저자 게 아무 승인 있다.

모든 절차는 동물 관리 위원회의 Huazhong 대학의 과학 및 기술 (중국 우한)에 Tongji 의학 대학 위원회에 의해 승인 되었다. 원고는 도착에 따르면 준비 했다 (동물 연구: Vivo에서 실험의 보고) 지침6.
1입니다. 축산
<ol><li>Sprague-Dawley (SD) 쥐를 사용 하 여 (n = 20, 10 남성 8 주 오래 된, 261 291 g 무게 의미 = 272.85 ±9.07 g) 소의 실험 동물 센터 과학 기술 대학에서 관리 및 활용에 대 한 가이드에 따라 쥐를 유지 하 고 실험실 동물은 미국 국립 보건원 (NIH 간행물 링 돤 85 호-23, 개정 1996)에 의해 게시</li>
	<li>식품 및 식 수와 표준 조건 하에서 집. 계속 쥐 나무-면도 530 cm2 장에 침구. 각 감 금 소에 두 쥐 집. (마이크로 격리 또는 통풍이 caging) 룸 환경에 모든 새 장 열어</li>
	<li>실험 프로토콜에 관련 된 직원은 정기적으로 쥐를 처리할 확인 하십시오.</li>
	<li>21 ° C와 23 ° C 사이 실내 온도 유지 요금 일반 소금 다이어트 줄 (0.3 %NaCl) 연구를 통해.</li>
</ol>2. 혈액 수집 절차
참고: 진공 혈액 수집 시스템 및 구성 됩니다 이중 지적 바늘 [22 G (0.7 m m x 25 m m)], 플라스틱 홀더, 고무 마 개 (그림 1)와 진공 튜브 (2 mL)의 시리즈.
<ol><li>플라스틱 금지 홀더에 쥐를 놓고 어떤 보이는 흙 이나 배설물을 제거 하려면 따뜻한 (20-30 ° C) 물으로 꼬리를 세척 합니다. 보조 확장된 위치에 꼬리를 보유 하면서 70% 에탄올, 꼬리를 닦 고 취소 정 맥을 거 즈로 청소.</li>
	<li>위치에서 측면 꼬리 정 맥 (약 5mm) 중 하나에 22 G 나비 바늘 팁을 삽입 (그림 2) 약 20 °의 각도에서 꼬리의 끝에서 약 2-3 cm. 진공 혈액 컬렉션 튜브 (그림 3)에 나비 바늘의 고무 끝을 삽입 하 여 진공 컬렉션 튜브에 혈액을 수집 합니다. 참고: 최대 컬렉션 혈액 볼륨 1.2 mL7입니다.</li>
	<li>혈액 수집 후 바늘을 제거 하 고 부드럽게 혈액의 흐름을 중지 하려면 15-30 s 거 즈와 펑크 사이트에 압력을 적용 합니다. 그런 다음, 플라스틱 금지 홀더에서 쥐를 놓고 그것의 감 금 소에는 쥐를 반환.</li>
	<li>항 응고 제를 수집 혈장으로 EDTA를 포함 하는 튜브를 사용 합니다. 부드럽게 반전 튜브 여러 번 혈액 응고 제를 혼합 하 여 얼음 샘플을 수직으로 배치.</li>
	<li>혈액 샘플 컬렉션 튜브 플라스마 또는 혈 청을 10 분 2000 x g에서 냉장된 원심 분리기에 원심</li>
	<li>혈장/혈 청, 빨간색과 흰색 혈액 세포 층을 방해 하지 않도록 주의 복용의 압축을 풉니다. 혈액 혈 청 수집, 응고 제 없이 튜브를 사용 합니다. 두 가지 유형의 샘플 즉시 사용할 하거나 최대 1 년-80 ° C에 저장 될 수 있습니다. 참고: 성공적인 혈액 컬렉션 때마다 1.2 mL 혈액을 얻기로 정의 했다. 최대 펑크 시간 설정 3 재판에 전체 혈액 볼륨 세 번째 찔린 후 1.2 mL 보다 낮은 경우 정의 된 실패 한 혈액 컬렉션으로. 샘플링 기간 꼬리 정 맥 빵 꾸에서 혈 후 나비 바늘의 제거를 시작합니다.</li>
	<li>
2 주7이내 두 번 피를 수집 합니다.
	<ol>
<li>테스트 하 고이 방법의 타당성을 확인,이 혈액 컬렉션 프로토콜을 수행 하기 전에 두 학생 (초보자) 2 h에 대 한 훈련. 20 쥐를 사용 하 고 2 경험 있는 사람들 (실험 그룹)에 의해 10 쥐에서 그리고 2 의료 학생 들 (초급 그룹) 10 쥐에서 혈액을 그립니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. 통계 분석
<ol><li>평균값이 ± 표준 편차로 데이터 및 SPSS 통계 17 분석. Α 값이 0.05 선정 되었다, 따라서 p < 0.05 통계적으로 중요 하 게 고려 되었다.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Brown, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+collection+from+the+tail+of+a+rat.">Blood collection from the tail of a rat.</a> Lab Anim (NY). 35 (8), 24-25 (2006).</li><li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Staszyk, C., Bohnet, W., Gasse, H., Hackbarth, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+vessels+of+the+rat+tail:+a+histological+re-examination+with+respect+to+blood+vessel+puncture+methods.">Blood vessels of the rat tail: a histological re-examination with respect to blood vessel puncture methods.</a> Lab Anim. 37 (2), 121-125 (2003).</li><li>Lee, G., Goosens, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sampling+blood+from+the+lateral+tail+vein+of+the+rat.">Sampling blood from the lateral tail vein of the rat.</a> J. Vis. Exp. (99), (2015).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> WHO Guidelines on Drawing Blood: Best Practices in Phlebotomy WHO Guidelines Approved by the Guidelines Review Committee. , (2010).</li><li>Kilkenny, C., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+bioscience+research+reporting:+ARRIVE-ing+at+a+solution.">Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution.</a> Lab Anim. 44 (4), 377-378 (2010).</li><li>Diehl, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+good+practice+guide+to+the+administration+of+substances+and+removal+of+blood,+including+routes+and+volumes.">A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes.</a> J Appl Toxicol. 21 (1), 15-23 (2001).</li><li>Eder, J. M., Cutter, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+device+for+collecting+cord+blood.">A new device for collecting cord blood.</a> Obstet Gynecol. 86 (5), 850-852 (1995).</li><li>Reynolds, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+a+new+device+for+blood+sampling+in+cats+with+a+vacuum+tube+collection+system+-+plasma+biochemistry,+haematology+and+practical+usage+assessment.">Comparison of a new device for blood sampling in cats with a vacuum tube collection system - plasma biochemistry, haematology and practical usage assessment.</a> J Feline Med Surg. 9 (5), 382-386 (2007).</li><li>Wiwanitkit, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+blood+specimens+from+plain+and+gel+vacuum+blood+collection+tubes.">Comparison of blood specimens from plain and gel vacuum blood collection tubes.</a> J Med Assoc Thai. 84 (5), 723-726 (2001).</li><li>Wollowitz, A., Bijur, P. E., Esses, D., John Gallagher, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+butterfly+needles+to+draw+blood+is+independently+associated+with+marked+reduction+in+hemolysis+compared+to+intravenous+catheter.">Use of butterfly needles to draw blood is independently associated with marked reduction in hemolysis compared to intravenous catheter.</a> Acad Emerg Med. 20 (11), 1151-1155 (2013).</li></ol>

