Name: arterial pouch microsurgical bifurcation aneurysm model in the rabbit
Uploaded: 2020-05-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 11 s
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저자들은 수술 전 단계에서 탁월한 지원과 기술 지원을 해준 Olgica Beslac과 Kay Nettelbeck과 장기적인 동물 건강에 대한 헌신적 인 감독을 위해 Alessandra Bergadano, DVM, PhD에게 감사드립니다.

모든 수의학 치료는 제도적 지침 (모든 실험은 스위스 광저우 베른 동물 관리위원회 (BE 108/16)의 승인을 받음)에 따라 수행되었으며 이사회 인증 수의사 마취 전문의의 감독하에 수행되었습니다. ARRIVE 지침과 3R 원칙은17,18을 엄격히 준수했습니다.
참고 : 모든 동물을 섭씨 22 \u201224 ° C (°C)의 실온에 보관하고 12 시간 (h) 밝고 어두운 사이클을 유지하십시오. 매번 물, 펠릿 및 광고 리비툼 건초 다이어트에 무료로 액세스 할 수 있습니다. 통계적 분석은 비모수 Wilcoxon-Mann-Whitney-U 검정을 사용하여 수행되었다. 0.05의 확률 값(p)≤ 유의한 것으로 간주되었다.
1. 수술 전 단계
<ol><li>23 ± 3 °C의 온도를 유지하는 조용하고 무균 수술실 바로 옆에 수술을 계획한 모든 토끼에 대한 상세한 수술 전 임상 검사를 수행하십시오.<ol>
<li>각 동물의 무게를 기록하고, 점막, 모세관 리필 시간 및 펄스 품질을 거시적으로 평가하십시오.</li>
		<li>청진기와 복부 촉진으로 심장 청진을 추가로 수행하십시오.</li>
		<li>임상 연구 결과에 기초하여, 미국 마취 학자 협회 (ASA) 분류를 각 토끼19에 기인한다. ASA I 점수를 받은 동물만 연구에 포함시켰다.</li>
		<li>전기 면도기로 양쪽 귀를 면도하고 오줌 동맥과 정맥 모두에 prilocaine-lidocaine 크림을 바르십시오.</li>
	</ol>
</li>
	<li>토끼를 케타민 20 밀리그램 (mg) / 킬로그램 (kg), 덱스 메데토미딘 100 mg / kg 및 메타돈 0.3 mg / kg을 주사기를 통해 피하 주사 (SC)의 조합으로 진정시킵니다.</li>
	<li>각 동물을 적어도 15 분 동안 방해받지 않고 그대로 두십시오.</li>
	<li>그 후, 느슨한 얼굴 마스크를 통해 3 리터 (l) / 분 (분)으로 보충 산소를 공급하고 맥박 산소 측정기를 통한 꾸준한 모니터링하에 왼쪽 오줌 중앙 동맥에 22G 캐뉼라를 놓고 대측 귀의 오줌 정맥에 또 다른 22G 캐뉼라를 놓습니다.</li>
	<li>수술장(목)을 면도하고 0.75% 절개전 로피바카인을 피내 주사한다. 다음으로 이마를 면도하고 소아 뇌파 (EEG) 센서를 배치 할 준비를하십시오.</li>
	<li>프로포폴 1-2 mg / kg을 정맥 내 (IV)로 전신 마취를 유도하여 효과를 발휘하십시오. 그런 다음 즉시 모든 토끼의 기관을 캡노 그래피 제어하에 실리콘 튜브 (3 밀리미터 (mm) 내부 직경)로 삽관하십시오. 그런 다음 모든 토끼를 수술실로 운반하여 등쪽 쓰레기통에 놓고 튜브를 소아 서클 시스템에 연결하십시오.</li>
	<li>산소에서 이소플루란을 통해 마취 심화 및 유지를 달성하여 최대 말단 조수 이소플루란 농도 1.3%를 목표로 합니다.</li>
	<li>기관 삽관이 될 때까지 임상 및 도구 모니터링 (맥박 산소 측정, 도플러 및 침습적 혈압, 3 리드 심전도, EEG, 직장 온도 모니터링 및 흡입 및 내뿜는 가스)을 확인하십시오.</li>
	<li>수분 공급을 유지하려면 정맥 접근을 통해 링거의 젖산을 5 ml / kg / h의 연속 주입 (CRI)으로 제공하십시오. 항상 10 분 간격으로 발가락 핀치를 사용하여 적절한 마취를 확인하십시오.</li>
	<li>manubrium sterni에서 양쪽 턱 각도로 포비돈 요오드를 사용하여 수술 현장을 소독하십시오. 이제 수술 현장의 멸균 드레이핑을 수행하십시오.</li>
	<li>수술 중에 50 마이크로그램 (μg) / kg / min의 CRI에서 리도카인과 3 \u201210 μg / kg / h의 펜타닐로 진통제를 제공하십시오. 자발적 또는 보조 환기뿐만 아니라 허용 과다 캡니아를 적용하십시오. 수술 중 적어도 한 번 동맥 혈액 가스 분석을 수행하십시오.</li>
	<li>노르 아드레날린으로 관련 저혈압 (평균 동맥압 < 60 mmHg)을 치료하십시오. 가열 패드 또는 가열 강제 공기 온난화 시스템을 사용하여 저체온증 (직장 온도 ≤ 38 °C)을 예방하십시오.</li>
</ol>2. 수술 단계 – 단계 I
<ol><li>manubrium sterni에서 턱 각도 / 후두 수준까지 중간 피부 절개로 수술을 시작하십시오. 메스, 외과 용 가위 및 포셉으로 피부와 연조직을 날카롭게 해부하십시오. 무딘 해부로 subcutis와 뚱뚱한 패드를 중앙으로 분리하십시오.</li>
