이 연구는 부여 NIHM R01 MH091816과 TDG에 R21 MH084043에 의해 지원되었습니다.

1. 재료 및 방법 1.1. 물 탱크 이 자료는 유리보다 탱크와 사고의 빈번한 움직임을 견딜 수있는 같은 원통형 탱크 (30cm 높이 X 20cm의 직경)은 투명한 플렉시의 건설에 우리 연구실에서 마우스 강제 수영 시험 (FST)을 위해 필요합니다. 수위가 바닥에서 15cm이며, 물의 볼륨이 생쥐에 걸쳐 일관성이 있는지 확인하기 위해 탱크에 표시된해야합니다. 탱크의 수는적으로 첫 번째 세트를 사용하는 동안 두 번째 수조 세트가 가득 수 있도록 한 번에 테스트중인 생쥐의 숫자로 최소한 두 배나 많은하여야한다. 탱크의 크기는 생쥐가 수영 테스트가 진행되는 동안, 발에이나 꼬리와 함께하거나, 탱크의 바닥을 만지​​는 수 없습니다되는 방법으로 선택하여야한다. 탱크의 높이가 수조에서 탈출에서 쥐를 방지하기 위해 충분히 높은되어야합니다. 유의하시기 바랍니다탱크의 직경과 수심이 생쥐의 행동을 (이러한 문제에 대한 자세한 분석 1-3 참조) 변경 조정할 수 있습니다 중요한 매개 변수는 것을. 1.2. 온도계 온도의 빠른 측정 테스트를 실시하기 위해 필요한 시간의 양을 감소 이후 물 모성 적외선 온도계는 것이 바람직합니다. 그러나, 유리 수은 온도계는이 작업에 대한 충분한 것입니다. 1.3. 타이머 1.4. 비디오 녹화 장치 우리는 삼각대 지원 비디오 카메라를 사용합니다. 이 검사는 일반적으로 동시에 테스트하고 여러 동물과 관련된 때문에, 라이브 점수는 매우 어려운하고 권장되지 않습니다 것입니다. 비디오 카메라는 행동 채점을 위해 나중에 사용됩니다 품질의 사진을 렌더링하는만큼 충분히 높은 해상도로 기록한다. 항상 인제하기 전에 카메라에 충분한 녹음 메모리가 있는지 확인g 테스트. 우리는 동영상의 디지털 전송을 위해 수 있도록, 기계 매체의 사용 (즉, 비디오 카세트)가없는 디지털 기록하는 비디오 카메라를 사용합니다. 오버헤드 형광 조명과 실험실 환경에서 발생할 수있는 탱크에 과도한 반사가있다면, 당신은 카메라와 렌즈 편광 필터를 사용할 수 있습니다. 1.5. 분할기 우리 연구실에서는 디바이더 두 세트 (35cm X 높이 22cm X 폭 22cm 깊이)을했습니다. 이러한 세 가지 벽 직사각형이며 모두 배경으로하고 테스트하는 동안 서로를보고 잠재적으로 자신의 행동을 변경에서 마우스를 방지하기 위해 탱크 사이에 디바이더로 사용됩니다. 한 세트 흰둥이와 밝은 색깔의 동물에 대한 검정 수 있으며, 다른 설정은 높은 콘트라스트를 렌더링하기 위해 어두운 색깔의 동물에 대한 색 빛이하실 수 있습니다. 실험자들은 카메라 이미지를 변경하거나, 주요 D를 렌더링 있도록 디바이더의 표면이 지나치게 반사되지 않도록해야조명 수준 사이 ifferences. 1.6. 화이트 노이즈 생성기 이것은 갑자기 큰 소리가 잠재적으로 동물을 놀라게 것이 들어있을 수있는 실험실 환경에서 필요합니다. 소음 발생기는 간헐적인 방해 소리를 마스크합니다. 백색 잡음 발생기의 볼륨 레벨이 다른 주변과 예상치 못한 소음 이상으로 선택해야합니다. 우리의 실험 공간에서 주위 소음 수준 (작동 백색 잡음 발생기 제외) 60dB입니다. 탱크가 배치되는 위치에 활성화된 백색 잡음 발생기와 함께 총 소음 수준은 70-72dB 있습니다. 그러나 이러한 수치는 예를 들어 전용으로 제공하는 것을인지해야하고, 각 연구소는 독특한 환경과 상황에 따라 권리가 소음을 선택해야합니다. 1.7. 건조 종이와 가열 램프 자신의 홈 연습장 동물을 반환하기 전에 건조하는 것이 중요합니다그들 부드럽게 종이 타올을 사용하고 그것은 저체온증을 방지하기 위해 (노출 온도가 32을 초과하지 않는 확신 ° C) 가열 램프를 사용하는 도움이됩니다. 2. 행동 절차 <ol><li> 전체 실험 설계는 실험에 특정 변수 사이의 적절한 counterbalancing을 반영해야합니다. 