저자 공개할 게 없다

현재 보고서 쥐에서 배우기 쉬운 혈액 수집 방법을 설명합니다. 우리의 결과이 방법은 쥐에서 반복적으로 많은 양의 혈액을 수집에 대 한 가능을 보여주었다. 또한,이 방법은 단기 학습 곡선와 함께 쉽게 마스터 수 수 있습니다. 이 절차는 비 취 쥐에서 수행할 수 있습니다 고만 동물에 되도록 최소한의 스트레스.
혈액은 다양 한 위치에서 쥐에서 수집할 수 있습니다. 꼬리 정 맥 혈액 샘플링4우수한 위치 이다. 그러나, 그것은 항상 쉽지 않다를 쥐의 얇고 낮은 혈액 흐름 꼬리 정 맥에서 충분 한 혈액 볼륨. 진공 혈액 수집 시스템으로 매일 임상 연습에 있는 환자에서 혈액 샘플을 수집 하기 위해 사용 됩니다. 이 진공 혈액 수집 시스템은 오랜 시간8,,910에 대 한 환자와 연구 동물에서 사용 되었습니다. 실리콘 코팅된 내부 관 벽과 나비 바늘 진공 혈액 컬렉션 튜브가이 시스템에 의하여 이루어져 있었다. 그것은 진공 부정 압력 원리에 근거 했다 하 고 또한 오염 및 용 혈11의 기회를 감소 시키는 혈액 수집의 위험 없이 혈액의 연속 그림을 수 있습니다. 카 테 터에서 혈액 샘플의 볼륨은 약 0.3 mL. 꼬리 정 맥에서 바늘을 철수, 후 카 테 터에 차단 혈액 수집 진공 튜브 진공 때문에 흐름 것입니다. 이 메서드는 또한 작은 바늘 바늘의 사용 미만 100 g 무게 쥐에서 혈액을 수집 적용 됩니다.
이 혈액 수집 방법에는 여러 가지 장점이 있습니다. 이 절차만 되도록 최소한의 부상 쥐 혈 마 취약의 사용 없이 실행 될 수 있다, 따라서 혈액 샘플에는 스트레스 반응 및 마 취약의 영향을 피할 수 있습니다. 우리의 관측 보여주었다 쥐 절차 동안에 플라스틱 금지 홀더 조용 했다 고이 실험 동안 아무 죽음이 있었다. 둘째, 모든 하나는 혈액 컬렉션을 반복 또는 이틀 가능, 다양 한 연구 목적에 대 한 적절 한 볼륨으로 혈액의 자주 샘플링 수 있습니다. 마지막으로,이 메서드는 쉽게 배울 수 이며 쉽게 지배 되었다 초보자가 짧은 (2 시간) 학습 기간 후,이 보고서에서 실험 및 초급 그룹 사이 펑크 시간과 비슷한 성공률에 표시 된 대로. 이전 보고서에서 리 외. 쥐4의 측면 꼬리 정 맥에서 혈액 샘플링의 유사한 방법 설명. 우리의 방법은 보고 리 외 보다 간단 4 우리가 직접 삽입 바늘 바늘 꼬리 정 맥 그리고 튜브의 다른 쪽 끝에 직접 연결 되어 여분의 주사기의 사용과 혈액의 수동 포부 없이 고의 필요 없이 혈액을 수집 하기 위한 진공 튜브 ' 우유 ing' 혈액 흐름을 촉진 하기 위하여 정 맥. 이 닫힌 시스템 피를 수집 혈액 오염의 위험을 줄여줍니다. 플라스틱 금지 소유자의 사용 또한 쥐에는 스트레스를 감소 하 고 꼬리의 고정을 용이 하 게.
다음 두 단계는이 방법의 성공적인 응용 프로그램에 대 한 중요 합니다. 1) 꼬리 고 꼬리;의 움직임을 방지 2) 천천히 정 맥을 정 맥을 통해 펑크를 피하기 위해 정 맥에 바늘 바늘을 계속 20 °의 각도에서 찔린 합니다.
결론적으로, 쥐에서 채택 된 진공 혈액 수집 방법, 가능 하 고, 안전 하 고 쉽게 연습입니다. 이 메서드는 적절 한 혈액 볼륨 비 취 쥐에서 얻은 혈액의 자주 샘플링을 수 있습니다.

