JoVE Logo
Yazarlar
Bize Ulaşın

Oturum Aç

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Giriş
  • Protokol
  • Sonuçlar
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Burada, basit dikişler ve bir kelepçe kullanarak geçici bilateral ortak karotis arter tıkanma ile retina iskemisinin bir fare modelini tarif ediyoruz. Bu model, kardiyovasküler anormalliklerin neden olduğu retina iskemisinin patolojik mekanizmalarını anlamak için yararlı olabilir.

Özet

Diyabetik retinopati, retinal damarların veya arterlerin tıkanması ve oküler iskemik sendrom gibi çeşitli damar hastalıkları retina iskemisine yol açabilir. Retina iskemisinin patolojik mekanizmalarını araştırmak için ilgili deneysel modellerin geliştirilmesi gerekir. Anatomik olarak, ana retina kan sağlayan bir damar oftalmik arterdir (OpA) ve OpA yaygın karotis arterin (CCA) iç karotis arterinden kaynaklanır. Bu nedenle, CCA'nın bozulması etkili bir şekilde retina iskemisi neden olabilir. Burada, sağ CCA'yı 6-0 ipek dikişlerle bağlamak ve sol CCA'yı bir kelepçe ile 2 saniye boyunca geçici olarak tıkamak için geçici bilateral ortak karotis arter tıkanıklığı (tBCCAO) ile retina iskemisinin bir fare modelini kurduk ve tBCCAO'nun retina disfonksiyonuna yol açan akut retina iskemisine neden olabileceğini gösterdik. Mevcut yöntem, sadece cerrahi iğneler ve bir kelepçe kullanarak cerrahi aletlere olan güveni azaltır, genellikle orta serebral arter tıkanıklığının fare modellerinde görülen beklenmedik hayvan ölümünü en aza indirmek için tıkanma süresini kısaltır ve yaygın retina iskemik bulgularının tekrarlanabilirliğini korur. Model, farelerde iskemik retinopatilerin patofizyolojisini araştırmak için kullanılabilir ve in vivo ilaç taraması için daha fazla kullanılabilir.

Giriş

Retina görme fonksiyonu için nörosensör bir dokudur. Görme fonksiyonu için önemli miktarda oksijen gerektiğinden, retina vücuttaki en yüksek oksijen talep eden dokulardan biri olarak bilinir1. Oksijen kan damarlarından iletilirken retina damar hastalıklarına karşı hassastır. Diyabetik retinopati ve retinal kan damarı (damarlar veya arterler) tıkanıklığı gibi çeşitli damar hastalıkları retina iskemisine neden olabilir. Retina iskemisinin patolojik mekanizmalarını araştırmak için retina iskemisinin tekrarlanabilir ve klinik olarak ilgili deneysel modelleri gerekli kabul edilir. Orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO) intralüminal filament takılarak deneysel serebral iskemi2,3in vivo kemirgen modellerinin geliştirilmesi için en genel olarak kullanılan yöntemdir. Oftalmik arterin (OpA) MCA'ya yakınlığı nedeniyle, MCAO modelleri retina iskemisinin patofizyolojisini anlamak için aynı anda da kullanılır4,5,6. Retina iskemisi ile birlikte serebral iskemiyi teşvik etmek için, uzun filamentler tipik olarak ortak karotis arterin (CCA) veya dış karotid arterin (ECA) kesisi yoluyla yerleştirilir. Bu yöntemlerin yapılması zordur, ameliyatı tamamlamak için uzun bir süre gerektirir (bir fare için 60 dakikadan fazla) ve ameliyattan sonraki sonuçlarda yüksek farklılıklara yol açar7. Bu endişeleri iyileştirmek için daha iyi bir model geliştirmek önemli olmaya devam ediyor.

Bu çalışmada, farelerde retina iskemisini indük etmek için iğneler ve bir kelepçe ile kısa geçici bilateral CCA tıkanıklığı (tBCCAO) kullandık ve retinadaki iskemik yaralanmaların tipik sonuçlarını analiz ettik. Bu videoda, tBCCAO prosedürünün bir gösterisini vereceğiz.

Protokol

Burada açıklanan tüm yöntemler Keio Üniversitesi Tıp Fakültesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmıştır.

