이 프로토콜은 방사선 생물학 연구를 위한 실제 세포 조사 조건에 가능한 한 가깝게 dosimetry 측정이 수행될 수 있도록 개발되었습니다. 이 프로토콜을 사용하면 세포가 받은 정확한 용량을 결정할 수 있어 많은 X-ray 시설에 적용할 수 있으며 모든 매개 변수를 고려하고 dosimetry로 변환할 수 있습니다. 모든 조사 매개 변수는 물리학자와 방사선 생물학자 사이의 긴밀한 협력을 필요로하는 dosimetry 측정의 최적의 획득을 허용하기 위해 상류로 설정해야합니다.
조사 현장 평가를 수행하기 위해 자체 개발 도시메트리 필름을 조사에 사용되는 지원에 배치하고 두 개 이상의 회색으로 필름을 조사하여 잘 표시된 조사 필드를 얻습니다. 전용 스캐너를 사용하여 자체 개발 도시메트리 필름을 스캔하고 분석 및 플롯 프로파일을 사용하여 ImageJ에서 용량 프로파일을 플롯합니다. 그런 다음 조사 지지 면을 표시하여 셀 용기가 올바른 위치에 배치되도록 합니다.
투여량 측정을 수행하기 위해 변형된 셀 용기를 조사 지원 인클로저에 배치하고 지지면에 이루어진 마크에 따라 이온화 챔버를 올바른 위치에 용기에 배치한다. 모든 조사 파라미터가 적절하게 설정되었는지 확인하고 5분 동안 이온화 챔버를 사전 조사한다. 전기계를 0으로 하고 10분 측정을 가져옵니다.
그런 다음, 공기 케르마에서 평균 용량 속도를 결정하기 위해 수식을 사용합니다. 다운스트림 식별을 위해 모든 필름을 번호매기합니다. 조사 하기 전에 적어도 24 시간, 세포 용기의 크기에 따라 자체 개발 dosimetry 필름의 조각을 잘라.
교정 곡선을 구성하려면 조사되지 않은 컨트롤을 위해 필름 3장을 따로 놓고 첫 번째 필름을 셀 컨테이너 내부에 배치합니다. 이어서, 제1 투여지점을 얻기 위해 필름을 조사한다. 모든 필름이 적절한 선택된 용량으로 삼중 으로 조사되면 교정 곡선을 생성할 수 있습니다.
세포 배양 배지 감쇠 및 산란을 측정하기 위해 모든 조사에 대해 동일한 조사 시간을 선택하고 물없이 용기에 자가 개발 도시메트리 필름 3개를 조사한다. 다음으로, 하나의 필름을 용기에 넣고 조사될 매체의 부피와 동일한 양의 물로 용기를 채웁니다. 필요에 따라 작은 테이프 조각을 사용하여 컨테이너를 인클로저 내에 배치합니다.
조사가 완료되면 흡수성 종이로 필름을 말리고 빛으로부터 보호된 필름을 저장합니다. 조사 후 24시간 후, 스캐너에서 TIFF 형식을 48비트 빨간색 녹색 파란색으로 설정하고 전송 모드를 인치당 150점으로 설정하고 이미지 보정을 선택하지 않습니다. 스캐너를 따뜻하게 하려면 조사되지 않은 필름을 스캐너에 배치하고 스캔 미리 보기를 시작합니다.
미리 보기가 끝나면 타이머를 시작하고 스캔을 시작하기 전에 30초 동안 기다립니다. 스캔이 끝나면 90초 타이머를 시작합니다. 동시에, 스캔을 등록하고 ImageJ에서 이미지를 엽니 다.
스캔 내에서 관심 있는 사각형 영역을 추적하고 영역의 평균 빨간색 픽셀 수준을 측정합니다. 90초가 끝나면 스캔 미리 보기를 최소 30회 반복하여 스캐너를 예열하고 안정화합니다. 스캐너가 안정화되면 필름을 스캐너 침대 중앙에 놓고 스캔 미리 보기를 시작합니다.
스캔을 시작하기 전에 30초 동안 기다립니다. 검사가 끝나면 다음 검사를 시작하기 전에 90초 간 기다립니다. 감쇠기 두께를 추정하는 측정은 그 후 수행되었고, 다른 감쇠기 두께는 2배의 비율로 빔 강도를 감소시키는 두께를 찾기 위해 시험되었다.
이 두께가 결정되었을 때 온도 및 압력 보정 계수에 의해 보정된 평균 mRAW 값을 평가하기 위해 5가지 측정이 수행되었습니다. 이 구성의 경우 구리의 0.667 밀리미터의 반값 층이 발견되었습니다. 본 대표적인 분석에서, 자체 개발 도시메트리 필름은 조사장이 균일한 표면을 결정하기 위해 조사되어 세포 용기의 올바른 배치를 가능하게 하였다.
세포에 대한 정확한 투여량을 결정하기 위해, 측정된 공기 케르마 투여량비율은 광자 플루언스 스펙트럼을 통해 평가된 공기에 대한 평균 질량 에너지 흡수 계수의 비율을 이용하여 물카르마로 변환되었으며, 이는 이 분석을 위해 분당 0.659 그레이로 결정되었다. 이 세포 배양 배지 감쇠 및 산란 분석에서, 자가 발달 도시메트리 방사성 크로믹 필름은 0과 3개의 회색 사이 0.25 회색 단계와 1~3개의 회색 사이 0.25 회색 단계 사이에서 처음으로 보정되었다. 투여량점은 4도 다항곡이 장착되었다.
여기서, 일일 측정에 사용되는 대표 테이블을 관찰할 수 있다. 모든 구성 파라미터가 존중되고, 도 속도는 올바른 셀 용기 내에서 측정되고, 세포 배양 배지의 영향이 평가되는지 확인합니다. 용량 기준 측정을 확립하기 위해 여러 프로토콜이 존재합니다.
핵심은 특히 낮은 x-ray 시설을 사용할 때 특정 응용 프로그램에 적합한 프로토콜을 선택하는 것입니다.