쥐에서 혈액 샘플링은 다양 한 실험 연구에 대 한 필요 합니다. 쥐에서 혈액 컬렉션에 대 한 기술은 펑크는 심장의, 복고풍 궤도 총, 경 정 맥, saphenous 정 맥, 꼬리 혈관, 경 동맥, 복 부 대동맥, 베 나 정 맥을 포함 한다. 대부분 기술 (제외 saphenous 정 맥 및 꼬리 혈관 빵 꾸) 마 취1,2필요합니다. 쥐 꼬리의 혈관은 정기적으로 혈액 샘플링 및 혈관 주입 구멍을. 따뜻한 물으로 꼬리, 치료 후 혈관 쥐 마 취3경우에 잘 열려진 조작에 적합 하 고 있습니다.
작은 실험실 동물2에서 혈액 샘플을 얻기 위해 새롭고 향상 된 기술 개발에도 불구 하 고 그것은 항상 쉽게 작은 동물에서 샘플링 하는 경우 충분 한 혈액을 얻을. 쥐의 꼬리 정 맥 혈액 샘플링4우수한 위치 이다. 그러나, 꼬리 정 맥은 얇은, 따라서 가끔 펑크 하드 이며 그것의 낮은 혈액 흐름으로 인해 충분 한 혈액을 얻을 하는 데 시간이 오래 걸릴 것 이라고. 혈액 컬렉션 튜브 진공 추출 시스템을 통해 매일 임상 연습에서 전형적인 방법은. 이 닫힌된 시스템 피 수집에 대 한 혈액에 직접 노출의 위험을 감소 하 고 단일 venipuncture5에서 여러 개의 샘플을 쉽게 했다. 현재 보고서에는 비 취 쥐 진공 추출 튜브 시스템을 사용 하 여 간단한 꼬리 정 맥 혈액 샘플링 방법을 설명 합니다. 이 방법은 쉽게 마스터 하 고 쥐에서 반복적으로 혈액의 큰 볼륨을 가져오는 데 사용할 수 있습니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="634">
	<tbody>
		<tr height="71">
			<td height="71" style="height:71px;width:192px;">a double-pointed needle</td>
			<td style="width:244px;">Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China</td>
			<td style="width:120px;">22G&#160;</td>
			<td style="width:79px;">(0.7&#215;25mm)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:192px;">vacuum tubes</td>
			<td style="width:244px;">Wuhan Zhi Yuan, medical science and technology co., LTD, China</td>
			<td style="width:120px;">2 ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:192px;">rat restraining holder&#160;</td>
			<td style="width:244px;">Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China</td>
			<td style="width:120px;">250g rat hoder model</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="140">
			<td height="140" style="height:140px;width:192px;">normal salt diet for rats</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td style="width:79px;">Rats received a normal salt diet (0.3% NaCl) throughout the study</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:192px;">SPSS software for statistical analysis</td>
			<td>SPSS Inc,&#160; Chicago; USA&#160;</td>
			<td style="width:120px;">Version 17.0.&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

repeated blood collection from tail vein of non-anesthetized rats with a vacuum blood collection system

