Kemirgen Modellerinde Nöromüsküler Kavşak İletimini Değerlendirmek için Uyarılmış Tek Fiber Elektromiyografisi (SFEMG)

Özet

Bu çalışmada, kemirgen modellerinde nöromüsküler kavşak (NMJ) iletiminin in vivo ölçümüne izin vermek için rafine edilmiş bir tek lif elektromiyografi (SFEMG) protokolü gösteriyoruz. Sıçan gastroknemius kasında NMJ iletim değişkenliğinin ve başarısızlığının nicelleştirilmesine izin vermek için SFEMG tekniğine adım adım bir yaklaşım tanımlanmıştır.

Özet

Sinir sistemi ve kas arasındaki son bağlantı olarak, nöromüsküler kavşaktaki (NMJ) iletim normal motor fonksiyon için çok önemlidir. Tek lif elektromiyografisi (SFEMG), NMJ iletimini değerlendirmek için istemli kasılmalar veya sinir stimülasyonları sırasında tek kas lifi aksiyon potansiyeli tepkilerini ölçen klinik olarak ilgili ve hassas bir tekniktir. NMJ iletiminin değerlendirilmesi ve miktarının belirlenmesi iki parametreyi içerir: titreşim ve engelleme. Jitter, ardışık tek fiber aksiyon potansiyelleri (SFAP'ler) arasındaki zamanlama (gecikme) değişkenliğini ifade eder. Engelleme, NMJ iletiminin bir SFAP yanıtı başlatmadaki başarısızlığını belirtir. SFEMG, klinik ortamlarda iyi bilinen ve hassas bir test olmasına rağmen, klinik öncesi araştırmalarda uygulaması nispeten seyrek olmuştur. Bu rapor, kemirgen modellerinde titreme ve blokajı ölçmek için uyarılmış SFEMG'nin gerçekleştirilmesinde kullanılan adımları ve kriterleri özetlemektedir. Bu teknik, sağlık, yaşlanma ve hastalık bağlamında NMJ işlevi hakkında bilgi edinmek için klinik öncesi ve klinik çalışmalarda kullanılabilir.

Giriş

Tek lif elektromiyografisi (SFEMG) ilk olarak 1960'larda Stålberg ve Ekstedt tarafından, öncelikle kas yorgunluğunu incelemek için bireysel kas liflerinden aksiyon potansiyellerini belirlemek ve analiz etmek için geliştirilmiştir¹. SFEMG, nöromüsküler kavşak (NMJ) iletiminin değerlendirilmesi için en hassas klinik tekniktir². SFEMG, tek fiber aksiyon potansiyellerinin (SFAP'ler^{) seçici} olarak kaydedilmesiyle gerçekleştirilir3. Yaşlanma ^4,5 ve miyastenia gravis ve amyotrofik lateral sk....

Protokol

Tüm protokoller, Missouri Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından belirlenen düzenlemelere uygun olarak onaylandı ve uygulandı.

1. Hayvan hazırlama ve anestezi uygulaması

1. Uygun kişisel koruma ekipmanı giyin.
2. İşlemden önce, kilo bazlı ilaçlar ve ventilatör ayarları için uygun dozu belirlemek için farenin ağırlığını ölçün.
3. % 3 -% 5 inhale izofluran ile anesteziyi indükleyin. Yeterli bir anestezi seviyesi oluşturulduktan sonra, fareyi yüzüstü pozisyonda konumlandırın ve% 1 -% 3 inhale izofluran ile anesteziyi sürdürün.
4. Geri ç....

Tartışmalar

SFEMG, NMJ hastalığının otoimmün, edinilmiş ve genetik formlarından şüphelenilen hastalarda tanısal testler için yaygın olarak kullanılır. SFEMG, NMJ bozukluğu, myastenia gravis^20,21'in tanısı için en hassas test olarak kabul edilir. Tekrarlayan sinir stimülasyonu (RNS), klinik tanı testlerinde daha yaygın olarak kullanılan ve bir periferik sinirin bir dizi uyaranla uyarılmasını ve innerve kasın toplam b.......

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
27 G Reusable Single Fiber Needle Electrode	Technomed	202860-000	singlefiber recording electrode
2 mL Glass Syringe	Kent Scientific Corporation	SOMNO-2ML
Detachable Cable	Technomed	202845-0000	to connect the recorder electrode to the electrodiagnostic machine
Disposable 2" x 2" disc electrode with leads	Cadwell	302290-000	ground electrode
disposable monopolar needles 28 G	Technomed	202270-000	cathode and anode stimulating electrodes
EMG needle cable (Amp/stim switch box)	Cadwell	190266-200	to connect monopolar electrodes to electrodiagnostic stimulator
Helping Hands alligator clip with iron base	Radio Shack	64-079	Maintaining recording electrode placement
Isoflurane (250 mL bottle)	Piramal Healthcare	NA
monoject curved tip irrigating syringe	Covidien	81412012	utilized for application of electrode gel
PhysioSuite Physiological Monitoring System with RightTemp Homeothermic Warming	Kent Scientific Corporation	PS-RT	Includes infrared warming pad, rectal probe, and pad temperature probe
Pro trimmer Pet Grooming Kit	Oster	078577-010-003	clippers for hair removal
Rat Endotracheal Tubes (16 G)	Kent Scientific Corporation
Rocoronium Bromide	Sigma	PHR2397-500MG	neuromuscular blocker agent
Sierra Summit EMG system	Cadwell Industries, Inc., Kennewick, WA	NA	portable electrodiagnostic system
SomnoSuite Low-Flow Digital Anesthesia System	Kent Scientific Corporation	SOMNO	Includes anti-spill, anti-vapor bottle top adapter; Y adapter tubing; charcoal scavenging filter
Veterinarian petroleum-based ophthalmic ointment	Puralube	26870	applied during anesthesia to avoid corneal injury