예를 들어, 실험에서 우리는 똑같이 모든 FST 세션 (즉, 넷 치료 그룹이있다면, 각 각 세션에 표시됩니다)에서 각 그룹을 대표하려고합니다. 또한, 마우스가 회전되며, 각 치료 그룹에서 같은 것을 마우스는 각 세션에서 다른 탱크에 배치됩니다. </li><li> 카메라와 위치에 디바이더를 놓습니다. 카메라는 생쥐의 가능한 가장 높은 해상도를 얻기 위해서는 최대한하여야한다. </li><li> 탱크는 탱크 벽에 표시된 결정 수준으로 실내 온도 (23-25​​ ° C)에서 설정 수돗물로 가득해야합니다. 귀하의 시설은 일정한 고온 / 추위 WA가없는 경우ter, 당신은 신속하게 적당한 온도로 물을 가지고 뜨거운 물 및 / 또는 얼음을 준비 할 수 있습니다. 적외선 온도계로 물의 온도를 확인합니다. 뜨거운 물의 수준에 대한 하나 냉수의 추가에 대한 두 번째 마크 - - 또는 온수 및 냉수의 온도가 시설에서 지속하는 경우, 당신은 탱크 이마르크에 그릴 수있는 올바른 최종 접근로 빠르게 수온. </li><li> 사용중인 경우에는 생쥐가 테스트 룸으로 도입되기 전에, 백색 잡음 발전기를 시작합니다. 백색 소음의 수준은 외부 소음을 마스크로 충분합니다. 높은 볼륨을 방지하고 백색 잡음 같은 수준의 모든 동물에 사용되고 있는지 확인하십시오. </li><li> 테스트 룸에 동물을 가져와. 동물이있는 식민지 룸과 테스팅 룸이 인접해 있거나 서로 매우 가까운 경우, 주위 조건은 유사하며 새장 이동 중에 방해가 더 acclimation 아름다운 요정 후, 최소한 없습니다OD가 필요합니다. 그렇지 않으면, acclimation의 기간 (일반적으로 최소한 1 시간)에 대한 테스트 룸에 동물을 배치. acclimation 기간이 필요한 경우, acclimated 동물이 같은 방에 동시에 테스트중인 생쥐에 의해 영향을받지 않습니다 있는지 확인하십시오. 후각과 초음파 단서가 같은 방에 배치 다른 동물에 의해 감지 수 있습니다 양해하여 주시기 바랍니다. </li><li> 물 탱크에 동물을 배치하기 전에 비디오 녹화를 시작합니다. </li><li> 꼬리로 동물을 보유하고 부드럽게 천천히 물에 넣습니다. 생쥐가 물에되면 천천히 꼬리를 놓습니다. 일반적으로,이 절차를 사용하면 물 속에 가라 앉되는 동물의 머리를 방지할 수 있습니다. </li><li> 녹음의 방해가 최소화됩니다되는 순서대로 탱크에있는 생쥐를 놓습니다. 이 명령은 물론, 그룹 및 실험 디자인에 맞는 다른 요건의 counterbalancing 함께 결정되어야합니다. </li><li>일단 모든 생쥐는 스톱워치의 탱크 - 시작 카운트 다운에 있습니다. 생쥐에 대한 일반적인 테스트 길이는 FST 여섯 분 거리에 있습니다. </li><li> 테스트하는 동안 당신이 동물에서 적당한 거리에 있으며, 동물에 의해 발견 될 수있는 움직임이나 소리를하지 않는 특정 수 있습니다. 마우스는 쉽게 어느 생쥐이나 수영 행위에 대한 그들의 영향의 이전 지식없이 테스트중인 새로운 화합물의 새 변종은 실험자들이 더 가깝게 동물을 모니터링해야하는 경우 그러나, 물에 떠 있습니다. 쥐와는 달리, 마우스는 일반적으로 그러나 다이빙의 경우 마우스가 탱크에서 제거되어야 FST 동안 다이빙하지 않습니다. 실험자들은 생쥐가 마우스 동작을 수영과 부동 유지할 수 있으며, 필요한 경우 시험을 중지되는 경우의 비디오에 의해 모니터링되어야 방을 떠나면. </li><li> 육분 시험 기간의 끝에 녹음을 중지합니다. 우리가 실험실에서, 우리는 매우 끝에있는 동물을 식별하는 카메라 앞에 메모를 표시각 기록. 정체성에만 녹음의 매우 끝 부분에 표시되기 때문에이 방법을 사용하면 이후에 녹음을 채점 개인은 동물의 신원을 알 수 없습니다. 이것은 나중에 레코딩에 관한 발생할 수있는 문제를 유지하는 식별 및 기록을 방지할 수 있습니다. 에 관계없이 사용되고 기록 유지 전략, 그것은 분명 동물을 파악해야하며 나중에 그룹 과제의 지식을 필요에서 시험을 채점 개인을 방지. </li><li> 당신이 그들을 넣어 부드럽게 돌려 homecage에 건조 종이와 장소 그들을 건조하는 것과 같은 순서로 자신의 꼬리로 물을에서 동물을 제거합니다. </li></ol> 3. 