	<li>미세 포셉과 외과 용 가위를 사용하여 무딘 해부로 왼쪽에있는 흉쇄 유돌기 근육의 앞쪽 위 능선을 중앙으로 입력하십시오.</li>
	<li>거시적으로, 둔탁한 준비를 수행하고 미세 포셉과 외과 용 가위를 사용하여 후두 마비를 피하기 위해 왼쪽 CCA를 미주 신경에서 조심스럽게 분리하십시오 (그림 2). 좌측 CCA의 분기는 수술내 랜드마크로서 작용한다는 점에 유의한다(도 3 및 도 4A). 다음 모든 단계의 경우 연조직 스프레더를 사용하여 수술 시각화를 개선하십시오.</li>
	<li>미주 신경에서 왼쪽 원위 CCA를 성공적으로 준비하고 해방 한 후 papaverine (40 mg / ml, 0.9 % 등장성 염화나트륨 용액으로 희석 된 1 : 1)을 국부적으로 투여하십시오. 마이크로 면봉으로 모든 혈관 세그먼트를 지속적으로 보호한 후 외부 파파베린을 추가로 투여합니다. 파파베린에 담근 왼쪽 CCA를 자가 근육 조직 아래에 놓아 혈관이 조작 현미경의 빛으로 건조되지 않도록 보호하십시오.</li>
	<li>수술 과정에서 외과 의사의 편안함을 극대화하면서 측면을 전환하십시오. 오른쪽에서 동일한 수술 절차를 반복하십시오. CCA를 미리 정의 된 랜드 마크까지 원위 및 근접으로 해부합니다 (턱 각도 / 후두 및 내부 경정맥 수준에서 경동맥 분기; 그림 4A, B). 스프레더를 재삽입하고 앞서 설명한 대로 마이크로 면봉과 파파베린을 투여하십시오.</li>
	<li>오른쪽 근위 CCA의 결찰 전에 정맥 귀 카테터를 통해 헤파린 (500 국제 단위 (IU) / kg)을 전신적으로 주사하십시오.</li>
	<li>지금부터 수술 현미경을 사용하십시오. 먼저, 동맥 혈관의 긴장을 피하기 위해 거시경으로 보이는 근위 랜드 마크의 끝에 직접 4-0 비 흡수성 봉합사로 오른쪽 근위 CCA를 리게이트하십시오.<ol>
<li>둘째, 첫 번째 4-0 합자에서 원위적으로 절단 한 후 결과 동맥 파우치가 모든 동물에서 약 3 \ u20124 mm의 표준화 된 길이가 될 것이라는 점을 고려하여 측정을 위해 용기 클립을 사용하여 6-0 비 흡수성 합자를 정확하게 4 \ u20125 mm 원위 방향으로 적용하십시오 (그림 5A, C).</li>
	</ol>
</li>
	<li>6-0 합자를 조인 후, 내피 손상을 방지하고 혈전 발생을 방지하기 위해 임시 혈관 클립(뇌동맥류 수술에 일반적으로 사용됨)으로 오른쪽 CCA를 가능한 한 멀리 원위 방향으로 고정합니다(그림 5B).</li>
	<li>이제 4-0 비 흡수성 합자를 원위 적으로 절단하십시오. 동맥 파우치를 수확하기 위해(도 5C), 6-0 비흡수성 합자를 원위적으로 두 번째 절단을 수행한다.</li>
	<li>동맥 파우치를 모든 연조직에서 꼼꼼하게 청소하고 용기 클립으로 길이, 너비 및 깊이를 측정합니다 (그림 5C). 추가 변형이 필요하지 않은 경우, 자가 동맥 이식편을 추가로 사용할 때까지 실온에서 헤파린화 된 용액 (0.9 % 등장성 염화나트륨 중 500 IU / 100 ml)에 보관하십시오.</li>
</ol>3. 동맥 파우치 분해
<ol><li>동맥 파우치 분해가 필요한 경우, 연조직을 꼼꼼하게 닦고 실험 당일 실온에서 트리스 버퍼 5ml에 녹인 돼지 엘라스타제 100IU로 20분 동안 예비배양한다. 브러시 기술을 사용하지 마십시오. 동맥 파우치를 쉐이커를 사용하여 인트라- 및 엑스트라-발광적으로 인큐베이션한다.</li>
	<li>파우치를 0.9% 등장성 염화나트륨의 헤파린화된 용액에 넣기 전에, 0.9% 등장성 염화나트륨 용액에 해부학적 포셉으로 3분 동안 부드럽게 3번 살짝 밀어 남은 돼지 엘라스타제를 씻어낸다.</li>
	<li>필요한 경우 동맥 파우치의 내강을 실리콘으로 만든 마이크로 튜브로 열어 두십시오. 젖은 마이크로 패딩으로 전체 수술 과정에서 왼쪽 및 오른쪽 CCA를 꼼꼼하게 보호하십시오.</li>
</ol>4. 수술 단계 – 단계 II
<ol><li>CCA의 추가 준비를 위해, 동맥을보다 피상적으로 움직이기 위해 두 개의 둥근 마이크로 면봉을 그 바로 아래에 놓습니다. 이제 동맥의 더 나은 시각화를 위해 왼쪽 CCA 아래에 보라색 패딩이있는 마이크로 면봉 하나를 원위 세 번째 아래에 놓습니다.</li>
	<li>0.9% 등장성 염화나트륨 100ml에 용해된 헤파린 500IU와 결합된 0.9% 등장성 염화나트륨 용액으로 우근위 CCA를 플러시한다. 장력이없는 문합을 만들려면 오른쪽 CCA를 왼쪽으로 터널링하기 위해 외과 용 가위를 사용하여 뚱뚱한 패드 / 기관주 근육 조직 아래에 놓습니다. 동맥의 연조직을 제거하십시오.<ol>
<li>이제 마이크로 가위와 포셉을 사용하여 오른쪽 CCA의 근위 측에서 2mm 물고기 입 절개를 수행하십시오.</li>
	</ol></li>
	<li>운영 테이블의 측면을 변경합니다. 왼쪽 원위 CCA를 다른 임시 용기 클립으로 클립한 다음 근위 왼쪽 CCA를 두 개의 임시 용기 클립으로 클립합니다. 젖은 마이크로 면봉을 사용하여 수술 광 아래에서 노출된 모든 용기 세그먼트가 건조되지 않도록 보호하십시오.</li>
