornecemos um guia passo a passo sobre como desenvolver e incorporar as melhores práticas assépticas para operar em um ambiente de sala limpa, incluindo avental, limpeza, estadiamento de materiais, monitoramento ambiental, monitoramento de processos e testes de esterilidade de produtos usando inoculação direta, fornecidos pela Farmacopeia dos Estados Unidos (USP<71>) e pelo Método de Teste de Esterilidade Alternativa do National Institutes of Health (NIH). Este protocolo pretende ser um guia de referência para estabelecimentos que se espera que atendam às atuais boas práticas teciduais (cGTP) e boas práticas de fabricação atuais (cGMP).

Introdução

A implementação de um forte programa de monitoramento microbiano por meio de monitoramento ambiental (ME), monitoramento de processos e testes de esterilidade de produtos é um requisito regulatório para as atuais boas práticas teciduais (cGTP) e boas práticas de fabricação atuais (cGMP) em laboratórios de terapia celular¹. Além disso, a Food and Drug Administration (FDA) dos Estados Unidos espera que o laboratório que realiza os testes de controle de qualidade (CQ) do produto também empregue instalações e controles comparáveis aos utilizados para operações de enchimento asséptico².

Esse proto....

Protocolo

1. Práticas assépticas

1. Vestido de pessoal para um espaço de sala limpa
   NOTA: Este procedimento baseia-se na colocação inicial de batas num espaço não classificado, seguido da entrada numa área da International Organization for Standardization (ISO) 8 e, em seguida, numa área ISO7. Este procedimento é relevante para laboratórios que tentam converter o espaço existente em uma função de sala limpa. Idealmente, todo o vestido inicial ocorreria em um espaço classificado ISO8 (não em um espaço não classificado).
   1. Fixe os cabelos soltos. Lave as mãos e transforme-se em esfoliantes (esfoliantes de manga comprida e calças de esfoliação de co....

Discussão

Existem várias áreas críticas neste protocolo, incluindo a manutenção da técnica asséptica e do fluxo de ar unidirecional dentro de salas limpas e dos BSCs. As melhores práticas incluem mover-se lenta e deliberadamente para minimizar a turbulência. As manipulações assépticas devem ser realizadas do lado do produto, não de cima. Recomenda-se o processamento em sistema fechado e o uso de matérias-primas esterilizadas terminais. Falar em áreas críticas e encostar-se em paredes ou equipamentos deve ser evitad.......

Materiais

Name	Company	Catalog Number	Comments
20-25°C Incubator			Lab preference
30-35°C Incubator			Lab preference
Alcohol-based hand sanitizer			Lab preference
BacT/ALERT Dual-T instrument	BioMerieux Industry
Beard cover			Lab preference
Biosafety cabinet (BSC)			Lab preference
Cleanroom shoes			Lab preference
Fluidthioglycollate medium (FTM)	Hardy Diagnostics	U84	USP
Handheld cleaning mop	Contec	2665LF
Hypodermic needle			Lab preference
iFA+ BacT/ALERT bottle	Biomerieux	412990
iFN+ BacT/ALERT bottle	Biomerieux	412991
Isokinetic head			Lab preference
Laser particle counter	TSI Incorporated	9500-01
LpH III	Steris	1S16CX
Mirror			Lab preference
Non-sterile bouffant			Lab preference
Non-sterile gloves			Lab preference
Non-sterile shoe covers			Lab preference
Non-sterile sleeve covers			Lab preference
Parafilm			Lab preference
Peridox RTU	Contec	CR85335IR
Plastic bag			Lab preference
Sabouraud Dextrose Agar with Lecithinase and Tween (SABLT)	Hardy Diagnostics	P595	USP, irradiated
Sabouraurd Dextrose Agar (SAB)	Hardy Diagnostics	W565	USP, irradiated
Safety glasses			Lab preference
Scrubs (top and bottom)			Lab preference
Spor-Klenx RTU	Steris	6525M2
Sterile 70% isopropyl alcohol (IPA)	Decon CiDehol	8316
Sterile alcohol wipe			Lab preference
Sterile boot covers	Kimberly Clark		Cat# varies based on size
Sterile coveralls	Kimberly Clark		Cat# varies based on size
Sterile face mask			Lab preference
Sterile gloves			Lab preference
Sterile hood	Kimberly Clark		Cat# varies based on size
Sterile low-lint wipes	Texwipe	TX3210
Sterile mop cleaning pads	Contec	MEQT0002SZ
Sterile sleeve covers	Kimberly Clark	36077
Sterile spreading rod	Fisher Scientific	14665231
Sterile syringe			Lab preference
Tacky mats			Lab preference
Tryptic Soy Agar (TSA)	Hardy Diagnostics	W570R	USP, irradiated
Tryptic Soy Agar with Lecithinase and Tween (TSALT)	Hardy Diagnostics	P520R	USP, irradiated
Tryptic Soy Broth (TSB)	Hardy Diagnostics	U46	USP
Tubing			Lab preference
Vesphene III	Steris	1S15CX
Viable air sampler	Hardy Diagnostics	BAS22K
Vortex			Lab preference