행동 분석 <ol><li> FST의 마우스 버전은 긴 6 분 처음부터 끝까지, 일반적입니다. 그러나, 일반적으로 시험은 마지막 네 분 분석하고 있습니다. 이것은 대부분의 생쥐는 FST의 시작 부분에서 매우 활성화되어있다는 사실로 인해이며, P치료 otential 효과는 처음 두 분 동안 드러나지 수 있습니다. </li><li> 저희 연구실에서는 PC에 카메라에서 직접 비디오 파일을 업로드하고 PC에 분석을 않습니다. </li><li> 행동 분석하는 동안, 각 쥐가 모바일 지출되는 시간이 측정됩니다. 이동성 시간의 총 금액은 다음 테스트 시간의 240초에서 빼서는 다음 부동 시간으로 적혀있다. 그것이 직접 부동 시간을 측정 가능하지만, 저희 연구실에 우리는 쉽게 오히려 그러한 움직임의 부족보다 적극적인 움직임을 감지하고 측정 발견했다. </li><li> FST의 행동 분석 및 일반적으로 관찰자 사이의 변화의 가장 큰 소스의 가장 중요한 부분은 타고난 이동성으로 계산됩니다 움직임의 정확한 식별합니다. FST의 이동성을위한 우리의 운영 정의는 신체의 균형과 물 4 위에 머리를 유지하는 데 필요한 이외의 운동이다. 마우스는 일반적으로 쉽게, 그러나 그들이 아직 그들의 시체를 균형 물 위에 머리를 유지하기 위해 작은 움직임을 참고 물에 떠. 이러한 행동은 탈출하고 이동성으로 득점하지 않아야 시도되지 않습니다. 또한, 이동성의 단일 시합 후,에도 불구하고 본질적으로 고정되어 있으며, 마우스는 아직 추진력의 결과로 물 속에 표류 수 있습니다. 이러한 움직임은 또한 이동성으로 채점되지 않습니다. </li><li> 저희 연구실에서는, 우리는 시간 측정을위한 화면 스톱워치 소프트웨어 (Xnote 스톱워치, dnSoft 연구 그룹)을 사용합니다. 두 개의 스톱워치는 화면에 사용됩니다. 때 행동 분석 기간이 끝나는 첫 번째 스톱워치가 다운 2백40초 및 경고에서 관찰자로 계산됩니다. 두 번째 스톱워치는 시간이 모바일 보낸 측정합니다. 일부 스톱워치 소프트웨어는 화면에 스톱워치가 키보드로 제어할 수 있도록 기능을 시작하고 중지 키를 할당할 수있는 능력이 있습니다. 우리가 실험실에서 대신 일반 키보드의, 우리는 일반적으로 알려진 입력 장치를 사용하여스톱워치를 제어하는​​ &#39;gamepad. </li><li> 테스트 화면에있는 하나 이상의 마우스가있는 경우, 부동을 계량하기 위해 PC를 사용하면 있도록 (당신은 다른 프로그램 윈도우를 사용하거나 물리적으로 종이 화면을 커버 가능) 다른 동물을 커버하는 것이 좋습니다 그들의 움직임은 관찰자주의를 분산하지 않습니다. </li><li> 화면에 스톱워치를 사용하는 경우, 모든하지만 스톱워치의 밀리초 소수 커버 특정 수 있습니다. 이에 대한 이유는 아직 시계가 실행 중이거나 실행되지 않는 있는지 확인하는 기능을 허용하면서, 관찰자​​의 편견을 방지하는 것입니다. 관찰자는 동물의 그룹 과제에 장님 동안 생쥐의 이동성의 수준에 대한 일반적인 생각을해야하기 때문에, 그녀가 특정 마우스 경과 이동성 시간의 총 금액을 볼 수있다면 현상 바이어스가있을 수 있습니다 전에 분석 세션 완료. 스톱워치를 덮고함으로써, 그녀는 스톱워치 어떤 시점에서 켜거나지만 줘야해 여부를 알 수 있습니다난 총 시간 경과 따라서 어떤 편견에 의해 영향을 수없는 알지 없습니다. </li><li> 시험 동물에서 데이터를 수집하기 시작하기 전에 간 관찰자의 신뢰성 시험은 모든 새 관찰자에 대해 실시한다. 저희 연구실에서는 각각의 새 관찰자 먼저 경험 관찰자 점수를 감시합니다. 부동의 이동성을 차별화하는 데 새로운 관찰자가 탄력을 신뢰하면, 그들은 다음 경험 관찰자가 관찰하고 실수를 지적과 점수. 이 단계가 성공적으로 완료되면, 새로운 관찰자 우리가 훈련을 위해 저희 연구실에 보관하는 것이 FST 동영상의 특정 집합을 분석합니다. 