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Method Article
* 이 저자들은 동등하게 기여했습니다
쥐의 좌골 신경통을 유도하기 위해 만성 수축 손상 모델에서 Fu의 피하 침을 사용하기 위한 프로토콜을 제시합니다.
중국 전통 의학에서 발명된 침술 기술인 Fu's Subcutaneous Needling(FSN)은 통증 완화를 위해 전 세계적으로 사용되고 있습니다. 그러나 작용 메커니즘은 아직 완전히 이해되지 않았습니다. FSN 치료 중에는 FSN 바늘이 삽입되어 흔들리는 움직임으로 장시간 피하 조직에 유지됩니다. 그러나 연구자를 위해 동물 모델(예: 쥐)에서 FSN을 조작하는 동안 자세를 유지하는 데 어려움이 있습니다. 불편한 치료는 FSN 바늘에 대한 두려움과 내성으로 이어져 부상 위험을 증가시키고 연구 데이터에 영향을 미칠 수도 있습니다. 마취도 연구 결과에 영향을 미칠 수 있습니다. 따라서 중재 중 부상을 최소화하는 동물에 대한 FSN 치료 전략이 필요합니다. 이 연구는 신경병증성 통증을 유발하기 위해 Sprague-Dawley 쥐의 만성 수축 손상 모델을 사용합니다. 이 모델은 신경 압박 증후군 및 말초 신경병증과 같은 상태에서 볼 수 있는 압박 또는 포착을 모방하여 말초 신경의 외과적 수축을 통해 인간에서 관찰되는 신경 손상으로 인한 통증을 재현합니다. FSN 바늘을 동물의 몸 피하층에 쉽게 삽입하기 위한 바늘 삽입 및 방향, 바늘 유지, 흔들리는 움직임 등 적절한 조작을 소개합니다. 쥐의 불편함을 최소화하면 쥐가 긴장하는 것을 방지하여 근육이 수축하여 바늘의 진입을 방해하고 연구 효율성을 향상시킵니다.
신경 손상으로 인한 통증으로 정의되는 신경병증성 통증은 전 세계 인구의 6.9%-10%에 영향을 미치는 것으로 추정되며, 보고된 평생 유병률은 49%-70%입니다1,2. 또한 관리하기 가장 어려운 통증 증후군 중 하나로 간주됩니다. 신경병증성 통증을 관리하기 위한 약리학적 제제의 사용은 비스테로이드성 항염증제 및 오피오이드와 같이 일반적으로 처방되는 진통제가 이러한 유형의 통증을 완화하는 데 거의 효과가 없는 것으로 나타났기 때문에 제한적인 성공을 거두었습니다 3,4. 따라서 새로운 치료 옵션, 특히 비약물적 치료법을 모색할 필요가 있습니다. 침술은 비약물적 개입으로서 체성 감각계에 진통 효과를 발휘하여 잠재적으로 신경병증성 통증을 완화합니다. 임상 및 전임상 연구 모두에서 침 치료는 심각한 부작용 없이 신경병증성 통증 증상을 완화하는 데 효과적이라고 나타났다 5,6,7. 그러나 신경병증성 통증의 통증 완화를 위한 침 치료의 중심 메커니즘은 아직 더 연구되지 않았습니다.