혈액은 샘플링 위치 수에 쥐에서 수집할 수 있습니다. 예를 들어, 꼬리 정 맥 혈액 샘플링에 대 한 우수한 위치 이다. 그러나, 꼬리 정 맥은 얇은 펑크 때로는 어렵다. 또한, 꼬리 정 맥 낮은 혈액 흐름이 고 충분 한 혈액을 얻을 수 있는 긴 샘플링 시간을 요구 한다. 현재 보고서는 간단한 혈액 샘플링 방법을, 여기 쥐 비 취를 위해 사용 하는 환자에서 혈액 샘플을 얻기 위해 일반적으로 사용 되는 진공 혈액 수집 방법에 설명 합니다. 22 G 나비 바늘 팁 하나 약 20 °, 그리고 혈액의 각도에서 꼬리의 끝에서 약 2-3 cm는 버지니아에 나비 바늘의 고무 끝을 삽입 하 여 진공 컬렉션 튜브에 수집 된 측면 꼬리 정 맥에 삽입 된 cuum 혈액 컬렉션 튜브입니다. 현재 실험 결과 성공률은 실험적인 그룹에서 95%와 90% 초급 그룹에 표시 됩니다. 성공 속도 펑크 번 두 그룹 사이 유사 했다. 샘플링 기간 실험 그룹 초급 그룹에 비해 상당히 짧은 했다. 결론적으로, 비-마 취 쥐의 꼬리 정 맥에서 혈액을 순차적 샘플링에 대 한이 진공 혈액 수집 방법 이며 가능한 쉽게 배우기, 하 수도 역할을 통상 혈액 샘플링 기법을 사용 하는 다른 신뢰할 수 있는 대안 쥐입니다.