상호 관찰자 간 상관 관계가 높은 수준은 경험이 풍부한 관찰자로 얻은 후에만 실제 실험에 FST 비디오를 분석 조사 시작 않습니다. 우리는 보관이 훈련 분석의 데이터는 나중에 사용하기 위해 실험실에 대한 내부 기준을 구성합니다. 우리는 그들이 mobi을 표현하는 방식으로 변종 사이의 차이를 관찰했습니다lity (및 부동) 행동하고, 남녀 사이의 의미 부동 시간. 새로운 변형, 성별, 또는 유전자 조작 마우스 모델 실험실에서 테스트하는 경우는 다시 신뢰성 분석의 유형을 실시하는 것이 필요합니다. </li></ol> 4. 대표 결과 자신의 기준 부동과 특정 약물 5-11에 대응 측면에서 유전자 뚜렷한 근친과 outbred 마우스 종자 간의 표시된 차이가 있습니다. 예를 들어, 마우스 종자의 패널 (그림 1) 5 리튬하기 위해 차동 약은 같은 답변을 확인. 본 실험의 실험 자세한 내용은 수 외. 2011 년 5 출판하고 있습니다. <img src="/files/ftp_upload/3638/3638fig1.jpg" alt="그림 1" /> 그림 1. 강제 수영 시험에서 부동 시간 (초) 5 시간 다양한 근친과 OU에 염분, 200, 300, 또는 400 밀리그램 / kg의 단일 IP 주사 후마우스 변종을 tbr​​ed. * : P &lt;0.05, ** : P &lt;0.01, *** : P &lt;0.001은 식염수 그룹 Dunnett의 게시물 특별 시험에 비해 상당한 차이를 나타내는. 데이터는 ± SEM 의미로 표현됩니다. 각 변형에 대한 그룹당 동물의 개수 6-8 (5 재현 그림)입니다. 모든 마우스 종자는 FST에 적합합니다. 같은 블랙 스위스, NIH 스위스, 그리고 FVB / NJ 같은 일부 변종 따라서 바닥 효과 (그림 1) 5를 나타내는, 제어 조건 하에서 거의 거의없이 부동을 보여줍니다. 기준 부동의 부족 효과적으로 실험 조작의 방지 depressant 효과를 감지하지 못하도록합니다. 그것은 그들이 뜨나에도 몇 가지 마우스 종자가 aberrantly 행동과 테스트 기간 동안 수조에 다이빙 수있는, 아주 드문 반면 수도 있습니다. 하나는 이러한 변형은 (저희 연구실에 게시되지 않은 전망대) DBA/1OlaHsd입니다. 이러한 변종은 FST에 적합하지 않습니다. 때문에 다이빙의 위험, 그러나 smal난, 이전에 FST이나 소설 유전자 조작을 품고 마우스 테스트되지 않았습니다 새로운 긴장을 테스트를 할 때, 그것은 신중하게 그들이 잠재적으로 유해한 행동에 관여하는 경우 마우스를 구출하기 위해 초기 실험을 관찰하기 위해 필수적입니다. 실험 설계의 여러 동물 (최대 다섯)를 동시에 테스트, 여기에 설명되어 있습니다. 우리가 사용하는 디바이더가 테스트하는 동안 서로를 볼 마우스를 방지하고, 백색 잡음 발생기는 가청 vocalizations를 억제하는 동안, 우리의 설정은 전송되는 모든 초음파 또는 후각 단서를 방지하지 않습니다. 가능성 테스트의 성격을 부여하지만, 이들은 생쥐의 행동에 영향을 미칠 수 있습니다. 이 문제를 해결하는 한 가지 방법은 개별적으로 동물을 테스트하는 것입니다. 그러나,이 방법은 자체적으로 문제가 있습니다. 예를 들어, 일반적으로, 각 세션에서 테스트 동물 같은 homecage에서 온. 이것은 임의화 및 실험 변수 counterbalancing 수 있습니다. 쥐 개별 테스트정가 homecage에서 한 번에 하나의 마우스를 제거 의미할 것입니다. 이것은 뒤에 남아있는 다른 사람 사이의 새장에 반복 응력과 사회 계층의 교란을 일으킬 것입니다. 테스트와 함께 또 다른 문제는 단독으로 시간의 제약이 있습니다. 한 번에 하나씩 마우스를 테스트하면 생쥐는 circadian주기의 서로 다른 시간에 테스트하는 상황에서 발생 몇 시간에 실험을 연장합니다. 이것은 하루 효과 혼란함을 주죠 시간을 만들 수 있습니다. 그들의 실험을 설계하면서 연구자 마음에 이러한 문제를 계속해야합니다.