	<li>왼쪽 CCA의 원위 세 번째를 연조직으로부터 완전히 해방시키고 동맥 절제술을 수행한다. 외과 용 마이크로 포셉을 사용하고 부드럽게 연조직을 잡으십시오. 이제 동맥을 상승시키고 외과 용 마이크로 가위로 왼쪽 원위 CCA를 천천히 절개하십시오. 혈관 세그먼트를 헤파린 (0.9 % 등장성 염화나트륨 용액 100ml에 용해 된 500 IU)으로 플러시하십시오.</li>
	<li>곡선형 마이크로 포셉 및 마이크로 가위로 동맥 절제술을 수행 한 후, 왼쪽 CCA의 원위 세 번째에 위치한 동맥 절제술을 원위 방향으로 확대하여 경동맥 및 자가 이식편의 오른쪽 둔기의 직경의 약 2 배를 측정합니다. 이것은 동맥 파우치로 충분한 혈류를 허용합니다.</li>
	<li>동맥 파우치를 헤파린화 된 식염수 용액에서 꺼내십시오. 파우치를 분기가 계획되어있는 수술 현장에 두십시오. 흡수성이 없는 9-0 봉합사로 우측 경동맥 둔탁의 후면을 교합하기 시작하고, 그 다음에 물고기 입 절개 수준에서 두개골로 위치한 뒤쪽에 봉합사를 가한다. 단일 바늘로 원위부터 근위까지 후면을 바느질하십시오.</li>
	<li>봉합하는 동안, 모든 엘라스타제 프리인큐베이션된 파우치를 지속적인 관개로 촉촉하게 유지하십시오. 파우치의 용기 벽을 봉합하는 동안 곡선 수술 용 마이크로 포셉을 사용하여 팁으로 루멘을 부드럽게 엽니 다. 왼쪽 또는 근위 오른쪽 CCA의 일부를 봉합 할 때마다 직선 수술 용 마이크로 포셉을 사용하십시오. 그런 다음 수평 뒷면을 봉합하십시오.</li>
	<li>다음으로 수평 앞면을 봉합하여 동맥류의 돔에서 시작하여 바닥으로 이동합니다. 그 후, 앞쪽에 원위 방향으로 움직이는 단일 스티치로 시작하십시오.<ol>
<li>모든 단계에서 4.5\u20124.8 해부학을 봉합하는 동안 의원 성 협착을 피하기 위해 동맥 절제술에 가까운 혈관의 일부를 잡기 위해주의를 기울이십시오. 또한, 전체 수술 과정 동안 모든 혈관 세그먼트를 헤파린화 된 염화나트륨 용액 (0.9 % 등장성 염화나트륨 100ml에 용해 된 500 IU)으로 채워진 주사기로 외발광으로 지속적으로 적시고 젖은 마이크로 면봉으로 보호하십시오.</li>
		<li>아나스토마증을 끝내기 전에 헤파린화 된 0.9 % 등장성 염화나트륨 용액 (0.9 % 등장성 염화나트륨 100ml에 용해 된 500 IU)으로 전체 복합체를 관개하십시오. 엘라스타아제 변형 동맥 파우치는 건조하고 트롬보스를 만드는 경향이 강하기 때문에 가능한 한 빨리 꿰매어야 한다는 점에 주의하세요. 소화 원주 혈관에 관한 파우치 내의 잔류 엘라스타제 농도의 공격적인 행동 때문에, 혈관 복합체를 신속하게 재관류시키는 수술을 빨리 진행한다.</li>
	</ol></li>
	<li>모든 임시 혈관 클램프를 단계적으로 제거하십시오.<ol>
<li>왼쪽 CCA에서 원위 클램프를 분리합니다. 경미한 출혈을 받아들이고 문합에 마이크로 면봉을 부드럽게 각인시켜 고정시킵니다. 그런 다음 오른쪽 CCA의 클램프를 제거하고 혈전 형성을 피하기 위해 마이크로 면봉과 포셉으로 부드럽게 누릅니다.</li>
		<li>필요한 경우 임시 혈관 클립을 교체하여 충분한 응고를 제공하십시오. 그런 다음 왼쪽에서 두 용기 클립을 인접 적으로 완화하십시오. 모든 단계에서 필요한 경우 클립을 교체하여 응고를 허용하거나 다시 바느질을 수행하십시오.</li>
	</ol></li>
	<li>이 단계에서 혈관 복합체의 형광 혈관 조영술을 수행한다(도 6 및 도 7). 참고: 형광 혈관조영술은 2개의 대역통과 필터, 비디오 카메라가 장착된 스마트폰 및 자전거 스포트라이트를 사용하여 1ml의 플루오레세인 IV를 투여하여 수행됩니다. 이 절차는 이미 다른 곳(20,21,22)에서 설명되었다.</li>
	<li>마지막으로, 수술 좌석을 닫으십시오. 다시 적응하고 부드럽게 운동성 유방을 보호하기 위해 단일 노드가있는 3-0 재 흡수 가능한 봉합사로 지방 패드를 봉합하십시오. 같은 방식으로 subcutis와 피부를 닫습니다.</li>
</ol>5. 수술 후 단계
<ol><li>수술이 끝날 때 isoflurane 및 전신 진통 투여를 중단하고 삼키는 반사가 돌아 오자마자 기관 삽관을 제공하십시오.</li>
	<li>0.5 mg/kg의 멜록시캄 IV, 10 mg/kg 아스피린(ASS) IV, 100 μg의 비타민 B12 SC 및 20 mg/kg의 클라녹실 IV를 투여하십시오.</li>
	<li>토끼가 자발적으로 흉골 잔해를 회복 할 때까지 보충 산소와 적극적인 온난화를 제공하십시오.</li>
	<li>설치류와 토끼의 통증 평가 및 관리에 대한 지침에 따라 처음 3 일 동안 하루에 네 번 수술 후 추적 관찰 및 동물 관리를 수행하십시오23,24.</li>
	<li>통증 평가를위한 점수 시트에 따라 외이에 적용된 펜타닐 패치 (12 μg / h), 하루에 한 번 멜록시캄 SC 및 구조 요법 SC로 메타돈으로 수술 후 진통을 투여하십시오. 모든 토끼에서 3 일 동안 250 IU / kg 저분자 헤파린 (LMH)을 피하 투여하십시오.</li>
</ol>