샘플링 기간, 몸 질량, 및 두 그룹의 혈액 컬렉션 볼륨 혈액은 각 그룹에서 2 주 이내에 두 번 10 쥐 (5 남성)에서 수집 되었다. 두 그룹의 평균 몸 질량 유사 했다 (272.00 ±9.66 g와 273.70 ±8.87 g). 실험 그룹 초급 그룹에 비해 상당히 짧은 했다 샘플링 기간 (3.28 ±0.83 분, p 대 2.77 ±0.53 분 < 0.05) (표 1).
성공 속도 두 그룹의 펑크 성공률은 실험적인 그룹에서 95% (19/20) 및 초보자 그룹에서 90% (18/20) (p > 0.05). 펑크 시간 두 그룹 사이 크게 다른 되지 않았습니다 (1.50 ±0.61 분 대 1.85 ± 0.75 분, p > 0.05) (표 2). 이 결과이 방법은 쉽게 배울 수 이며 기술 2 h에 대 한 훈련 후 마스터 수 나타냅니다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig1.jpg"> 그림 1 : 2 mL 진공 혈액 컬렉션 튜브 (왼쪽), 22 G 나비 바늘 (센터), 플라스틱 금지 홀더 (오른쪽). <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig2.jpg"> 그림 2 : 바늘 팁 측면 꼬리 정 맥 (약 5 m m)에 위치에서 삽입 된 대략 20 °의 각도에서 꼬리의 끝에서 약 2-3 cm. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig3.jpg"> 그림 3 : 성공적인 venipuncture. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td colspan="5">실험 그룹</td>
			<td></td>
			<td colspan="5">초급 그룹</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>성별</td>
			<td>몸 무게 (g)</td>
			<td>수집 된 혈액 양 (mL)</td>
			<td>샘플링 기간 (분)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>성별</td>
			<td>몸 무게 (g)</td>
			<td>수집 된 혈액 양 (mL)</td>
			<td>샘플링 기간 (분)</td>
		</tr>
<tr>
<td>E1-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>291</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.12</td>
			<td></td>
			<td>B1-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>282</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.18</td>
		</tr>
<tr>
<td>E1-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>291</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.73</td>
			<td></td>
			<td>B1-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>282</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.18</td>
		</tr>
<tr>
<td>E2-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>276</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.3</td>
			<td></td>
			<td>B2-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>264</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.73</td>
		</tr>
<tr>
<td>E2-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>276</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.37</td>
			<td></td>
			<td>B2-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>264</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.47</td>
		</tr>
<tr>
<td>E3-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>267</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.73</td>
			<td></td>
			<td>B 3-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.52</td>
		</tr>
<tr>
<td>E3-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>267</td>
			<td>1.0</td>
			<td>3.88</td>
			<td></td>
			<td>B3-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.53</td>
		</tr>
<tr>
<td>E4-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>263</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.41</td>
			<td></td>
			<td>B4-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>289</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.32</td>
		</tr>
<tr>
<td>E4-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>263</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.52</td>
			<td></td>
			<td>B4-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>289</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.62</td>
		</tr>
<tr>
<td>E5-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.61</td>
			<td></td>
			<td>B5-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>277</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.48</td>
		</tr>
<tr>
<td>E5-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.42</td>
			<td></td>
			<td>B5-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>277</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.12</td>
		</tr>
<tr>
<td>E6-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>285</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.33</td>
			<td></td>
			<td>B6-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>274</td>
			<td>0.9</td>
			<td>4.87</td>
		</tr>
<tr>
<td>E6-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>285</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.03</td>
			<td></td>
			<td>B 6-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>274</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.37</td>
		</tr>
<tr>
<td>E7-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>271</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.82</td>
			<td></td>
			<td>B7-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>268</td>
			<td>1.0</td>
			<td>3.93</td>
		</tr>
<tr>
<td>E7-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>271</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.42</td>
			<td></td>
			<td>B7-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.82</td>
		</tr>
<tr>
<td>E8-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>1.93</td>
			<td></td>
			<td>B8-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>262</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.07</td>
		</tr>
<tr>
<td>E8-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.05</td>
			<td></td>
			<td>B8-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>262</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.67</td>
		</tr>
<tr>
<td>E9-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>273</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.52</td>
			<td></td>
			<td>B9-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>281</td>
			<td>1.2</td>
			<td>4.38</td>
		</tr>
<tr>
<td>E9-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>273</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.17</td>
			<td></td>
			<td>B9-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>281</td>
			<td>1.2</td>
			<td>4.57</td>
		</tr>
<tr>
<td>E 10-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>261</td>
			<td>1.2</td>
			<td>1.82</td>
			<td></td>
			<td>B10-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>275</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.53</td>
		</tr>
<tr>
<td>E10-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>261</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.25</td>
			<td></td>
			<td>B10-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>275</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.28</td>
		</tr>
<tr>
<td>평균</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>2.77</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>3.28</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">엉-1: 첫 번째 혈액 컬렉션에 대 한 실험적인 그룹에 있는 쥐의 일련 번호입니다.</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">엉-2: 두 번째 혈액 컬렉션에 대 한 실험적인 그룹에 있는 쥐의 일련 번호입니다.</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">Bn-1: 첫 번째 혈액 컬렉션에 대 한 초보자 그룹에서 쥐의 일련 번호입니다.</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">Bn-2: 두 번째 혈액 컬렉션에 대 한 초보자 그룹에서 쥐의 일련 번호입니다.</td>
		</tr>
</tbody></table>표 1: 혈액의 결과 실험적인 그룹 초급 그룹에 수집.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td>혈액 컬렉션 시간</td>
			<td>평균 펑크 시간</td>
			<td>한 번 빵 꾸</td>
			<td>두 번 펑크</td>
			<td>세 번 펑크</td>
			<td>실패</td>
			<td>성공률</td>
		</tr>
<tr>
<td>실험 그룹</td>
			<td>20</td>
			<td>1.50 ±0.61</td>
			<td>11</td>
			<td>8</td>
			<td>0</td>
			<td>1</td>
			<td>95%</td>
		</tr>
<tr>
<td>초급 그룹</td>
			<td>20</td>
			<td>1.85 ± 0.75</td>
			<td>7</td>
			<td>9</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
			<td>90%</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">한 번 빵 꾸: 첫 번째 찔린 후 성공적인 혈액 컬렉션 쥐의 수</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">두 번 펑크: 성공적인 혈액 컬렉션 두 번째 펑크 후 쥐의 수</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">세 번 펑크: 성공적인 혈액 컬렉션 3 찔린 후 쥐의 수</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="5">실패: 실패 한 혈 세 번째 찔린 후 쥐와 수</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
</tbody></table>표 2: 펑크 시간과 초보자 그룹과 실험 그룹의 성공률의 비교.

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Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

여기, 비 취 쥐 진공 추출 튜브 시스템을 사용 하 여 간단한 꼬리 정 맥 혈액 샘플링 방법을 설명 합니다. 이 방법은 혈액에 직접 노출의 위험을 감소 하 고 단일 venipuncture에서 여러 샘플을 채 취하고 단순화 합니다.

진공 혈액 수집 시스템으로 비 취 쥐의 꼬리 정 맥에서 혈액 컬렉션 반복

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

35.4K 조회수.  Jianghan University. 여기, 비 취 쥐 진공 추출 튜브 시스템을 사용 하 여 간단한 꼬리 정 맥 혈액 샘플링 방법을 설명 합니다. 이 방법은 혈액에 직접 노출의 위험을 감소 하 고 단일 venipuncture에서 여러 샘플을 채 취하고 단순화 합니다.