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J., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+serotonergic+and+noradrenergic+antidepressants+in+the+rat+forced+swimming+test:+the+effects+of+water+depth.">Detection of serotonergic and noradrenergic antidepressants in the rat forced swimming test: the effects of water depth.</a> Behav. Brain Res. 73, 43-46 (1995).</li><li>Gould, T. D., Dao, D. T., Kovacsics, C. E., Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> In Mood and Anxiety Related Phenotypes in mice: characterization using behavioral tests. 42, (2009).</li><li>Bourin, M., Fiocco, A. J., Clenet, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+valuable+are+animal+models+in+defining+antidepressant+activity.">How valuable are animal models in defining antidepressant activity.</a> Human Psychopharmacology: Clinical and Experimental. 16, 9-21 (2001).</li></ol>

저자 관심에 대한 갈등을 선언하지 않습니다.

FST는 (때로는 Porsolt 수영 테스트라고도 함) 쥐에 대한 첫번째 개발하고 Porsolt 및 동료 12,13으로 마우스에 대한 바뀌었습니다. 저희 연구실에서 성공 위에서 설명한 프로토콜 이외에, 대부분 섬세한 테스트 수정의 번호 (완전한 검토 1 Hascoët 및 Bourin 참조) 출판되었습니다. 그것은 안티 - depressant, 마약, 그리고 기본 및 잠복기 연구 3,14-16의 다양한 행동 및 신경 생물학 조작의...

the mouse forced swim test

강제 수영 시험 약은 의약품, 새로운 화합물의 약은 효능, 그리고 미국과 같은 우울증을 렌더링하거나 예방하기위한 아르 실험 조작의 평가에 사용되는 쥐 행동 테스트입니다. 마우스는 물로 가득 차 있으며, 그들의 탈출 관련 이동성 행동 측정 피할 투명한 수조에 배치됩니다. 강제 수영 시험은 안정적으로 수행할 수 있도록 간단하고 최소한의 전문적인 장비를 필요로합니다. 강제 수영 시험의 성공적인 구현은 생쥐에게 부당한 스트레스의 특정 절차 내용 및 최소화하기 위해 준수해야합니다. 프로토콜 설명과 함께 동영상에서 우리는 어떻게 그들을 피하기 위해 결과의 해석 및 저해 될 수있는 잠재적인 함정에 중점이 시험의 마우스 버전을 수행하는 방법에 대해 설명합니다. 또한, 우리는 시험에 나타나신 행동이 평가 방법에 대해 설명합니다.

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The Mouse Forced Swim Test

강제 수영 시험은 설치류 동물의 잠재적인 약은 효험을 평가하기위한 실험 방법으로 확인됩니다. 실험 동물은 물과 탈출 관련 이동성 행동의 탱크에 배치됩니다 계량입니다. 이 테스트의 마우스 버전에 대한 일반적인 절차가 설명되어 있습니다.

마우스 강제 수영 시험

The forced swim test is a rodent behavioral test used for evaluation of antidepressant drugs, antidepressant efficacy of new compounds, and experimental ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

105.1K 조회수.  University of Maryland School of Medicine. 강제 수영 시험은 설치류 동물의 잠재적인 약은 효험을 평가하기위한 실험 방법으로 확인됩니다. 실험 동물은 물과 탈출 관련 이동성 행동의 탱크에 배치됩니다 계량입니다. 이 테스트의 마우스 버전에 대한 일반적인 절차가 설명되어 있습니다.

비디오: The Mouse Forced Swim Test

Shallow Water (Paddling) Variants of Water Maze Tests in Mice

When Richard Morris devised his water maze in 19817, most behavioral work was done in rats. However, the greater understanding of mouse genetics led to the mouse becoming increasingly important. But researchers found that some strains of mutant mice were prone to problems like passively floating or diving when they were tested in the Morris water maze11. This was unsurprising considering their natural habitat; rats swim naturally (classically, the "sewer rat"), whereas mice evolved in the dry areas of central Asia.
To overcome these problems, it was considered whether shallow water would be a sufficient stimulus to provide escape motivation for mice. This would also avoid the problems of drying the small creatures with a towel and then putting them in a heated recovery chamber to avoid hypothermia, which is a much more serious problem than with rats; the large ratio of surface area to volume of a mouse makes it particularly vulnerable to rapid heat loss.
Another consideration was whether a more natural escape strategy could be used, to facilitate learning. Since animals that fall into water and swim away from the safety of the shore are unlikely to pass on their genes, animals have evolved a natural tendency to swim to the edge of a body of water. The Morris water maze, however, requires them to swim to a hidden platform towards the center of the maze - exactly opposite to their evolved behavior. Therefore the paddling maze should incorporate escape to the edge of the apparatus. This feature, coupled with the use of relatively non-aversive shallow water, embodies the "Refinement" aspect of the "3 Rs" of Russell and Burch8.
Various types of maze design were tried; the common feature was that the water was always shallow (2 cm deep) and escape was via a tube piercing the transparent wall of the apparatus. Other tubes ("false exits") were also placed around the walls but these were blocked off. From the inside of the maze all false exits and the single true exit looked the same. Currently a dodecagonal (12-sided) maze is in use in Oxford, with 12 true/false exits set in the corners. In a recent development a transparent paddling Y-maze has been tested successfully.