이 연구는 연구위원회, Kantonsspital Aarau, Aarau, Switzerland 및 스위스 국립 과학 재단 SNF (310030_182450)의 연구 기금에 의해 지원되었습니다. 저자는 제시된 연구의 설계 및 수행에 대한 전적인 책임이 있으며 경쟁 이익을 선언하지 않습니다.

우리의 연구는 토끼의 벽 조건이 다른 진정한 분기 동맥류 모델을 만들 가능성을 보여줍니다. 전반적으로, 평균 체중이 3.7 ± 0.09kg이고 평균 연령이 112 ± 3 일인 14 마리의 암컷 뉴질랜드 흰 토끼가 연구에 포함되었습니다. 모든 동맥류의 85.72 %는 28 일 동안 추적 관찰 기간 동안 특허를 유지했습니다. 두 마리의 동물이 조기에 사망했습니다 (사망률 12.5 %).
이전의 연구는 혈관 내...

두개내 동맥류(IA) 파열로 인한 Subarachnoid 출혈은 혈관내 또는 미세외 과적 폐색 기술(1,2,3,4)에 의해 효과적으로 조절될 수 있다. 코일링 후 IA 재발의 주요 한계를 극복하기 위해 다른 혈관 내 치료법은 지난 수십 년 동안 혈관 내 장치 테스트의 필요성이 증가하면서 중요성을 얻었습니다. 이러한 새로운 치료 접근법을 테스트하기 위해 유변학 적 특성, 혈역학 및 동맥류 벽 상태를 존중하는 적절한 동물 모델은 5,6,7 개가 매우 보증됩니다. 이러한 맥락에서, 임상 및 전임상 연구는 이미 폐색 후 동맥류 파열 및 재발에 관한 동맥류 벽 조건의 중요한 역할을 밝혀 냈으며, 특히 벽화 세포 7,8,9의 손실에 초점을 맞추고 있습니다.
지금까지 토끼의 실험적 동맥류는 엘라스타제 배양된 일반적인 경동맥(CCA) 그루터기 또는 인공 CCA 분기로 봉합된 정맥 파우치에 의해 가장 자주 생성되었다. 10,11,12,13,14,15,16 따라서, 진정한 동맥 파우치 분기 모델은 결코 설명되지 않았다.
이 연구의 목적은 토끼 모델에서 서로 다른 벽 조건을 가진 분기 동맥류의 미세 외과 적 생성을위한 안전하고 빠르며 표준화 된 기술을 설계하는 것이 었습니다 (그림 1). 이것은 변형되지 않고 변형 된 동맥 파우치를 두 CCA의 인공 생성 된 분기로 봉합함으로써 달성되었습니다.

<table><tbody><tr><td>3-0 resorbable suture</td><td>Ethicon Inc., USA</td><td>VCP428G</td><td></td></tr><tr><td>4-0 non-absorbable suture</td><td>B. Braun, Germany</td><td>G0762563</td><td></td></tr><tr><td>6-0 non-absorbable suture</td><td>B. Braun, Germany</td><td>C0766070</td><td></td></tr><tr><td>9-0 non-absorbable suture</td><td>B. Braun, Germany</td><td>G1111140</td><td></td></tr><tr><td>Adrenaline</td><td>Amino AG</td><td>1445419</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Amiodarone</td><td>Helvepharm AG</td><td>5078567</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Anesthesia machine</td><td>Dr&amp;auml;ger</td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Aspirin</td><td>Sanofi-Aventis (Suisse) SA</td><td>622693</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Atropine</td><td>Labatec Pharma SA</td><td>6577083</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Bandpass filter blue</td><td>Thorlabs</td><td>FD1B</td><td>any other</td></tr><tr><td>Bandpass filter green</td><td>Thorlabs</td><td>FGV9</td><td>any other</td></tr><tr><td>Bipolar forceps</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Bicycle spotlight</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Biemer vessel clip (2 x)</td><td>B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland</td><td>FD560R</td><td>temporary</td></tr><tr><td>Bispectral index (neonatal)</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Blood pressure cuff (neonatal)</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Clamoxyl</td><td>GlaxoSmithKline AG</td><td>758808</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Dexmedetomidine</td><td>Ever Pharma</td><td>136740-1</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Electrocardiogram electrodes</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Elastase</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45125</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Ephedrine</td><td>Amino AG</td><td>1435734</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Esmolol</td><td>OrPha Swiss GmbH</td><td>3284044</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Fentanyl (intravenous use)</td><td>Janssen-Cilag AG</td><td>98683</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Fentanyl (transdermal)</td><td>Mepha Pharma AG</td><td>4008286</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Fluoresceine</td><td>Curatis AG</td><td>5030376</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Fragmin</td><td>Pfizer PFE Switzerland GmbH</td><td>1906725</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Glyco</td><td></td><td></td><td>any generic</td></tr><tr><td>Heating pad</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Isotonic sodium chloride solution (0.9%)</td><td>Fresenius KABI</td><td>336769</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Ketamine</td><td>Pfizer</td><td>342261</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Laboratory shaker</td><td>Stuart</td><td>SRT6</td><td>any other</td></tr><tr><td>Lidocaine</td><td>Streuli Pharma AG</td><td>747466</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Longuettes</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Metacam</td><td>Boehringer Ingelheim</td><td>P7626406</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Methadone</td><td>Streuli Pharma AG</td><td>1084546</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Microtubes</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Micro needle holder</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Midazolam</td><td>Accord Healthcare AG</td><td>7752484</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Needle holder</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>O2-Face mask</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Operation microscope</td><td>Wild Heerbrugg</td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Papaverine</td><td>Bichsel</td><td></td><td>any generic</td></tr><tr><td>Prilocaine-lidocaine creme</td><td>Emla</td><td></td><td>any generic</td></tr><tr><td>Propofol</td><td>B. Braun Medical AG, Switzerland</td><td></td><td>any generic</td></tr><tr><td>Pulse oxymeter</td><td></td><td></td><td>any generic</td></tr><tr><td>Rectal temperature probe (neonatal)</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Ropivacaine</td><td>Aspen Pharma Schweiz GmbH</td><td>1882249</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Scalpell</td><td>Swann-Morton</td><td>210</td><td>any other</td></tr><tr><td>Small animal shaver</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Smartphone</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Soft tissue forceps</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Soft tissue spreader</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Stainless steel sponge bowls</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Sterile micro swabs</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Stethoscope</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Straight and curved micro-forceps</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Straight and curved micro-scissors</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Straight and curved forceps</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Surgery drape</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Surgical scissors</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Syringes 1 ml, 2ml and 5 ml</td><td></td><td></td><td>any other</td></tr><tr><td>Tris-Buffer</td><td>Sigma Aldrich</td><td>93302</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Vascular clip applicator</td><td>B. Braun, Germany</td><td>FT495T</td><td></td></tr><tr><td>Vein and arterial catheter 22 G</td><td></td><td></td><td>any generic</td></tr><tr><td>Vitarubin</td><td>Streuli Pharma AG</td><td>6847559</td><td>any generic</td></tr><tr><td>Yasargil titan standard clip (2 x)</td><td>B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland</td><td>FT242T</td><td>temporary</td></tr></tbody></table>