비디오: Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

Collection Protocol for Human Pancreas

This dissection and sampling procedure was developed for the Network for Pancreatic Organ Donors with Diabetes (nPOD) program to standardize preparation of pancreas recovered from cadaveric organ donors. The pancreas is divided into 3 main regions (head, body, tail) followed by serial transverse sections throughout the medial to lateral axis. Alternating sections are used for fixed paraffin and fresh frozen blocks and remnant samples are minced for snap frozen sample preparations, either with or without RNAse inhibitors, for DNA, RNA, or protein isolation. The overall goal of the pancreas dissection procedure is to sample the entire pancreas while maintaining anatomical orientation.
Endocrine cell heterogeneity in terms of islet composition, size, and numbers is reported for human islets compared to rodent islets 1. The majority of human islets from the pancreas head, body and tail regions are composed of insulin-containing &beta;-cells followed by lower proportions of glucagon-containing &alpha;-cells and somatostatin-containing &delta;-cells. Pancreatic polypeptide-containing PP cells and ghrelin-containing epsilon cells are also present but in small numbers. In contrast, the uncinate region contains islets that are primarily composed of pancreatic polypeptide-containing PP cells 2. These regional islet variations arise from developmental differences. The pancreas develops from the ventral and dorsal pancreatic buds in the foregut and after rotation of the stomach and duodenum, the ventral lobe moves and fuses with the dorsal 3. The ventral lobe forms the posterior portion of the head including the uncinate process while the dorsal lobe gives rise to the rest of the organ. Regional pancreatic variation is also reported with the tail region having higher islet density compared to other regions and the dorsal lobe-derived components undergoing selective atrophy in type 1 diabetes4,5.
Additional organs and tissues are often recovered from the organ donors and include pancreatic lymph nodes, spleen and non-pancreatic lymph nodes. These samples are recovered with similar formats as for the pancreas with the addition of isolation of cryopreserved cells. When the proximal duodenum is included with the pancreas, duodenal mucosa may be collected for paraffin and frozen blocks and minced snap frozen preparations.

This video demonstrates a dissection procedure for processing human pancreas into multiple storage formats. Anatomical orientation is maintained throughout the pancreatic regions to allow definition of regional islet composition and density.

인간의 췌장을위한 컬렉션 프로토콜

This dissection and sampling procedure was developed for the Network for Pancreatic Organ Donors with Diabetes (nPOD) program to standardize preparation ...

연구

의학

Dried Blood Spot Collection of Health Biomarkers to Maximize Participation in Population Studies

Biomarkers are directly-measured biological indicators of disease, health, exposures, or other biological information. In population and social sciences, biomarkers need to be easy to obtain, transport, and analyze. Dried Blood Spots meet this need, and can be collected in the field with high response rates. These elements are particularly important in longitudinal study designs including interventions where attrition is critical to avoid, and high response rates improve the interpretation of results. Dried Blood Spot sample collection is simple, quick, relatively painless, less invasive then venipuncture, and requires minimal field storage requirements (i.e.&#160;samples do not need to be immediately frozen and can be stored for a long period of time in a stable freezer environment before assay). The samples can be analyzed for a variety of different analytes, including cholesterol, C-reactive protein, glycosylated hemoglobin, numerous cytokines, and other analytes, as well as provide genetic material. DBS collection is depicted as employed in several recent studies.

Biomarkers are directly-measured biological indicators of disease or health. In population and social sciences, biomarkers need to be easy to obtain, transport, and analyze. Dried Blood Spot (DBS) collection meets this need, can be collected in the field with high response rates&#160;and analyzed for a variety of biomarkers.

건강 바이오 마커의 혈액 스팟 컬렉션 인구 연구에의 참여를 극대화하기 위해 건조

Biomarkers are directly-measured biological indicators of disease, health, exposures, or other biological information. In population and social sciences, ...

Collection, Isolation, and Flow Cytometric Analysis of Human Endocervical Samples

Despite the public health importance of mucosal pathogens (including HIV), relatively little is known about mucosal immunity, particularly at the female genital tract (FGT). Because heterosexual transmission now represents the dominant mechanism of HIV transmission, and given the continual spread of sexually transmitted infections (STIs), it is critical to understand the interplay between host and pathogen at the genital mucosa. The substantial gaps in knowledge around FGT immunity are partially due to the difficulty in successfully collecting and processing mucosal samples. In order to facilitate studies with sufficient sample size, collection techniques must be minimally invasive and efficient. To this end, a protocol for the collection of cervical cytobrush samples and subsequent isolation of cervical mononuclear cells (CMC) has been optimized. Using ex vivo flow cytometry-based immunophenotyping, it is possible to accurately and reliably quantify CMC lymphocyte/monocyte population frequencies and phenotypes. This technique can be coupled with the collection of cervical-vaginal lavage (CVL), which contains soluble immune mediators including cytokines, chemokines and anti-proteases, all of which can be used to determine the anti- or pro-inflammatory environment in the vagina.

