治療薬で試作用したMPNST細胞のサイトメーターアッセイ

まず、80%コンフルエントな悪性末梢神経鞘腫瘍またはMPNST細胞を、黒壁の96ウェルプレートにウェルあたり1200細胞の密度で播種します。試験する薬物の希釈液を調製した後、各希釈液またはビヒクルを少なくとも3つの複製細胞に添加します。直接細胞数を評価するには、でっち上げられた33342を、1ミリリットルあたり1〜5マイクログラムの最終濃度にプレートに添加します。

そして、プレートを摂氏37度で30分間インキュベートします。プレートをハイスループットイメージングサイトメーターに置き、100、000〜600、000ミリ秒の露光時間で総細胞数の直接セルカウントオプションを使用してプレートをスキャンします。ソフトウェアを使用して読み取り値を解析し、スプレッドシートにエクスポートし、統計分析に適切なソフトウェアを使用します。