Mikrobielle Kontroll- und Überwachungsstrategien für Reinraumumgebungen und zelluläre Therapien

Zusammenfassung

Das Protokoll fasst die Best Practices zur Minimierung der mikrobiellen Keimbelastung in einer Reinraumumgebung zusammen und umfasst Strategien wie Umweltüberwachung, Prozessüberwachung und Produktsterilitätsprüfung. Sie ist relevant für Produktions- und Prüfeinrichtungen, die die aktuellen Standards der guten Gewebepraxis und die aktuellen Standards der guten Herstellungspraxis erfüllen müssen.

Zusammenfassung

Ein gut validiertes und ganzheitliches Programm, das robuste Kittel-, Reinigungs-, Umweltüberwachungs- und Personalüberwachungsmaßnahmen umfasst, ist entscheidend für die Minimierung der mikrobiellen Keimbelastung in den Produktionsstätten für Zelltherapien und den entsprechenden Testlabors, um sicherzustellen, dass die Einrichtungen in einem Zustand der Kontrolle arbeiten. Die Gewährleistung der Produktsicherheit durch Qualitätskontrollmaßnahmen, wie z. B. Sterilitätstests, ist eine regulatorische Anforderung sowohl für minimal manipulierte (§ 361) als auch für mehr als minimal manipulierte (§ 351) menschliche Zellen, Gewebe und zelluläre und gewebebasierte Produkte (HCT/Ps). In diesem Video bieten wir eine schrittweise Anleitung zur Entwicklung und Integration der besten aseptischen Praktiken für den Betrieb in einer Reinraumumgebung, einschließlich Ankleiden, Reinigen, Bereitstellen von Materialien, Umgebungsüberwachung, Prozessüberwachung und Produktsterilitätsprüfung mit direkter Inokulation, die von der United States Pharmacopeia (USP<71>) und der alternativen Sterilitätstestmethode der National Institutes of Health (NIH) bereitgestellt werden. Dieses Protokoll ist als Referenzleitfaden für Betriebe gedacht, von denen erwartet wird, dass sie die aktuellen guten Gewebepraktiken (cGTP) und die aktuellen guten Herstellungspraktiken (cGMP) erfüllen.

Einleitung

Die Implementierung eines starken mikrobiellen Überwachungsprogramms durch Umweltüberwachung (EM), Prozessüberwachung und Produktsterilitätstests ist eine regulatorische Anforderung für die aktuelle gute Gewebepraxis (cGTP) und die aktuelle gute Herstellungspraxis (cGMP) in Zelltherapielabors¹. Darüber hinaus erwartet die US-amerikanische Food and Drug Administration (FDA), dass das Labor, das die Qualitätskontrolle (QC) des Produkts durchführt, auch Einrichtungen und Kontrollen einsetzt, die mit denen vergleichbar sind, die für aseptische Abfüllvorgänge verwendet werden².

Dieses Protokoll be....

Protokoll

1. Aseptische Praktiken

1. Personalkleidung für einen Reinraumraum
   HINWEIS: Dieses Verfahren basiert auf dem anfänglichen Anziehen in einem nicht klassifizierten Raum, gefolgt vom Eintritt in einen Bereich der Internationalen Organisation für Normung (ISO) 8 und dann in einen ISO7-Bereich. Dieses Verfahren ist relevant für Labore, die versuchen, bestehende Räume in eine Reinraumfunktion umzuwandeln. Im Idealfall würden alle anfänglichen Kleider in einem ISO8-klassifizierten Raum (nicht in einem nicht klassifizierten Raum) stattfinden.
   1. Sichere lose Haare. Waschen Sie sich die Hände und ziehen Sie sich ein Peeling an (langärmelige Peeli....

Diskussion

Es gibt mehrere kritische Bereiche in diesem Protokoll, darunter die Aufrechterhaltung der aseptischen Technik und des unidirektionalen Luftstroms in Reinräumen und den BSCs. Zu den Best Practices gehört das langsame und bewusste Handeln, um Turbulenzen zu minimieren. Aseptische Manipulationen sollten von der Seite des Produkts durchgeführt werden, nicht von oben. Empfohlen werden eine Closed-System-Verarbeitung und die Verwendung von endsterilisierten Rohstoffen. Das Sprechen in kritischen Bereichen und das Anlehnen .......

Materialien

Name	Company	Catalog Number	Comments
20-25°C Incubator			Lab preference
30-35°C Incubator			Lab preference
Alcohol-based hand sanitizer			Lab preference
BacT/ALERT Dual-T instrument	BioMerieux Industry
Beard cover			Lab preference
Biosafety cabinet (BSC)			Lab preference
Cleanroom shoes			Lab preference
Fluidthioglycollate medium (FTM)	Hardy Diagnostics	U84	USP
Handheld cleaning mop	Contec	2665LF
Hypodermic needle			Lab preference
iFA+ BacT/ALERT bottle	Biomerieux	412990
iFN+ BacT/ALERT bottle	Biomerieux	412991
Isokinetic head			Lab preference
Laser particle counter	TSI Incorporated	9500-01
LpH III	Steris	1S16CX
Mirror			Lab preference
Non-sterile bouffant			Lab preference
Non-sterile gloves			Lab preference
Non-sterile shoe covers			Lab preference
Non-sterile sleeve covers			Lab preference
Parafilm			Lab preference
Peridox RTU	Contec	CR85335IR
Plastic bag			Lab preference
Sabouraud Dextrose Agar with Lecithinase and Tween (SABLT)	Hardy Diagnostics	P595	USP, irradiated
Sabouraurd Dextrose Agar (SAB)	Hardy Diagnostics	W565	USP, irradiated
Safety glasses			Lab preference
Scrubs (top and bottom)			Lab preference
Spor-Klenx RTU	Steris	6525M2
Sterile 70% isopropyl alcohol (IPA)	Decon CiDehol	8316
Sterile alcohol wipe			Lab preference
Sterile boot covers	Kimberly Clark		Cat# varies based on size
Sterile coveralls	Kimberly Clark		Cat# varies based on size
Sterile face mask			Lab preference
Sterile gloves			Lab preference
Sterile hood	Kimberly Clark		Cat# varies based on size
Sterile low-lint wipes	Texwipe	TX3210
Sterile mop cleaning pads	Contec	MEQT0002SZ
Sterile sleeve covers	Kimberly Clark	36077
Sterile spreading rod	Fisher Scientific	14665231
Sterile syringe			Lab preference
Tacky mats			Lab preference
Tryptic Soy Agar (TSA)	Hardy Diagnostics	W570R	USP, irradiated
Tryptic Soy Agar with Lecithinase and Tween (TSALT)	Hardy Diagnostics	P520R	USP, irradiated
Tryptic Soy Broth (TSB)	Hardy Diagnostics	U46	USP
Tubing			Lab preference
Vesphene III	Steris	1S15CX
Viable air sampler	Hardy Diagnostics	BAS22K
Vortex			Lab preference