The use of cytobrush sampling to collect lymphocytes and monocytes from the endocervix is a minimally invasive technique that provides samples for analysis of female genital tract immunity. In this protocol, we describe the collection of cytobrush samples and immune cell isolation for flow cytometry assays.

컬렉션, 격리, 인간 자궁 경부 샘플의 유세포 분석

Despite the public health importance of mucosal pathogens (including HIV), relatively little is known about mucosal immunity, particularly at the female ...

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic stroke. However, the use of tPA is limited by its narrow therapeutic window and by increased risk of hemorrhagic transformation. There is an urgent need to develop suitable stroke models to study new thrombolytic agents and strategies for treatment of ischemic stroke. At present, two major types of ischemic stroke models have been developed in rats and mice: intraluminal suture MCAO and embolic MCAO. Although MCAO models via the intraluminal suture technique have been widely used in mechanism-driven stroke research, these suture models do not mimic the clinical situation and are not suitable for thrombolytic studies. Among these models, the embolic MCAO model closely mimics human ischemic stroke and is suitable for preclinical investigation of thrombolytic therapy. This embolic model was first developed in rats by Overgaard et al.1 in 1992 and further characterized by Zhang et al. in 19972. Although embolic MCAO has gained increasing attention, there are technical problems faced by many laboratories. To meet increasing needs for thrombolytic research, we present a highly reproducible model of embolic MCAO in the rat, which can develop a predictable infarct volume within the MCA territory. In brief, a modified PE-50 tube is gently advanced from the external carotid artery (ECA) into the lumen of the internal carotid artery (ICA) until the tip of the catheter reaches the origin of the MCA. Through the catheter, a single homologous blood clot is placed at the origin of the MCA. To identify the success of MCA occlusion, regional cerebral blood flow was monitored, neurological deficits and infarct volumes were measured. The techniques presented in this paper should help investigators to overcome technical problems for establishing this model for stroke research.

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

In this paper, we demonstrate a standard method for producing an embolic middle cerebral artery occlusion with homologous blood clots (fibrin-rich) in adult rat. This model closely mimics human ischemic stroke and is suitable for preclinical study of thrombolytic therapy for ischemic stroke.

흰쥐의 동종 혈액 혈전과 허혈성 뇌졸중에 대한 전성 중간 대뇌 동맥 폐색 (MCAO)

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic ...

Routine Screening Method for Microparticles in Platelet Transfusions

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood banks. Cells fragment off microparticles (MP) when they are stressed. Blood and blood components may contain cellular fragments from a variety of cells, most notably from activated platelets. When performing their roles as innate immune cells and major players in coagulation and hemostasis, platelets change shape and generate microparticles. With dynamic light scattering (DLS)-based microparticle detection, it is possible to differentiate activated (high microparticle) from non-activated (low microparticle) platelets in transfusions, and optimize the use of this scarce blood product. Previous research suggests that providing non-activated platelets for prophylactic use in hematology-oncology patients could reduce their risk of becoming refractory and improve patient care. The goal of this screening method is to routinely differentiate activated from non-activated platelets. The method described here outlines the steps to be performed for routine platelet inventory management in a hospital blood bank: obtaining a sample from a platelet transfusion, loading the sample into the capillary for DLS measurement, performing the DLS test to identify microparticles, and using the reported microparticle content to identify activated platelets.

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative in hospital blood banks. The goal is to differentiate activated from non-activated platelets to optimize the use of platelets. Providing non-activated platelets to hematology-oncology patients might reduce their high risk to become refractory.

혈소판 수혈에 미에 대 한 메서드를 검사 하는 루틴

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood ...

Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful compared to other more aggressive methods such as retro-orbital plexus sample collection. However, this blood collection method is sometimes limited by an unsatisfactory success rate. Here, we introduce a method for blood collection through the subclavian vein puncture. The subclavian vein is located just under the clavicle and this vein is large enough to fulfill the volume requirements of blood collection. Our results show that this method is safe and applicable for blood collection sampling with the required blood volume. Blood collection through the subclavian vein puncture could serve as an alternative blood collection method in case of failed tail vein blood sampling in rats.

Here, we present a protocol to collect blood samples from the rat subclavian vein.

쥐에서 혈액 샘플 컬렉션의 대체 방법으로 빵 꾸 하 정 맥

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful ...

Simultaneous Electrocardiography Recording and Invasive Blood Pressure Measurement in Rats

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. Research focusing on cardiovascular disease models, potential cardiovascular therapeutic targets or pharmaceutical agents requires assessment of systemic arterial pressure and heart rhythm changes. In situations where radio telemetry systems are not available or affordable, the technique of femoral artery cannulation is an alternative way to obtain intra-arterial pressure waveform recordings and systemic BP measurements. This technique is economical and can be performed with standard equipment in animal facilities. However, invasive arterial pressure recording requires cannulation of small arteries, which can be a challenging surgical skill. Here, we present step-by-step protocols for femoral artery cannulation procedures. Key procedures include the calibration of the data acquisition system, tissue dissection and femoral artery cannulation, and setup of the arterial cannulation system for pressure recording. Surface electrocardiography recording procedures are also included. We also present examples of BP recordings from normotensive and hypertensive rats. This protocol allows reliable direct recordings of systemic BP with simultaneous electrocardiography.