최근 몇 년 동안 Fu의 피하 침(FSN)은 통증 관련 신경 질환 치료로 인기를 얻고 있습니다8. FSN은 중국 전통 침술에서 유래했으며 1996년 중국 전통 의사인 Zhonghua Fu에 의해 처음 기술되었습니다(9,10). FSN은 전통적인 침술에서 유래했지만 경락 기반 침술, 음과 양의 원리 및 경혈 개념과 기술 및 이론이 크게 다릅니다. FSN은 근막 통증을 효과적으로 해결하기 위해 신경생리학적 및 해부학적 접근에 더 중점을 두고있다 11. FSN 요법은 근육과 밀접하게 관련된 결합 조직을 표적으로 하여 다양한 고통스러운 근육 질환을 다루기 위해 임상에 적용되며, 특히 근육 조임(TM)의 치료에 중점을 둡니다12. 통증 완화를 위한 보완 요법으로서, FSN은 신속한 통증 관리와 연조직 경련의 현저한 개선을 제공할 뿐만 아니라 연조직 손상을 치료하는 데 효과적이라는 임상 증거도 있습니다13,14. FSN 요법은 질환과 관련된 근본적인 근막 통증 유발점(MTrP)을 해결하기 위해 맞춤화된 특정 기술을 사용합니다. FSN 바늘 삽입 위치는 이러한 트리거 포인트의 위치에 따라 신중하게 선택되므로 해당 부위를 정확하게 타겟팅할 수 있습니다. 시술 중에 FSN 바늘을 피하층에 삽입하여 치료 효과를 최적화하기 위해 의도적으로 멈춥니다. 그런 다음 흔들리는 움직임으로 알려진 독특한 기술이 사용되는데, 이는 조직을 자극하고 치료 반응을 촉진하기 위해 바늘의 부드러운 진동 동작을 포함합니다10. MTrP의 발달은 만성 근육 과부하, 과도한 운동, 부적절한 운동 자세, 근육 위축 및 퇴행과 같은 요인이 근육 조직 허혈 및 저산소증의 발병에 기여할 수 있다고 설명하는 에너지 위기 이론과 관련이 있습니다. 근육 조직 내의 이러한 산소 및 에너지 결핍은 MTrPs15,16의 형성에 중요한 역할을 하는 것으로 여겨집니다. 이전의 동물 연구에서는 쥐의 만성 통증에 대한 FSN 치료가 TM에서 미토콘드리아의 형태학적 구조와 기능을 어느 정도 개선한다는 사실이 밝혀졌으며, 이는 손상된 신경과 근육의 회복을 촉진하는 FSN 요법의 잠재력을 입증했다17.
좌골신경통은 신경병증성 통증으로 분류된다18. 신경병증성 통증의 기원은 운동 종판과 근육의 외부 섬유층 사이 어딘가에 있는 것으로 생각되며, 세포 수준의 미세혈관계와 신경 전달 물질과 관련이 있습니다. 근육 신경 분포의 상실과 신경 세포의 세포 사멸은 신경 손상이 발생할 때 발생하며,19 영향을 받은 사지의 통증 관련 보행으로 이어진다. 또한 신경의 만성적인 압박이나 자극은 신경 기능에 다양한 변화를 일으킬 수 있으며, 이는 좌골신경통의 증상을 더욱 악화시킬 수 있다20. 그러나 신경계의 복잡성으로 인해 시험관 내에서 복제하기가 어렵기 때문에 이러한 연구를 위해 동물 모델을 사용해야 합니다. 신경병증성 통증 장애의 연구에서, 좌골 신경 결찰, 절개술, 또는 압박과 같은 직접적인 말초 신경 손상의 다양한 방법을 포함하는 모델 유기체가 일반적으로 사용된다21,22. Sprague-Dawley 쥐의 만성 수축 손상(CCI) 모델은 신경병증성 통증을 유발하는 데 사용되었습니다. 이 모델은 신경 압박 증후군 및 말초 신경병증과 같은 상태에서 볼 수 있는 압박 또는 포착을 모방하여 말초 신경의 외과적 수축을 통해 인간에서 관찰되는 신경 손상으로 인한 통증을 재현합니다.
본 연구에서는 만성 수축 손상 및 신경병증성 통증이 있는 쥐를 대상으로 FSN 요법과 저주파 전기요법(경피적 전기 신경 자극기, TENS)의 진통 효과를 평가했다. 마취는 신경 자극을 늦추거나 차단하고 시냅스 전달 및 신경 기능에 영향을 미치기 때문에23 동물은 모든 바늘 시술과 흔들리는 움직임 하에서 마취될 수 없다. 따라서 쥐의 불편함을 줄이기 위해 적절한 바늘 기술이 필요합니다. 쥐 CCI 모델을 확립하는 단계, 마취 없이 FSN으로 쥐를 치료한 방법, 실현 가능한 동물 행동 패턴 테스트 및 전기 생리학적 조사에 대해 자세히 설명합니다.
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동물 피험자와 관련된 모든 절차는 2022년 10월 대만 장화(111031)에 있는 Chang Bing Show Chwan Memorial Hospital의 IACUC(Institutional Animal Care and Use Committee)에서 승인되었습니다(그림 1).
1. 동물의 준비
2. 동물의 그룹화
3. CCI 랫트 모델 구축
참고: 쥐의 CCI 수술 모델은 1988년에 수행된 Bennett과 Xie에 따라 수정되었습니다25.