1. Cerrahi aletlerin ve hayvanların hazırlanması

  1. Cerrahi aletleri otoklavlayın ve% 70 etil alkolde saklayın. Her yeni cerrahi işlemden önce cerrahi aletleri %70 etil alkol kullanarak dikkatlice temizleyin.
  2. Ameliyattan önce, ameliyat sırasında ve sonrasında steril koşulları korumak için erkek BALB/cAJc1 farelerini (6 haftalık, 26-28 kg) belirli patojensiz (SPF) bir odada hazırlayın.

2. Geçici bilateral ortak karotis arter tıkanma (tBCCAO)

  1. Daha önceaçıklandığıgibi "MMB" olarak adlandırılan midazolam (40 μg/100 μL), medetomidin (7,5 μg/100 μL) ve butorphanol tartrate (50 μg/100 μL) kombinasyonu ile intraperitoneal enjeksiyon yoluyla bir fareyi anestezi altınaalın. Fare tamamen uyuşturulana kadar farenin gözlerini çarpmamasını önlemek için farenin arka kaplamalarını tutun.
    1. Tam anesteziyi kontrol etmek için yaygın olarak kullanılan yöntem olan yanıt alıncaya kadar fare baş parmağına sıkıştırarak anestezinin derinliğini yargılayın10.
      NOT: Farelerin uykuya dalmasına genellikle 5 dakikadan az bir süre gerekir. Genel anestezi için uygun tarifler kurumlar tarafından farklı olabilir.
  2. Anestezi altında gözlerde kuruluğu önlemek için gözlere % 0.1 saflaştırılmış sodyum hyaluronat göz damlası çözeltisi uygulayın.
  3. Fareyi arkasına yerleştirin ve yapışkan bantlar kullanarak farenin pençelerini sabitleyin.
  4. Ameliyattan önce %70 etil alkol kullanarak farenin boyun bölgesini dezenfekte edin.
    NOT: Kürkün ek kupürü, sonraki cilt iltihabına neden olabileceğinden yapılmamıştır11,12.
  5. Boynun sagittal kesisini bir bıçakla gerçekleştirin (Şekil 1).
    NOT: Boyun, sternum ve trakea arasındaki orta hatta kesi yapılması gerekir.
  6. Her iki tükürük bezini de iki forseps kullanarak dikkatlice ayırın ve alttaki CCA'ları görselleştirmek için harekete geçirin.
  7. Doğru CCA'yı ilgili vagal sinirlerden ve eşlik eden damarlardan yapılarına zarar vermeden dikkatlice izole edin ve CCA'nın altına iki adet 6-0 ipek dikiş yerleştirin. Kan akışını engellemek için iki bağı sıkıca bağlayın (Şekil 1).
    NOT: İşlem sırasında küçük damarlar zarar görmüş olabilir. Kanama görülürse, CDA'ları net bir şekilde görselleştirmek için silme gereklidir.
  8. Sol CCA'yı ilgili vagal sinirlerden ve eşlik eden damarlardan yapılarına zarar vermeden dikkatlice bulun ve sol CCA'yı bir kelepçe ile 2 saniye boyunca tıkayın (Şekil 1).
    NOT: Bir yeri sıkıştırmak için sol CCA'nın altına 6-0 ipek dikiş iğnesi yerleştirilmesi gerekir.
  9. Sol CCA'nın yeniden açılmasından sonra, boynun dikiş yaraları 6-0 ipek dikiş ile ve bakteriyel enfeksiyonu inhibe etmek için boyuna bir dab antibiyotik (50 μL) uygulayın.
    NOT: Sol CCA'nın yeniden açılması sırasında arteriyel duvara zarar vermemek için bir kelepçeyi yavaşça çıkarın.
  10. Farenin derin anesteziden hızlı bir şekilde kurtulmasına yardımcı olmak için fareye intraperitoneal olarak 0,75 mg/kg atipamezole hidroklorür enjekte edin. Fareyi önceden ısıtılmış pedlere sahip bir fare kafesine geri döndürün.
    NOT: Fare sternal recumbency korumak için yeterli bilinci kazanana kadar farenin başıboş kalmasına izin vermeyin.
  11. Fare uyandığında ağrının yönetimi için fareye 0,4 mg / kg butorphanol tartrate enjekte edin.
    NOT: Protokol burada duraklatılabilir. Başarılı tBCCAO için ilk ipucu olarak, farenin göz kapağı sarkması gözlenebilir (Şekil 2).
  12. Ötenazi için, farelere 3x MMB karışımı enjekte edin ve deneyler için kurban edin.