Shallow Water Paddling Variants of Water Maze Tests in Mice

Mice can swim, but many strains appear to find this activity stressful. To overcome this problem mazes have been devised where escape from shallow water is used to motivate behaviour. These have been demonstrated to support learning at least as good as the traditional and widely used Morris water maze.

마우스의 물 미로 시험의 얕은 물 (패들링) 변종

When Richard Morris devised his water maze in 19817, most behavioral work was done in rats. However, the greater understanding of mouse genetics led to ...

연구

행동분석학

The Forced Swim Test as a Model of Depressive-like Behavior

The goal of the present protocol is to describe the forced swim test (FST), which is one of the most commonly used assays for the study of depressive-like behavior in rodents. The FST is based on the assumption that when placing an animal in a container filled with water, it will first make efforts to escape but eventually will exhibit immobility that may be considered to reflect a measure of behavioral despair. This test has been extensively used because it involves the exposure of the animals to stress, which was shown to have a role in the tendency for major depression. Additionally, the FST has been shown to share some of the factors that are influenced or altered by depression in humans, including changes in food consumption, sleep abnormalities and drug-withdrawal-induced anhedonia. The main advantages of this procedure are that it is relatively easy to perform and that its results are easily and quickly analyzed. Moreover, its sensitivity to a broad range of antidepressant drugs that makes it a suitable screening test is one of the most important features leading to its high predictive validity. Despite its appeal, this model has a number of disadvantages. First, the issue of chronic augmentation is problematic in this test because in real life patients need to be treated for at least several weeks before they experience any relief from their symptoms. Last, due to the aversiveness of the FST, it is important to take into account possible influences it might have on brain structure/function if brain analyses are to be carried out following this procedure.

This protocol describes the forced swim test, which is used for the study of depressive-like behavior in rodents. This procedure involves placing an animal in a container filled with water that eventually will lead to the exhibition of immobility behavior, which is considered to reflect behavioral despair.

우울증 같은 행동의 모델로 강제 수영 테스트

The goal of the present protocol is to describe the forced swim test (FST), which is one of the most commonly used assays for the study of depressive-like ...

Applying Stereotactic Injection Technique to Study Genetic Effects on Animal Behaviors

Stereotactic injection is a useful technique to deliver high titer lentiviruses to targeted brain areas in mice. Lentiviruses can either overexpress or knockdown gene expression in a relatively focused region without significant damage to the brain tissue. After recovery, the injected mouse can be tested on various behavioral tasks such as the Open Field Test (OFT) and the Forced Swim Test (FST). The OFT is designed to assess locomotion and the anxious phenotype in mice by measuring the amount of time that a mouse spends in the center of a novel open field. A more anxious mouse will spend significantly less time in the center of the novel field compared to controls. The FST assesses the anti-depressive phenotype by quantifying the amount of time that mice spend immobile when placed into a bucket of water. A mouse with an anti-depressive phenotype will spend significantly less time immobile compared to control animals. The goal of this protocol is to use the stereotactic injection of a lentivirus in conjunction with behavioral tests to assess how genetic factors modulate animal behaviors.

Stereotactic injection of lentiviruses expressing cDNAs or shRNAs can modulate gene expression in specific brain areas of mice. Here, we present a protocol to combine stereotactic injections with behavioral tasks, such as the Open Field Test (OFT) and the Forced Swim Test (FST).

정위 사출 기술을 적용하는 것은 동물의 행동에 유전 적 영향을 연구하기

Stereotactic injection is a useful technique to deliver high titer lentiviruses to targeted brain areas in mice. Lentiviruses can either overexpress or ...

The Double-H Maze: A Robust Behavioral Test for Learning and Memory in Rodents

Spatial cognition research in rodents typically employs the use of maze tasks, whose attributes vary from one maze to the next. These tasks vary by their behavioral flexibility and required memory duration, the number of goals and pathways, and also the overall task complexity. A confounding feature in many of these tasks is the lack of control over the strategy employed by the rodents to reach the goal, e.g., allocentric (declarative-like) or egocentric (procedural) based strategies. The double-H maze is a novel water-escape memory task that addresses this issue, by allowing the experimenter to direct the type of strategy learned during the training period. The double-H maze is a transparent device, which consists of a central alleyway with three arms protruding on both sides, along with an escape platform submerged at the extremity of one of these arms.
Rats can be trained using an allocentric strategy by alternating the start position in the maze in an unpredictable manner (see protocol 1; &#167;4.7), thus requiring them to learn the location of the platform based on the available allothetic cues. Alternatively, an egocentric learning strategy (protocol 2; &#167;4.8) can be employed by releasing the rats from the same position during each trial, until they learn the procedural pattern required to reach the goal. This task has been proven to allow for the formation of stable memory traces.
Memory can be probed following the training period in a misleading probe trial, in which the starting position for the rats alternates. Following an egocentric learning paradigm, rats typically resort to an allocentric-based strategy, but only when their initial view on the extra-maze cues differs markedly from their original position. This task is ideally suited to explore the effects of drugs/perturbations on allocentric/egocentric memory performance, as well as the interactions between these two memory systems.

