Affinitetsrening av ett fibrinolytiskt enzym från Sipunculus nudus

Det fibrinolytiska enzymet från Sipunculus nudus (sFE) är ett nytt fibrinolytiskt medel som både kan aktivera plasminogen till plasmin och bryta ner fibrin direkt, vilket visar stora fördelar jämfört med traditionella trombolytiska medel. På grund av bristen på strukturell information är emellertid alla reningsprogram för sFE baserade på flerstegskromatografireningar, som är för komplicerade och kostsamma. Här utvecklas för första gången ett affinitetsreningsprotokoll för sFE baserat på en kristallstruktur av sFE; Det innefattar beredning av råprovet och kolonnen för lysin/arginin-agarosmatrisaffinitetskromatografi, affinitetsrening och karakterisering av renat sFE. Efter detta protokoll kan en sats sFE renas inom 1 dag. Dessutom ökar renheten och aktiviteten hos den renade sFE till 92% respektive 19 200 U / ml. Således är detta ett enkelt, billigt och effektivt tillvägagångssätt för sFE-rening. Utvecklingen av detta protokoll är av stor betydelse för vidare utnyttjande av sFE och andra liknande medel.