Um ensaio químico de acetil-clique para medir a acetilação de histona acetiltransferase 1

Nosso ensaio de acetil-clique desenvolvido serve como uma ferramenta para avaliar a atividade da acetiltransferase HAT1, que é fundamental no isolamento de histonas H4 antes da incorporação nucleossômica. Nosso objetivo é usar este método para triagem de alto rendimento de inibidores de pequenas moléculas contra a enzima HAT1. Este método mede a atividade enzimática diretamente sobre o substrato peptídico.

Isso oferece vantagens em comparação com outros ensaios enzimáticos, evitando a variabilidade biológica e os custos relacionados a anticorpos. Este também é de alto rendimento e pode ser adaptado para uso com outras acetiltransferases. Recentemente publicamos uma pequena molécula inibidora de HAT1 baseada neste ensaio que tem atividade em células e animais.

Continuamos a usar este ensaio para selecionar bibliotecas químicas adicionais e executar relações de atividade de estrutura. Estamos avançando em métodos para rastrear a produção de histonas, dobramento, chaperoning e integração de cromatina. Isso destaca a necessidade de ferramentas químicas aprimoradas para explorar mecanismos biológicos e estimular a descoberta de drogas.

Nosso objetivo é demonstrar que direcionar a produção de histonas pode ter benefício terapêutico para doenças como o câncer.