The goal of this protocol is to investigate spatial cognition in rodents. The double-H water maze is a novel test, which is particularly useful to elucidate the different components of learning, consolidation and memory, as well as the interplay of memory systems.

더블 H 미로 : 설치류의 강력한 행동 학습에 대한 테스트 및 메모리

Spatial cognition research in rodents typically employs the use of maze tasks, whose attributes vary from one maze to the next. These tasks vary by their ...

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, including neurocognitive disorders such as Alzheimer&#8217;s disease. However, the background strain of the mouse model used can have a substantial effect on the observed behavioral phenotype, with some strains exhibiting superior learning ability relative to others. To ensure differences between transgene negative and transgene positive mice can be detected, identification of a training procedure sensitive to the background strain is essential. Failure to tailor the MWM protocol to the background strain of the mouse model may lead to under- or over- training, thereby masking group differences in probe trials. Here, a MWM protocol tailored for use with the F1 FVB/N x 129S6 background is described. This is a frequently used background strain to study the age-dependent effects of mutant P301L tau (rTg(TauP301L)4510 mice) on the memory deficits associated with Alzheimer&#8217;s disease. Also described is a strategy to re-optimize, as dictated by the particular testing environment utilized.

This manuscript describes a Morris water maze (MWM) protocol tailored for use with a commonly used mouse model of Alzheimer's disease. The MWM is widely used in transgenic mouse models. Implementation of a procedure sensitive to the background strain of the mouse model is essential for detecting group differences.

모리스 물 미로 테스트 : 마우스 스트레인 및 테스트 환경을위한 최적화

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer&#39;s Disease Model Mice

The Morris Water Maze (MWM) was first established by neuroscientist Richard G. Morris in 1981 in order to test hippocampal-dependent learning, including acquisition of spatial memoryand long-term spatial memory 1. The MWM is a relatively simple procedure typically consisting of six day trials, the main advantage being the differentiation between the spatial (hidden-platform) and non-spatial (visible platform) conditions 2-4. In addition, the MWM testing environment reduces odor trail interference 5. This has led the task to be used extensively in the study of the neurobiology and neuropharmacology of spatial learning and memory. The MWM plays an important role in the validation of rodent models for neurocognitive disorders such as Alzheimer&#x2019;s Disease 6, 7. In this protocol we discussed the typical procedure of MWM for testing learning and memory and data analysis commonly used in Alzheimer&#x2019;s disease transgenic model mice.

Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer's Disease Model Mice

The Morris Water Maze is a behavioral task to test hippocampal-dependent learning and memory. It has been widely used in the study of neurobiology, neuropharmacology and neurocognitive disorders in rodent models.

알츠하이머병 모델 마우스에서 학습 및 메모리 적자에 대한 모리스 워터 메이즈 테스트

The Morris Water Maze (MWM) was first established by neuroscientist Richard G. Morris in 1981 in order to test hippocampal-dependent learning, including ...

신경과학

A Behavioral Test Battery for the Repeated Assessment of Motor Skills, Mood, and Cognition in Mice

Pharmacological and toxicological studies in neurodegeneration require comprehensive behavioral analysis in mice because motor dysfunctions and dysfunctions in mood and cognition are common and often shared symptoms in neurodegenerative diseases. Shown here is a behavioral test battery for motor, mood, and cognition, which can be repeatedly tested in a longitudinal study. This battery assesses the overall behavioral phenotype in mice by examining each domain of behavior with at least two independent well-accepted tests (i.e., open-field test and rotarod test for motor function, social interaction test, elevated plus maze test, and forced swim test for emotional function, and Morris water maze test and novel object recognition test for cognitive function). Therefore, this sensitive and comprehensive test battery is a powerful tool for the study of behavioral alternation in neurodegeneration.

A comprehensive behavioral test battery of motor skills, mood&#8212;including social interaction, depression, and anxiety&#8212;and cognition is designed for the repeated assessment of neurodegeneration-related behavioral changes in mice.

모터 기술, 분위기, 그리고 쥐에 있는 인식의 반복 된 평가 행동 테스트 배터리

Pharmacological and toxicological studies in neurodegeneration require comprehensive behavioral analysis in mice because motor dysfunctions and ...

Analysis of Learning and Memory Ability in an Alzheimer's Disease Mouse Model using the Morris Water Maze

A Morris water maze (MWM) experiment forces experimental animals to swim and learn to find a platform hidden in the water. It is widely used in scientific research to assess the learning and memory of animals. Due to the extensive use of the MWM test, visual experimental protocols are essential for researchers. This manuscript uses the latest studies to introduce the protocol of the MWM test. Alzheimer&#8217; Disease (AD) is characterized by a progressive loss of memory and cognitive function. An alternative and complementary treatment used for AD is Manual Acupuncture (MA). To assess the learning and memory ability of AD model mice, the MWM test was conducted. The visible platform trial, hidden platform trial, probe trial, and reversal trial of MWM were used to evaluate spatial learning and memory ability. In the visible platform trial, the swimming speed and escape latency of mice in different groups was not significantly different. In the hidden platform and reversal trials, the AD group showed a long escape latency. The escape latency decreased significantly after the MA treatment. Low platform crossover number and the proportion of time in the SW quadrant in the probe trial increased after the MA treatment (p &#60; 0.05 or p &#60; 0.01). The results of the MWM tests suggest that MA can effectively improve the spatial learning and memory abilities of AD model mice. Rigorous experimental operations provided assurance of the reliability of the results.