4. FSN 조작 관리
5. TENS 조작 관리
6. 동물행동시험을 실시하는 생리학적 측정
참고: 좌골 신경 기능 지수(SFI)30 은 신경 손상의 병리학 및 잠재적 치료를 연구하는 연구원들이 널리 사용하는 지수로, 부상당한 쥐의 영향을 받는 뒷발의 기하학적 구조를 반대쪽 발의 기하학적 구조와 비교하고 반대쪽 발과 비교하여 결정됩니다.
7. 전기생리학적 측정에 의한 신경생리학적 평가33
참고: 이 연구에서 전기생리학적 활동을 기록하기 위해 근전도를 사용했습니다. 복합 근육 활동 전위(CMAP)는 신경에 의해 공급되는 표적 근육의 근섬유가 활성화되어 발생합니다. CMAP 진폭 및 지연 시간을 조사합니다. CMAP 진폭은 기준선에서 음의 피크까지 측정됩니다. CMAP의 잠복기는 자극 적용과 복합 활동 전위의 시작 사이의 시간을 측정하여 결정되며, 이는 자극 부위와 기록 부위 사이의 거리에 의해 영향을 받습니다. 전기생리학은 쥐의 말초 신경 기능에 대한 객관적인 평가를 제공합니다.
8. 통계:
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SFI의 발자국과 결정
CCI 단독, CCI+FSN 및 CCI+TENS 그룹에서 SFI의 발달을 조사했습니다(그림 7). CCI 수술 7일차에 FSN 및 TENS 치료를 4회 시행한 결과, CCI+FSN(-15.85 ± 3.46) 및 CCI+TENS(-29.58 ± 9.19) 그룹의 SFI가 CCI 단독 그룹(-87.40 ± 14.22)에 비해 유의하게 개선되었습니다. CCI+FSN 그룹은 CCI+TENS 그룹에 비해 상당한 개선이 이루어졌습니다(그림 7A).
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이 연구는 쥐 CCI 모델에서 신경병증성 통증에 대한 FSN 치료의 효과를 관찰합니다. 이 연구는 FSN 또는 TENS 치료 후 치료 효과를 평가하기 위한 SFI 및 전기생리학적 검사에 대한 프로토콜을 제시합니다. 또한 비침습적 행동 검사 및 생리학적 측정을 사용하여 손상된 신경의 기능적 회복을 평가하는 방법을 보여줍니다. 그 결과, CCI로 인한 좌골신경통 후 FSN 치료는 TENS 치료보다 모든 예후 지표에서 유...
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저자들은 상충되는 이해 상충이 존재하지 않는다고 선언합니다.
이 연구는 대만 장화에 있는 Chang Bing Show Chwan Memorial Hospital의 동물 센터의 보조금으로 지원되었습니다. 저자들은 이 연구 프로젝트 전반에 걸쳐 귀중한 지원과 도움을 준 Show Chwan Memorial Hospital IRCAD TAIWAN에 감사의 뜻을 전합니다.
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Name | Company | Catalog Number | Comments |
Forceps | World Precision Instruments | 14098 | |
Fu’s subcutaneous needling | Nanjing Paifu Medical Science and Technology Co. | FSN needles are designed for single use. The FSN needle is made up of three parts: a solid steel needle core (bottom), a soft casing pipe (middle), and a protecting sheath (top). | |
Medelec Synergy electromyography | Oxford Instrument Medical Ltd. | 034W003 | Electromyogram (EMG) are used to help in the diagnosis and management of disorders such as neuropathies. Contains a portable two-channel electromyography/nerve conduction velocity system. |
Normal saline (0.9%) 20 mL | Taiwan Biotech Co.,Ltd. | 4711916010323 | Lot: 1TKB2022 |
POLYSORB 4-0 VIOLET 30" CV-25 | UNITED STATES SURGICAL, A DIVISION OF TYCO HEALTHC | GL-181 | |
Retractor | COOPERSURGICAL, INC.(USA) | 3311-8G | |
Rompun | Elanco Animal Health Korea Co. Ltd. | 27668 | |
SCISSORS CVD 90MM | BBRUAN | XG-LBB-BC101R | |
Transcutaneous Electrical Nerve Stimulation | Well-Life Healthcare Co. | Model Number 2205A | Digital unit which offers TENS. Supplied complete with patient leads, self-adhesive electrodes, 3 AAA batteries and instructions in a soft carry bag. Interval ON time 1–30 s. Interval OFF time 1–30 s. |
Zoletil | VIRRBAC | 8V8HA |
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