Here, we describe a setup for simultaneous recording of electrocardiography and intra-arterial blood pressure (BP) in experimental rats, which can be done with standard equipment in animal facilities and can be applied to physiological or pharmacological studies to investigate pathogenic or therapeutic mechanisms in cardiovascular medicine.

동시 심전도 기록 및 침략 적 혈액 압력 측정 쥐에

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. ...

A New Best Practice for Validating Tail Vein Injections in Rat with Near-infrared-Labeled Agents

Intravenous (IV) administration of agents into the tail vein of rats can be both difficult and inconsistent. Optimizing tail vein injections is a key part of many experimental procedures where reagents need to be introduced directly into the bloodstream. Unwittingly, the injection can be subcutaneous, possibly altering the scientific outcomes. Utilizing a nanoemulsion-based biological probe with an incorporated near-infrared fluorescent (NIRF) dye, this method offers the capability of imaging a successful tail vein injection in vivo. With the use of a NIRF imager, images are taken before and after the injection of the agent. An acceptable IV injection is then qualitatively or quantitatively determined based on the intensity of the NIRF signal at the site of injection.

Here we present a method to validate tail vein injections in rats by utilizing near-infrared fluorescence imaging data from dyes incorporated into agents or biological probes. The tail is imaged before and after the injection, the fluorescent signal is quantified, and an assessment of the injection quality is made.

근처-적외선-표시 에이전트와 쥐의 꼬리 정 맥 주사의 유효성 검사에 대 한 새로운 좋습니다

Intravenous (IV) administration of agents into the tail vein of rats can be both difficult and inconsistent. Optimizing tail vein injections is a key part ...

Blood Collection Through Subclavian Vein Puncture in Mice

The mouse is the foremost mammalian model for studying human disease and human health. However, blood sample collection from mice is challenging in research work. Tail blood collection is a popular method when a small amount of blood sample is needed. Orbital artery could be considered if a large amount of blood is needed but this blood collection method has ethical issues. Formerly, we demonstrated the feasibility and safety of blood sample collection through subclavian vein puncture in rats, and here we investigate whether this method could be used in mice. We report that this method is safe and practical for blood collection in mice. Blood collection through the subclavian vein puncture in mice can be a convenient method in daily research works.

Here, we present a protocol to take blood samples from the subclavian vein of mice.

생쥐의 쇄 골 정 맥 천자를 통한 혈액 채취

The mouse is the foremost mammalian model for studying human disease and human health. However, blood sample collection from mice is challenging in ...

Simultaneous Flow Cytometric Characterization of Multiple Cell Types Retrieved from Mouse Brain/Spinal Cord Through Different Homogenization Methods

Recent advances in viral vector and nanomaterial sciences have opened the way for new cutting-edge approaches to investigate or manipulate the central nervous system (CNS). However, further optimization of these technologies would benefit from methods allowing rapid and streamline determination of the extent of CNS and cell-specific targeting upon administration of viral vectors or nanoparticles in the body. Here, we present a protocol that takes advantage of the high throughput and multiplexing capabilities of flow cytometry to allow a straightforward quantification of different cell subtypes isolated from mouse brain or spinal cord, namely microglia/macrophages, lymphocytes, astrocytes, oligodendrocytes, neurons and endothelial cells. We apply this approach to highlight critical differences between two tissue homogenization methods in terms of cell yield, viability and composition. This could instruct the user to choose the best method depending on the cell type(s) of interest and the specific application. This method is not suited for analysis of anatomical distribution, since the tissue is homogenized to generate a single-cell suspension. However, it allows to work with viable cells and it can be combined with cell-sorting, opening the way for several applications that could expand the repertoire of tools in the hands of the neuroscientist, ranging from establishment of primary cultures derived from pure cell populations, to gene-expression analyses and biochemical or functional assays on well-defined cell subtypes in the context of neurodegenerative diseases, upon pharmacological treatment or gene therapy.

We present a flow cytometry method to identify simultaneously different cell types retrieved from mouse brain or spinal cord. This method could be exploited to isolate or characterize pure cell populations in neurodegenerative diseases or to quantify the extent of cell targeting upon in vivo administration of viral vectors or nanoparticles.

다른 균질화 방법을 통해 마우스 뇌 / 척수에서 검색 된 여러 세포 유형의 동시 유량 세포 측정 특성 분석

Recent advances in viral vector and nanomaterial sciences have opened the way for new cutting-edge approaches to investigate or manipulate the central ...