3. Genel gözlemler (sağkalım oranları ve göz kapağı sarkması)

  1. Ameliyattan sonra, 0 (ameliyattan sonra), 1, 3 ve 7.
  2. Göz kapağı sarkması 4 puanlık bir derecelendirme ölçeği ile değerlendirin: 1 = sarkma yok, 2 = hafif sarkıklık (~%50), 3 = şiddetli sarkıklık (%50'nin üzerinde) ve 4 = göz akıntısı ile şiddetli sarkıklık.

4. Retina kanı perfüzyonu

  1. Fare retina damarlarında kan perfüzyonunun gözlemlenmesi için yaygın olarak kullanılan farenin sol ventrikülüne 200 μL FITC-dektran (25 mg/mL) enjekte edin13,14.
  2. Dolaşımdan 2 dakika sonra, gözleri enükle edin ve 1 saat boyunca% 4 paraformaldehitte sabitleyin. Retinalar, daha önce15olarak tanımlandığı gibi dikkatlice elde edildi ve düz monte edildi ve floresan mikroskobu ile incelendi.
  3. Retina bütün montajlarının fotoğraflarını 4x büyütmede çekin ve daha önce açıklanan bir birleştirme çözümleyicisi kullanarak tek bir tanede birleştirin16.
  4. NIH Fiji/ImageJ yazılımındaki bir gemi analiz aracıyla perfüzyon alanlarını ölçün.

5. Batı lekesi

  1. TBCCAO'dan 3 ve 6 saat sonra, farelerin gözlerini elde edin ve retinaları izole etmek için hemen soğuk PBS içeren bir Petri kabına aktarın.
  2. Retinaların izolasyonundan sonra, daha önce açıklandığı gibi batı şişkinliği gerçekleştirin9.
  3. Hipoksi-indükleyici faktör-1α (HIF-1α; genel bir hipoksi belirteci) ve β-Actin (iç yükleme kontrolü) için bir gecede antikorlarla kuluçkaya yatırın ve ardından HRP konjuge sekonder antikorların inkübasyonu. Sinyalleri chemiluminescence ile görselleştirin.

6. Nicel PCR (qPCR)

  1. tBCCAO'dan 6, 12 ve 24 saat sonra, daha önce açıklandığı gibi qPCR için elde edilen retinaları işleyin17.
  2. QPCR'ı gerçek zamanlı PCR sistemi ile gerçekleştirin. Kullanılan astarlar Tablo 1'de listelenmiştir. ΔΔCT yöntemi ile farklı transkript seviyeleri arasındaki kat değişimlerini hesaplayın.

7. İmmünohistokimya (IHC)

  1. TBCCAO'dan 3 gün sonra farelerin gözlerini elde edin ve parafin içine gömün.
  2. Göz bölümlerini elde etmek için parafin gömülü gözleri bir mikrotom ile kesin.
  3. Daha önce açıklandığı gibi 5 μm kalınlığındaki göz bölümlerini renksizleştirin ve lekelendirin13.
  4. Glial fibril asidik protein (GFAP; retinadaki astrositler ve Müller hücreler için güvenilir bir belirteç) için bir antikor ile kuluçkaya yatır ve ardından Alexa Fluor 555 konjuge sekonder antikor inkübasyonu.
  5. Retinadaki çekirdeği boyamak için DAPI (4′, 6-diamidino-2-fenylindole) kullanın. Sinyalleri floresan mikroskopla görselleştirin.
  6. Morfoloji puanlamasını daha önce açıklandığı gibi 4 puanlık bir derecelendirme ölçeğiyle değerlendirin13,18: 0 = sinyal yok, 1 = ganglion hücre katmanında (GCL) birkaç pozitif glial son ayak, 2 = GCL'den dış nükleer katmana (ONL) ulaşan birkaç etiketli süreç ve GCL'den ONL'ye ulaşan en etiketli süreçler.