arterial pouch microsurgical bifurcation aneurysm model in the rabbit

두개내 동맥류에 대한 혈관 내 치료는 지난 수십 년 동안 중요성을 얻었고, 결과적으로 혈관 내 장치를 검사해야 할 필요성이 증가하고 있습니다. 류학적, 혈역학적 및 동맥류 벽 조건을 존중하는 동물 모델은 매우 보증됩니다. 따라서, 본 연구의 목적은 토끼에서 변형되지 않고 변형되지 않은 벽 조건을 갖는 자가 동맥류 분기 동맥류를 만들기 위해 신규한 표준화되고 재현 가능한 수술 기술을 설계하는 것이었다.
Bifurcation 동맥류는 좌측 일반적인 경동맥의 우측 해부학에 의해 생성되었으며, 둘 다 미세 외과 적으로 봉제 된 동맥 파우치의 부모 동맥 역할을합니다. 이식편을 근위 우측 공통 경동맥으로부터 취하고, 대조군(n=7, 즉각적인 자가 재이식) 또는 변형(n=7, 자가 재이식 전에 20분 동안 100개의 국제 단위 엘라스타제와 함께 인큐베이션)하기 위해 취하였다. 파우치 및 모동맥 개통은 생성 직후 형광 혈관조영술에 의해 조절되었다. 추적 관찰 (28 일)에서 모든 토끼는 대조 강화 자기 공명 혈관 조영술 및 형광 혈관 조영술을 거친 다음 동맥류 수확, 거시적 및 조직 학적 평가를 받았다.
총 16 마리의 암컷 뉴질랜드 흰 토끼가 수술을 받았다. 두 마리의 동물이 조기에 사망했습니다. 후속 조치에서 모든 동맥류의 85.72 %가 특허를 유지했습니다. 두 그룹 모두 시간이 지남에 따라 동맥류 크기의 증가를 나타냈다. 이것은 대조군(생성 시의 6.48 ± 1.81 mm3 대 추적 관찰시 19.85 ± 6.40 mm3, p = 0.037)에서 변형된 그룹(생성 시 8.03 ± 1.08 mm3 대 후속± 6.16mm3, p = 0.054)에서 더 두드러졌다.
우리의 발견은 미세 외과 적 접근법에서 다른 벽 조건을 가진 분기 동맥류를 만들 수있는이 새로운 토끼 모델의 적절성을 보여줍니다. 시간이 지남에 따라 동맥류 성장의 우수한 장기 개통성과 특성을 감안할 때,이 모델은 새로운 혈관 내 요법의 전임상 평가를위한 중요한 도구로 작용할 수 있습니다.

일곱 마리의 동물로 구성된 파일럿 시리즈에 이어 완전히 16 마리의 동물이 실험 프로토콜에 포함되었습니다. 두 마리의 동물이 조기에 사망하여 최종 분석에서 제외되었습니다 (사망률 12.5 %). 14마리의 동물에 대해 계산하여, 형광 혈관조영술 동안 즉각적인 동맥류 개통률은 대조군 및 변형군 모두에서 71.43%였다. 네 개의 동맥류는 연속적인 혈전 대피로 다시 열어야했으며 반복적 인 형광 혈관 조...

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Arterial Pouch Microsurgical Bifurcation Aneurysm Model in the Rabbit

두개내 동맥류 치료를 위한 혈관 내 장치를 개발하고 테스트하는 것은 여전히 매우 중요합니다. 오늘날 사용되는 대부분의 동맥류 모델은 동맥 퇴화 벽의 중요한 특성이나 진정한 분기의 혈역학을 놓치고 있습니다. 따라서 우리는 토끼에서 새로운 동맥 파우치 분기 모델을 설계하는 것을 목표로했습니다.

토끼의 동맥 파우치 미세 외과 분기 동맥류 모델

Endovascular treatment for intracranial aneurysms gained importance over the past decades, consequently there is an increased need of testing endovascular ...