Herein, a protocol to conduct the Morris water maze tests to evaluate the ability of learning and memory of Alzheimer&#8217;s Disease model mice and to assess the effect of manual acupuncture for treating them is described.

모리스 워터 미로를 이용한 알츠하이머 병 마우스 모델의 학습 및 기억 능력 분석

A Morris water maze (MWM) experiment forces experimental animals to swim and learn to find a platform hidden in the water. It is widely used in scientific ...

Motor and Hippocampal Dependent Spatial Learning and Reference Memory Assessment in a Transgenic Rat Model of Alzheimer's Disease with Stroke

Alzheimer&#39;s disease (AD) is a debilitating neurodegenerative disease that results in neurodegeneration and memory loss. While age is a major risk factor for AD, stroke has also been implicated as a risk factor and an exacerbating factor. The co-morbidity of stroke and AD results in worsened stroke-related motor control and AD-related cognitive deficits when compared to each condition alone. To model the combined condition of stroke and AD, a novel transgenic rat model of AD, with a mutated form of amyloid precursor protein (a key protein involved in the development of AD) incorporated into its DNA, is given a small unilateral striatal stroke.
For a model with the combination of both stroke and AD, behavioral tests that assess stroke-related motor control, locomotion and AD-related cognitive function must be implemented. The cylinder task involves a cost-efficient, multipurpose apparatus that assesses spontaneous forelimb motor use. In this task, a rat is placed in a cylindrical apparatus, where the rat will spontaneously rear and contact the wall of the cylinder with its forelimbs. These contacts are considered forelimb motor use and quantified during video analysis after testing. Another cost-efficient motor task implemented is the beam-walk task, which assesses forelimb control, hindlimb control and locomotion. This task involves a rat walking across a wooden beam allowing for the assessment of limb motor control through analysis of forelimb slips, hindlimb slips and falls. Assessment of learning and memory is completed with Morris water maze for this behavioral paradigm. The protocol starts with spatial learning, whereby the rat locates a stationary hidden platform. After spatial learning, the platform is removed and both short-term and long-term spatial reference memory is assessed. All three of these tasks are sensitive to behavioral differences and completed within 28 days for this model, making this paradigm time-efficient and cost-efficient.

To investigate the co-morbid Alzheimer&#39;s disease (AD) and stroke condition in a novel model, three behavior tasks are described that assess both motor control and cognitive behaviors. These tasks include the beam-walk task, cylinder task and Morris water maze.

뇌졸중과 알츠하이머 병의 유전자 변형 쥐 모델에서 모터 및 해마 종속 공간 학습 및 참조 메모리 평가

Alzheimer&#39;s disease (AD) is a debilitating neurodegenerative disease that results in neurodegeneration and memory loss. While age is a major risk ...

의학

The Mouse Stroke Unit Protocol with Standardized Neurological Scoring for Translational Mouse Stroke Studies

The filament model of middle artery occlusion (fMCAo) is perhaps the most translational mouse stroke model, allowing for controlled ischemia with intravascular reperfusion/recanalization. However, it lacks alignment with current clinical advances for stroke care (e.g., Stroke Units), usually employs subjective or vague neurological scoring among laboratories, and exhibits high acute-phase mortality. Here, we address these limitations with validated video-guided protocols. We present the mouse Stroke Unit (mSU) protocol with instructional videos and a decision algorithm (Risk Stratification Score), bridging the gap between clinical and mouse stroke modeling. To increase accuracy and sensitivity of stroke neurological scoring, we present for the first time a video-standardized format of the focal Experimental Stroke Scale (fESS) and prove its value up to 6 months post-stroke. Additionally, protocols for mice Ladder-rung test, as well as the known Cylinder test, for unbiased, quantitative assessment of limbs&#180; motor function are presented. Results highlight mSU&#39;s translational efficacy. Focal ESS (fESS) excels over other known scales in detecting focal stroke deficits, capturing recovery, and maintaining sensitivity for up to 6 months post-stroke. Ladder-rung and Cylinder tests objectively quantify and monitor fore- and hind-limb motor deficits, long-term. In summary, integrating mSU, fESS, and motor function tests provides a robust framework for clinically relevant stroke investigations. Our protocols improve the translational value in mouse stroke research.

This article presents a protocol for executing the highly translational and independently proven mouse Stroke Unit (mSU) concept in large-stroke mice. It also provides a standardized protocol for executing the focal experimental stroke scale in mice, which evaluates stroke focal deficits detected even long-term.