8. Elektroretinografi (ERG)

  1. tBCCAO'dan 3 ve 7 gün sonra, daha önce açıklandığı gibi bir Ganzfeld kubbesi, satın alma sistemi ve LED uyarıcılar kullanarak ERG gerçekleştirin9.
  2. Bir gecede karanlık adaptasyonu takiben, fareleri loş kırmızı ışık altında MMB kombinasyonu ile uyuşturun.
  3. Gözbebeklerini genişletmek için %0,5 tropikamid ve %0,5 fenilefrin gibi karışık bir çözelti kullanın.
  4. Aktif elektrotları kontakt lense yerleştirin ve referans elektrotları ağız içine yerleştirin.
  5. Her hayvanın her iki gözünden ERG yanıtları alın.
  6. Çeşitli uyaranlarla karanlık adaptasyon altında scotopik yanıtları kaydedin.
  7. Bir dalganın genliklerini taban çizgisine ve en düşük dalga noktasına kadar ölçün.
  8. B dalgasının genliklerini bir dalganın en düşük noktasından b dalgasının zirvesine kadar ölçün.
  9. İşlem sırasında ısı pedlerini kullanarak tüm fareleri sıcak tutun.

9. Optik tutarlılık tomografisi (OCT)

  1. tBCCAO'dan 2 hafta sonra, daha önce bildirildiği gibi SD-OCT sistemini kullanarak OCTgerçekleştirin8,9.
  2. Ölçüm için, fareleri% 0.5 tropikamid ve% 0.5 fenilefrin karışımı ile midriasis'e ve MMB karışımı ile genel anesteziye tabi edin.
  3. Ekvatoral en-face tarama dilimlerinden B tarama görüntüleri elde edin.
  4. Retinaları optik sinir kafasından 0.2, 0.4 ve 0.6 mm'de inceleyin.
  5. Retina sinir lifi tabakasından (NFL) dış sınırlayıcı zara (ELM) kadar retina kalınlığını ölçün ve ölçülen değerlerin ortalamasını tek bir farenin retina kalınlığı olarak düşünün.
  6. Sonuçları örümcek diyagramları olarak çizin.

Sonuçlar

FITC-dektranın 2 dakika boyunca sistemik dolaşımından sonra, sham ile çalışan farelerde ve tBCCAO tarafından işletilen farelerde sol ve sağ retinaların retinal vaskülatları incelendi (Ek Şekil 1). FITC-dektran, sham tarafından işletilen farelerde hem retinalarda hem de tBCCAO tarafından işletilen farelerde sol retinada tamamen görünürken, tBCCAO tarafından işletilen farelerde sağ retinada kısmen tespit edilebilirdi.

TBCCAO'dan sonra göz kapağı sarkm...

Tartışmalar

Çalışmada, tBCCAO'nun basit dikişler ve bir kelepçe kullanarak retina iskemisini ve eşlik eden retina disfonksiyonu indükleyebileceğini gösterdik. Ayrıca, retina iskemisinin bir fare modelinin geliştirilmesi için mevcut protokolümüzü gösterdik retina iskemisinin geliştirilmesi için önceki protokollere kıyasla daha kolay ve hızlıdır retinal iskemik yaralanma modelleri2,3,7.

Anato...

Açıklamalar

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Teşekkürler

Bu çalışma, Eğitim, Kültür, Spor, Bilim ve Teknoloji Bakanlığı'ndan (MEXT) Grant-in-Aid for Scientific Research (KAKENHI) (Toshihide Kurihara'ya 18K09424 ve Yukihiro Miwa'ya 20K18393) tarafından desteklendi.

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
Atipamezole hydrochlorideZenoaqAntisedanFor anti-anesthesia
Applied Biosystems 7500 FastApplied Biosystems-For qPCR
Butorphanol tartrateMeiji Seika PharmaVetorphaleFor anesthesia
BZ-II AnalyzerKEYENCE-For an image merge
BALB/cAJc1CLEA-Mouse strain
β-Actin (8H10D10) Mouse mAbCST3700For western blot
Clamp ForcepWorld Precision InstrumentsWPI 500451For surgery
Dumont forceps #5Fine Science Tools11251-10For surgery
DAPI solutionDojindo340-07971For IHC
Envisu SD-OCT systemLeicaR4310For OCT
FITC-dextranMerkFD2000SFor retinal blood perfusion
Fluorescence microscopeKEYENCEBZ-9000For fluorescence detection
Gatifloxacin hydrateSenju PharmaceuticalGachifuroFor anti-bacterial infection
GFAP Monoclonal Antibody (2.2B10)Thermo13-0300For IHC
Heating padMarukanRH-200For surgery
HIF-1α (D1S7W) XP Rabbit mAbCST36169For western blot
ImageQuant LAS 4000 miniGE Healthcare-For chemiluminescence
MidazolamSandoz K.KSANDOZFor anesthesia
Microtome Tissue-Tek TEC 6Sakura-For sectioning
MedetomidineOrion CorporationDomitorFor anesthesia
Needle holderHandayaHS-2307For surgery
PuRECMAYO Corporation-For ERG
ScissorFine Science Tools91460-11For surgery
Sodium hyaluronateSanten PharmaceuticalHyaleinFor eye lubrication
Tropicamide/Penylephrine hydrochlorideSanten PharmaceuticalMydrin-PFor mydriasis
6-0 silk sutureNatsumeE12-60N2For surgery

