신장 동종이식편 거부반응을 위한 쥐 동위원소 신장 이식 모델

쥐 동위원소 신장 이식은 전임상 연구에서 신장 동종이식편 거부의 메카니즘을 조사하는 중요한 모델이며, 신장 동종이식편의 장기 생존을 개선하기 위한 새로운 접근법 개발에 도움이 될 수 있다. 이 수술에서 신장 혈관의 종단 간 해부학은 하체의 허혈과 열등한 정맥 카바의 혈전증을 피하고 종단 간 터널 방법으로 요관의 해부학은 수술 후 소변 누출과 요관의 비틀림을 줄입니다. 이 방법은 신장 이식 후 신장 동종 이식편의 면역 거부 및 손상 메커니즘을 조사하는 데 대한 통찰력을 제공합니다.

심포시스 치골에서 subxiphoid까지 중간 선을 따라 외과 용 가위를 사용하여 복부를 절개하여 시작하십시오. 그런 다음 리트랙터를 사용하여 절개를 당깁니다. 절개 오른쪽에서 창자를 꺼내 축축한 거즈로 감싸서 건조하지 않도록하십시오.

그런 다음 왼쪽 신장을 노출하십시오. 20배 배율로 마이크로 포셉과 면봉을 사용하여 왼쪽 신장 동맥과 정맥을 해리시킵니다. 필요한 경우 부신 정맥과 생식기 정맥을 이식하고 횡단하십시오.

마이크로 포셉의 도움으로 요관을 해리시키고 말초 결합 조직을 보존하여 요관에 혈액 공급을 보장합니다. 혈관 클램프 또는 4-0 폴리아미드 모노필라멘트 봉합사로 왼쪽 신장 동맥 위의 약 5 밀리미터 위의 대동맥을 해리시키고 클립하거나 리게이트합니다. 그런 다음 왼쪽 신장 정맥 원위를 왼쪽 생식기 정맥과 부신 정맥의 결합으로 횡단하십시오.

24 게이지 메스 바늘을 사용하여 왼쪽 신장 동맥 아래의 대동맥에서 혈액이 사라질 때까지 밀리리터 헤파린 당 100 단위로 보충 된 얼음처럼 차가운 UW 용액으로 신장을 씻어 내십시오. 대동맥 옆의 왼쪽 신장 동맥을 횡단 한 다음 방광 옆의 요관을 횡단하고 마이크로 포셉과 가위의 도움으로 신장을 해리시킵니다. 기증자 왼쪽 신장을 얼음처럼 차가운 UW 용액으로 보존하십시오.

20 배 배율 하에서, 면봉과 마이크로 포셉을 사용하여 수용자 쥐의 왼쪽 신장 동맥과 신장 정맥을 해리시킨다. 필요한 경우 부신 정맥과 생식기 정맥을 완화하십시오. 미세 혈관 클램프를 사용하여 왼쪽 신장 동맥과 신장 정맥을 뿌리에 클립 한 다음 미세 혈관 클램프에서 세 밀리미터 떨어진 곳에 신장 동맥과 신장 정맥을 횡단하십시오.

왼쪽 요관을 신장 아래 약 두세 센티미터 떨어진 곳에서 해리시키고 8-0으로 절제하십시오. 폴리아미드 모노필라멘트 봉합사와 결찰시 이를 횡단한다. 수혜자를 절제하여 마이크로 포셉과 가위의 도움으로 신장을 해리시켜 왼쪽 신장을 절제하십시오. 기증자 신장을 수용자 쥐의 왼쪽 신장 fossa에 이식하고 이식 된 기증자 신장 주위에 얼음을 넣으십시오.

45배 배율로 전환한 다음, 10-0개의 폴리아미드 모노필라멘트 봉합사를 사용하여 종단 간 패턴으로 기증자 신장 동맥 및 신장 정맥을 수용자에게 해부학적으로 분석한다. 중단 된 봉합사로 신장 동맥을 해부학적으로 분석하려면 체재 봉합사를 12시 및 여섯 시 위치에 놓으십시오. 두 개의 체재 봉합사 사이에 해부학의 한쪽면을 두 개에서 세 개의 바늘로 등거리로 봉합합니다.

체재 봉합사를 뒤집고 마찬가지로 두 개의 체재 봉합사 사이의 해부학의 다른면을 두 개에서 세 개의 바늘로 봉합하십시오. 연속 봉합사로 신장 정맥을 해부학적으로 분석하려면 체재 봉합사를 문합술의 여섯 시와 12시 위치에 놓습니다. 12시 방향에서 해부학의 한쪽면을 네 개에서 다섯 개의 바늘로 봉합하여 실행 봉합사를 사용합니다.

체재 봉합사를 뒤집어 놓고 마찬가지로 여섯 시 위치에서 해부학의 다른면을 봉합하십시오. 신장 정맥의 비 침습적 미세 혈관 클램프를 방출하여 기증자 신장을 재관류시키고, 출혈 부위를 확인하고, 필요한 경우 추가 바늘을 만듭니다. 다음으로, 신장 동맥의 비 침습적 미세 혈관 클램프를 해제하고, 출혈 부위를 확인하고, 필요한 경우 추가 바늘을 만듭니다.

20배 배율 하에서, 4-0 폴리아미드 모노필라멘트 봉합사로 공여체 요관의 끝을 견인으로 리게이트하거나 스티치하여 수용자 방광의 터널을 통해 끝을 드래그한다. 8-0을 사용하여 기증자 요관의 출현을 네 개의 등거리 위치에서 수혜자 방광 외부의 근육층으로 바느질하여 수혜자 방광으로 기증자 요관을 고정하십시오. 폴리아미드 모노필라멘트 봉합사. 그 후, 기증자 요관의 끝을 수용자 방광 외부의 봉합사와 함께 횡단하고 기증자 요관이 수혜자 방광으로 다시 수축되도록하십시오.

내장을 복강에 다시 넣고 근육층에 연속 봉합사로 복부 절개를 한 다음 4-0 폴리아미드 모노 필라멘트 봉합사로 피부층을 닫습니다. 이식 후 십 주째에, 헤마톡실린 및 에오신 염색 및 주기적인 산 이동 염색은 동종이식편 신장과 대조적으로 신장 동종이식편에서 사구체 경화증, 간질성 섬유증, 관상 위축 및 간질성 동맥 경화증을 밝혀냈다. 은 염색은 동종이식편 신장과 비교했을 때 동종이식편 신장에서 사구체 기저막의 두꺼움을 나타냈으며, 이는 쥐 동위원소 신장 이식 모델의 성공을 나타낸다.

신장의 혈관 구멍이 매우 얇기 때문에 잘못된 봉합을 피하려면 고배율 필드에서 해부학을 수행하는 것을 잊지 마십시오.