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Research

JoVE Journal

Neuroscience

2.3K 조회수.  Kantonsspital Aarau. 두개내 동맥류 치료를 위한 혈관 내 장치를 개발하고 테스트하는 것은 여전히 매우 중요합니다. 오늘날 사용되는 대부분의 동맥류 모델은 동맥 퇴화 벽의 중요한 특성이나 진정한 분기의 혈역학을 놓치고 있습니다. 따라서 우리는 토끼에서 새로운 동맥 파우치 분기 모델을 설계하는 것을 목표로했습니다.

비디오: Arterial Pouch Microsurgical Bifurcation Aneurysm Model in the Rabbit

Microsurgical Venous Pouch Arterial-Bifurcation Aneurysms in the Rabbit Model: Technical Aspects

For ruptured human cerebral aneurysms endovascular embolization has become an equivalent alternative to aneurysm clipping.1 However, large clinical trials have shown disappointing long-term results with unacceptable high rates of aneurysm recanalization and delayed aneurysm rupture.2 To overcome these problems, animal experimental studies are crucial for the development of better endovascular devices.3-5
Several animal models in rats, rabbits, canines and swine are available.6-8 Comparisons of the different animal models showed the superiority of the rabbit model with regard to hemodynamics and comparability of the coagulation system and cost-effectiveness.9-11 
The venous pouch arterial bifurcation model in rabbits is formed by a venous pouch sutured into an artificially created true bifurcation of both common carotid arteries (CCA). The main advantage of this model are true bifurcational hemodynamics.12 The major drawbacks are the sofar high microsurgical technical demands and high morbidity and mortality rates of up to 50%.13 These limitations have resulted in less frequent use of this aneurysm model in the recent years. These shortcomings could be overcome with improved surgical procedures and modified peri- and postoperative analgetic management and anticoagulation.14-16 Our techniques reported in this paper demonstrate this optimized technique for microsurgical creation of arterial bifurcation aneurysms.

An optimized technique for the microsurgical creation of arterial bifurcation aneurysms mimicking bifurcation human cerebral aneurysms is described. A venous pouch is sutured into an artificially created true bifurcation of both common carotid arteries. Facilitated microsurgical techniques and aggressive postoperative anticoagulation and analgesia lead to minimized morbidity rates and high aneurysm patency rates.

토끼 모델에서 Microsurgical 정맥 주머니 아티 - 분기점의 동맥류 : 기술적인 관점

For ruptured human cerebral aneurysms endovascular embolization has become an equivalent alternative to aneurysm clipping.1 However, large clinical trials ...

연구

의학

Detection of Neuritic Plaques in Alzheimer's Disease Mouse Model

Alzheimer's disease (AD) is the most common neurodegenerative disorder leading to dementia. Neuritic plaque formation is one of the pathological hallmarks of Alzheimer's disease. The central component of neuritic plaques is a small filamentous protein called amyloid &beta; protein (A&beta;)1, which is derived from sequential proteolytic cleavage of the beta-amyloid precursor protein (APP) by &beta;-secretase and &gamma;-secretase. The amyloid hypothesis entails that A&gamma;-containing plaques as the underlying toxic mechanism in AD pathology2. The postmortem analysis of the presence of neuritic plaque confirms the diagnosis of AD. To further our understanding of A&gamma; neurobiology in AD pathogenesis, various mouse strains expressing AD-related mutations in the human APP genes were generated. Depending on the severity of the disease, these mice will develop neuritic plaques at different ages. These mice serve as invaluable tools for studying the pathogenesis and drug development that could affect the APP processing pathway and neuritic plaque formation. In this protocol, we employ an immunohistochemical method for specific detection of neuritic plaques in AD model mice. We will specifically discuss the preparation from extracting the half brain, paraformaldehyde fixation, cryosectioning, and two methods to detect neurotic plaques in AD transgenic mice: immunohistochemical detection using the ABC and DAB method and fluorescent detection using thiofalvin S staining method.

One of the pathological characteristics of AD is the formation of Amyloid &#x03B2; protein positive neuritic plaques. In this protocol we describe two methods to detect neuritic plaques in transgenic AD model mice: immunohistochemical detection using the ABC and DAB method and fluorescent detection using thioflavin S staining method.

알츠하이머 질병 마우스 모델에서 Neuritic Plaques의 감지

Alzheimer's disease (AD) is the most common neurodegenerative disorder leading to dementia. Neuritic plaque formation is one of the pathological hallmarks ...

신경과학

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

Proprioception is the ability to sense the motion, or position, of body parts by responding to stimuli arising within the body. In fruitflies and other insects proprioception is provided by specialized sensory organs termed chordotonal organs (ChOs) 2. Like many other organs in Drosophila, ChOs develop twice during the life cycle of the fly. First, the larval ChOs develop during embryogenesis. Then, the adult ChOs start to develop in the larval imaginal discs and continue to differentiate during metamorphosis.
The development of larval ChOs during embryogenesis has been studied extensively 10,11,13,15,16. The centerpiece of each ChO is a sensory unit composed of a neuron and a scolopale cell. The sensory unit is stretched between two types of accessory cells that attach to the cuticle via specialized epidermal attachment cells 1,9,14. When a fly larva moves, the relative displacement of the epidermal attachment cells leads to stretching of the sensory unit and consequent opening of specific transient receptor potential vanilloid (TRPV) channels at the outer segment of the dendrite 8,12. The elicited signal is then transferred to the locomotor central pattern generator circuit in the central nervous system.
Multiple ChOs have been described in the adult fly 7. These are located near the joints of the adult fly appendages (legs, wings and halters) and in the thorax and abdomen. In addition, several hundreds of ChOs collectively form the Johnston's organ in the adult antenna that transduce acoustic to mechanical energy 3,5,17,4.
In contrast to the extensive knowledge about the development of ChOs in embryonic stages, very little is known about the morphology of these organs during larval stages. Moreover, with the exception of femoral ChOs 18 and Johnston's organ, our knowledge about the development and structure of ChOs in the adult fly is very fragmentary.
Here we describe a method for staining and visualizing ChOs in third instar larvae and pupae. This method can be applied together with genetic tools to better characterize the morphology and understand the development of the various ChOs in the fly.