Referanslar

  1. Anderson, B. Ocular effects of changes in oxygen and carbon dioxide tension. Transactions of the American Ophthalmological Society. 66, 423-474 (1968).
  2. Ingberg, E., Dock, H., Theodorsson, E., Theodorsson, A., Ström, J. O. Method parameters' impact on mortality and variability in mouse stroke experiments: a meta-analysis. Scientific Reports. 6 (1), 21086 (2016).
  3. Atochin, D. N., Clark, J., Demchenko, I. T., Moskowitz, M. A., Huang, P. L. Rapid Cerebral Ischemic Preconditioning in Mice Deficient in Endothelial and Neuronal Nitric Oxide Synthases. Stroke. 34 (5), 1299-1303 (2003).
  4. Allen, R. S., et al. Severity of middle cerebral artery occlusion determines retinal deficits in rats. Experimental Neurology. 254, 206-215 (2014).
  5. Steele, E. C., Guo, Q., Namura, S. Filamentous Middle Cerebral Artery Occlusion Causes Ischemic Damage to the Retina in Mice. Stroke. 39 (7), 2099-2104 (2008).
  6. Minhas, G., Morishita, R., Anand, A. Preclinical models to investigate retinal ischemia: advances and drawbacks. Frontiers in Neurology. 3, 75 (2012).
  7. McColl, B. W., Carswell, H. V., McCulloch, J., Horsburgh, K. Extension of cerebral hypoperfusion and ischaemic pathology beyond MCA territory after intraluminal filament occlusion in C57Bl/6J mice. Brain Res. 997 (1), 15-23 (2004).
  8. Jiang, A. X., et al. Inducement and Evaluation of a Murine Model of Experimental Myopia. Journal of Visualized Experiments. (143), e58822 (2019).
  9. Miwa, Y., et al. Pharmacological HIF inhibition prevents retinal neovascularization with improved visual function in a murine oxygen-induced retinopathy model. Neurochemistry International. 128, 21-31 (2019).
  10. Adams, S., Pacharinsak, C. Mouse Anesthesia and Analgesia. Current Protocols in Mouse Biology. 5 (1), 51-63 (2015).
  11. Speetzen, L. J., Endres, M., Kunz, A. Bilateral Common Carotid Artery Occlusion as an Adequate Preconditioning Stimulus to Induce Early Ischemic Tolerance to Focal Cerebral Ischemia. Journal of Visualized Experiments. (75), e4387 (2013).
  12. Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. Modeling stroke in mice - middle cerebral artery occlusion with the filament model. Journal of Visualized Experiments. (47), e2423 (2011).
  13. Lee, D., Kang, H., Yoon, K. Y., Chang, Y. Y., Song, H. B. A mouse model of retinal hypoperfusion injury induced by unilateral common carotid artery occlusion. Experimental Eye Research. 201, 108275 (2020).
  14. Li, S., et al. Retro-orbital injection of FITC-dextran is an effective and economical method for observing mouse retinal vessels. Molecular Vision. 17, 3566-3573 (2011).
  15. Tual-Chalot, S., Allinson, K. R., Fruttiger, M., Arthur, H. M. Whole Mount Immunofluorescent Staining of the Neonatal Mouse Retina to Investigate Angiogenesis In vivo. Journal of Visualized Experiments. (77), e50546 (2013).
  16. Lee, D., et al. A Fairy Chemical Suppresses Retinal Angiogenesis as a HIF Inhibitor. Biomolecules. 10 (10), (2020).
  17. Tomita, Y., et al. Pemafibrate Prevents Retinal Pathological Neovascularization by Increasing FGF21 Level in a Murine Oxygen-Induced Retinopathy Model. International Journal of Molecular Sciences. 20 (23), 5878 (2019).
  18. Yamamoto, H., Schmidt-Kastner, R., Hamasaki, D. I., Yamamoto, H., Parel, J. M. Complex neurodegeneration in retina following moderate ischemia induced by bilateral common carotid artery occlusion in Wistar rats. Experimental Eye Research. 82 (5), 767-779 (2006).
  19. Cheng, L., Yu, H., Yan, N., Lai, K., Xiang, M. Hypoxia-Inducible Factor-1α Target Genes Contribute to Retinal Neuroprotection. Frontiers in Cellular Neuroscience. 11, 20 (2017).
  20. Mole, D. R., et al. Genome-wide association of hypoxia-inducible factor (HIF)-1alpha and HIF-2alpha DNA binding with expression profiling of hypoxia-inducible transcripts. The Journal of Biological Chemistry. 284 (25), 16767-16775 (2009).
  21. Majmundar, A. J., Wong, W. J., Simon, M. C. Hypoxia-Inducible Factors and the Response to Hypoxic Stress. Molecular Cell. 40 (2), 294-309 (2010).
  22. Newman, E. A. Glial cell regulation of neuronal activity and blood flow in the retina by release of gliotransmitters. Philosophical Transactions of the Royal Society B: Biological Sciences. 370 (1672), (2015).
  23. Vecino, E., Rodriguez, F. D., Ruzafa, N., Pereiro, X., Sharma, S. C. Glia-neuron interactions in the mammalian retina. Progress in Retinal and Eye Research. 51, 1-40 (2016).
  24. Symonds, C. The Circle of Willis. British Medical Journal. 1 (4906), 119 (1955).
  25. Lo, W. B., Ellis, H. The circle before willis: a historical account of the intracranial anastomosis. Neurosurgery. 66 (1), 7-18 (2010).
  26. Yang, G., et al. C57BL/6 strain is most susceptible to cerebral ischemia following bilateral common carotid occlusion among seven mouse strains: selective neuronal death in the murine transient forebrain ischemia. Brain Research. 752 (1), 209-218 (1997).
  27. Farkas, E., Luiten, P. G. M., Bari, F. Permanent, bilateral common carotid artery occlusion in the rat: A model for chronic cerebral hypoperfusion-related neurodegenerative diseases. Brain Research Reviews. 54 (1), 162-180 (2007).
  28. Morris, G. P., et al. A Comparative Study of Variables Influencing Ischemic Injury in the Longa and Koizumi Methods of Intraluminal Filament Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice. PLOS ONE. 11 (2), 0148503 (2016).
  29. Tsuchiya, D., Hong, S., Kayama, T., Panter, S. S., Weinstein, P. R. Effect of suture size and carotid clip application upon blood flow and infarct volume after permanent and temporary middle cerebral artery occlusion in mice. Brain Research. 970 (1-2), 131-139 (2003).
  30. Kaelin, W. G., Ratcliffe, P. J. Oxygen Sensing by Metazoans: The Central Role of the HIF Hydroxylase Pathway. Molecular Cell. 30 (4), 393-402 (2008).
  31. Pauly, M., Sruthi, R. Ptosis: evaluation and management. Kerala Journal of Ophthalmolgy. 31 (1), 11-16 (2019).
  32. Averbuch-Heller, L., Leigh, R. J., Mermelstein, V., Zagalsky, L., Streifler, J. Y. Ptosis in patients with hemispheric strokes. Neurology. 58 (4), 620 (2002).
  33. Dutton, J. . Atlas of clinical and surgical orbital anatomy, second edition. 113, 1364 (2011).
  34. Ritzel, R. M., et al. Early retinal inflammatory biomarkers in the middle cerebral artery occlusion model of ischemic stroke. Molecular Vision. 22, 575-588 (2016).
  35. Crespo-Garcia, S., et al. Individual and temporal variability of the retina after chronic bilateral common carotid artery occlusion (BCCAO). PLOS ONE. 13 (3), 0193961 (2018).
  36. Qin, Y., et al. Functional and morphologic study of retinal hypoperfusion injury induced by bilateral common carotid artery occlusion in rats. Scientific Reports. 9 (1), 80 (2019).
  37. Block, F., Grommes, C., Kosinski, C., Schmidt, W., Schwarz, M. Retinal ischemia induced by the intraluminal suture method in rats. Neuroscience Letters. 232 (1), 45-48 (1997).
  38. Allen, R. S., et al. Progesterone Treatment in Two Rat Models of Ocular Ischemia. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 56 (5), 2880-2891 (2015).