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

A method to immunostain and visualize chordotonal organs in larvae and pupae of Drosophila melanogaster is described.

의 Proprioceptors의 시각화<em&gt; Drosophila</em&gt; 애벌레와 Pupae

Proprioception is the ability to sense the motion, or position, of body parts by responding to stimuli arising within the body. In fruitflies and other ...

The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model

Experimental saccular aneurysm models are necessary for testing novel surgical and endovascular treatment options and devices before they are introduced into clinical practice. Furthermore, experimental models are needed to elucidate the complex aneurysm biology leading to rupture of saccular aneurysms.
Several different kinds of experimental models for saccular aneurysms have been established in different species. Many of them, however, require special skills, expensive equipment, or special environments, which limits their widespread use. A simple, robust, and inexpensive experimental model is needed as a standardized tool that can be used in a standardized manner in various institutions.
The microsurgical rat abdominal aortic sidewall aneurysm model combines the possibility to study both novel endovascular treatment strategies and the molecular basis of aneurysm biology in a standardized and inexpensive manner. Standardized grafts by means of shape, size, and geometry are harvested from a donor rat&#39;s descending thoracic aorta and then transplanted to a syngenic recipient rat. The aneurysms are sutured end-to-side with continuous or interrupted 9-0 nylon sutures to the infrarenal abdominal aorta.
We present step-by-step procedural instructions, information on necessary equipment, and discuss important anatomical and surgical details for successful microsurgical creation of an abdominal aortic sidewall aneurysm in the rat.

Microsurgical sidewall aneurysms in rats are created by end-to-side anastomosis of an aortic graft to the abdominal aorta. We present step-by-step instructions and discuss anatomical and surgical details for successful experimental saccular aneurysm creation.

헬싱키 쥐 미세 측벽 동맥류 모델

Experimental saccular aneurysm models are necessary for testing novel surgical and endovascular treatment options and devices before they are introduced ...

A Rabbit Venous Interposition Model Mimicking Revascularization Surgery using Vein Grafts to Assess Intimal Hyperplasia under Arterial Blood Pressure

Although vein grafts have been commonly used as autologous grafts in revascularization surgeries for ischemic diseases, the long-term patency remains poor because of the acceleration of intimal hyperplasia due to the exposure to arterial blood pressure. The present protocol is designed for the establishment of experimental venous intimal hyperplasia by interposing rabbit jugular veins to the ipsilateral carotid arteries. The protocol does not require surgical procedures deep in the body trunk and the extent of the incision is limited, which is less invasive for the animals, allowing long-term observation after implantation. This simple procedure enables researchers to investigate strategies to attenuate the progression of intimal hyperplasia of the implanted vein grafts. Using this protocol, we reported the effects transduction of microRNA-145 (miR-145), which is known to control the phenotype of vascular smooth muscle cells (VSMCs) from the proliferative to the contractile state, into harvested vein grafts. We confirmed the attenuation of intimal hyperplasia of vein grafts by transducing miR-145 before implantation surgery through the phenotype change of the VSMCs. Here we report a less invasive experimental platform to investigate the strategies that can be used to attenuate intimal hyperplasia of vein grafts in revascularization surgeries.

The present protocol aims to experimentally create venous intimal hyperplasia by subjecting veins to arterial blood pressure for developing strategies to attenuate venous intimal hyperplasia following revascularization surgery using vein grafts.

정맥 이식편을 사용하여 동맥 혈압하에서 인티맥 증식을 평가하는 재혈관 외과를 모방한 토끼 정맥 중개 모델

Although vein grafts have been commonly used as autologous grafts in revascularization surgeries for ischemic diseases, the long-term patency remains poor ...

Creation of Two Saccular Elastase-Digested Aneurysms with Different Hemodynamics in One Rabbit

Preclinical animal models with hemodynamic, morphologic, and histologic characteristics close to human intracranial aneurysms play a key role in the understanding of the pathophysiological processes and the development and testing of new therapeutic strategies. This study aims to describe a new rabbit aneurysm model that allows the creation of two elastase-digested saccular aneurysms with different hemodynamic conditions within the same animal.
Five female New Zealand white rabbits with a mean weight of 4.0 (&#177; 0.3) kg and mean age of 25 (&#177;5) weeks underwent microsurgical stump and bifurcation aneurysm creation. One aneurysm (stump) was created by right common carotid artery (CCA) exposure at its origin at the brachiocephalic trunk. A temporary clip was applied at the CCA origin and another, 2 cm above. This segment was treated with a local injection of 100 U of elastase for 20 min. A second aneurysm (bifurcation) was created by suturing an elastase-treated arterial pouch into the end-to-side anastomosis of the right CCA to left CCA. Patency was controlled by fluorescence angiography immediately after creation.
The average duration of surgery was 221 min. The creation of two aneurysms in the same animal was successful in all rabbits without complication. All aneurysms were patent immediately after surgery except for one bifurcation aneurysm, which showed an extreme tissue reaction due to elastase incubation and an immediate intraluminal thrombosis. No mortality was observed during surgery and up to one-month follow-up. Morbidity was limited to a transient vestibular syndrome (one rabbit), which recovered spontaneously within one day.
Demonstrated here for the first time is the feasibility of creating a two-aneurysm rabbit model with stump and bifurcation hemodynamic characteristics and highly degenerated wall conditions. This model allows the study of the natural course and potential treatment strategies on the basis of aneurysm biology under different flow conditions.

This protocol describes the steps for the creation of a rabbit model with two elastase-digested aneurysms with different hemodynamics (stump and bifurcation constellation). This allows the testing of novel endovascular devices in aneurysms with different angioarchitecture and hemodynamic conditions within a single animal.

한 토끼에서 서로 다른 혈역학을 가진 두 개의 천골 엘라스타제 소화 동맥류 생성

Preclinical animal models with hemodynamic, morphologic, and histologic characteristics close to human intracranial aneurysms play a key role in the ...

Microsurgical Creation of Giant Bifurcation Aneurysms in Rabbits for the Evaluation of Endovascular Devices

Giant aneurysms are dangerous lesions requiring endovascular treatment, with high rates of aneurysm recanalization and re-rupture. Reliable in vivo models are rare but are required for testing new endovascular devices.&#160;We demonstrate the technical aspects of the creation of giant bifurcation aneurysms in New Zealand white rabbits (2.5-5.5 kg). A 25-30 mm long venous pouch is taken from the external jugular vein, and a bifurcation between both carotid arteries is created microsurgically. The pouch is sutured in the bifurcation to mimic a giant aneurysm. This protocol summarizes our previously published standard technique for venous pouch true arterial bifurcation aneurysms and highlights its essential modification steps for giant aneurysms. Using this modified technique, we were able to create an animal model for giant aneurysms with high comparability to humans regarding the hemodynamics and coagulation systems. Furthermore, low morbidity and high aneurysm patency rates were achieved. The proposed giant aneurysm model offers an excellent possibility for testing new endovascular devices.

Here, we describe the technique for the microsurgical creation of giant bifurcation aneurysms in rabbits for the evaluation of endovascular devices.

혈관 내 장치 평가를 위한 토끼의 거대 분기 동맥류의 미세외과 생성

Giant aneurysms are dangerous lesions requiring endovascular treatment, with high rates of aneurysm recanalization and re-rupture. Reliable in vivo models ...

Swine Models of Aneurysmal Diseases for Training and Research

Large animal models, specifically swine, are widely used to research cardiovascular diseases and therapies, as well as for training purposes. This paper describes two different aneurysmal swine models that may help researchers to study new therapies for aneurysmal diseases. These aneurysmal models are created by surgically adding a pouch of tissue to carotid arteries in swine. When the model is used for research, the pouch must be autologous; for training purposes, a synthetic pouch suffices.
First, the right external jugular vein (EJV) and right common carotid artery (CCA) must be surgically exposed. The EJV is ligated and a vein pouch fashioned from a short segment. This pouch is then sutured to an elliptical arteriotomy performed in the CCA. Animals must be kept heparinized during model creation, and local vasodilators may be used to decrease vasospasms. Once the suture is completed, correct blood flow should be inspected, checking for bleeding from the suture line and vessel patency. Finally, the surgical incision is closed by layers and an angiography performed to image the aneurysmal model.
A simplification of this aneurysmal carotid model that decreases invasiveness and surgical time is the use of a synthetic, rather than venous, pouch. For this purpose, a pouch is tailored in advance with a segment of a polytetrafluoroethylene (PTFE) prosthesis, one end of which is sutured close using polypropylene vascular suture and sterilized prior to surgery. This "sac" is then attached to an arteriotomy performed in the CCA as described. 
Although these models do not reproduce many of the physiopathological events related to aneurysm formation, they are hemodynamically similar to the situation found in the clinical setting. Therefore, they can be used for research or training purposes, allowing physicians to learn and practice different endovascular techniques in animal models that are close to the human system.

Description of two different aneurysmal swine models for neuroradiology training courses and research studies. This study provides evidence of the feasibility of these aneurysm porcine model creations and the reproducible methods that are close to the clinical setting.

Large animal models, specifically swine, are widely used to research cardiovascular diseases and therapies, as well as for training purposes. This paper ...

A Modified Technique for Arteriovenous Fistula Construction in Rabbits

Juxta-anastomotic stenosis is a challenging problem that often causes non-maturation and decreases the patency of an arteriovenous fistula (AVF). Injury to the veins and arteries during the operation and hemodynamic changes can lead to intimal hyperplasia, leading to juxta-anastomotic stenosis. To reduce injury to the veins and arteries during the operation, this study proposes a new modified no-touch technique (MNTT) for AVF construction that can decrease the rate of juxta-anastomotic stenosis and improve the AVF patency. To unravel the hemodynamic changes and mechanisms of the MNTT, this study presented an AVF procedure using this technique. Although this procedure is technically challenging, 94.4% procedural success was achieved after adequate training. Ultimately, 13 out of 34 rabbits had a functional AVF 4 weeks after the surgery, leading to a 38.2% AVF patency rate. However, at 4 weeks, the survival rate was 86.1%. Ultrasonography showed active blood flow through AVF anastomosis. Furthermore, the spiral laminar flow was observed in the vein and artery near the anastomosis, suggesting that this technique may improve the hemodynamics of the AVF. On histological observation, significant venous intimal hyperplasia was observed at the AVF anastomosis, whereas no significant intimal hyperplasia was observed at the proximal external jugular vein (EJV) of the anastomosis. This technique will improve the understanding of the mechanisms underlying the use of MNTT for AVF construction and provide technical support for the further optimization of the surgical approach in AVF construction.

The present protocol proposes the creation of an arteriovenous fistula in rabbits using a modified no-touch technique. The technique involves the side-to-side anastomosis of the common carotid artery and external jugular vein without the dissection of the perivenous tissues or cutting off the artery.

토끼의 동정맥루 건설을위한 수정 된 기술

Juxta-anastomotic stenosis is a challenging problem that often causes non-maturation and decreases the patency of an arteriovenous fistula (AVF). Injury ...

Developing an Experimental Aneurysm Model in a Rabbit Using an Elastase-Treated Vessel Pouch

<a href='https://app.jove.com/v/61157/arterial-pouch-microsurgical-bifurcation-aneurysm-model-in-the-rabbit'>Source: Wanderer, S., et al. Arterial Pouch Microsurgical Bifurcation Aneurysm Model in the Rabbit. J. Vis. Exp. (2020)</a>This video demonstrates the creation of an experimental aneurysm model in a rabbit using an elastase-treated vessel pouch. After excising a segment of the right CCA, the pouch is treated with elastase, then sutured to the left CCA to restore blood flow. The resulting stress on the weakened pouch walls induces aneurysm formation.