  39. Miller, R. F., Dowling, J. E. Intracellular responses of the Müller (glial) cells of mudpuppy retina: their relation to b-wave of the electroretinogram. Journal of Neurophysiology. 33 (3), 323-341 (1970).
  40. Block, F., Grommes, C., Kosinski, C., Schmidt, W., Schwarz, M. Retinal ischemia induced by the intraluminal suture method in rats. Neuroscience Letters. 232 (1), 45-48 (1997).
  41. Lee, J. H., Shin, J. M., Shin, Y. J., Chun, M. H., Oh, S. J. Immunochemical changes of calbindin, calretinin and SMI32 in ischemic retinas induced by increase of intraocular pressure and by middle cerebral artery occlusion. Anatomy & Cell Biology. 44 (1), 25-34 (2011).
  42. Li, S. Y., et al. Lycium barbarum polysaccharides reduce neuronal damage, blood-retinal barrier disruption and oxidative stress in retinal ischemia/reperfusion injury. PLOS ONE. 6 (1), 16380 (2011).
  43. Furashova, O., Matthé, E. Retinal Changes in Different Grades of Retinal Artery Occlusion: An Optical Coherence Tomography Study. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 58 (12), 5209-5216 (2017).
  44. Zadeh, J. K., et al. Short-Time Ocular Ischemia Induces Vascular Endothelial Dysfunction and Ganglion Cell Loss in the Pig Retina. International Journal of Molecular Sciences. 20 (19), (2019).
  45. Liu, S., Zhen, G., Meloni, B. P., Campbell, K., Winn, H. R. Rodent stroke model guidelines for preclinical stroke trials (1st edition). Journal of Experimental Stroke & Translational Medicine. 2 (2), 2-27 (2009).
  46. Tang, Y., et al. Hypothermia-induced ischemic tolerance is associated with Drp1 inhibition in cerebral ischemia-reperfusion injury of mice. Brain Research. 1646, 73-83 (2016).
  47. Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 13 (4), 683-692 (1993).
  48. Pula, J. H., Yuen, C. A. Eyes and stroke: the visual aspects of cerebrovascular disease. Stroke and Vascular Neurology. 2 (4), 210 (2017).
  49. Steele, E. C., Guo, Q., Namura, S. Filamentous middle cerebral artery occlusion causes ischemic damage to the retina in mice. Stroke. 39 (7), 2099-2104 (2008).
  50. Sim, D. A., et al. The Effects of Macular Ischemia on Visual Acuity in Diabetic Retinopathy. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 54 (3), 2353-2360 (2013).
  51. Wu, K. K., Huan, Y. Streptozotocin-induced diabetic models in mice and rats. Current Protocols in Pharmacology. , (2008).
  52. Mubarak, A., Hodgson, J. M., Considine, M. J., Croft, K. D., Matthews, V. B. Supplementation of a high-fat diet with chlorogenic acid is associated with insulin resistance and hepatic lipid accumulation in mice. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 61 (18), 4371-4378 (2013).
  53. Ansari, S., Azari, H., McConnell, D. J., Afzal, A., Mocco, J. Intraluminal middle cerebral artery occlusion (MCAO) model for ischemic stroke with laser doppler flowmetry guidance in mice. Journal of Visualized Experiments. (51), e2879 (2011).
  54. Hedna, V. S., et al. Validity of Laser Doppler Flowmetry in Predicting Outcome in Murine Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion Stroke. Journal of Vascular and Interventional Neurology. 8 (3), 74-82 (2015).

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

T pSay 165Karotis arter t kanmaElektroretinografiDeneysel modellerHipoksiskemiOptik tutarl l k tomografisiRetinaReperf zyon

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Bize Ulaşın

KÜTÜPHANEYE TAVSİYE ET

JoVE HABER BÜLTENLERİ

Araştırma

Eğitim

Yazarlar

Kütüphaneciler

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır