Anne Sütü Mikrobiyotasının Bireyselleştirilmiş Sulandırılması: Gerçek Dünya Ortamlarında Uygulanabilir Bir Yaklaşım

Pastörize sütte besin yapısını koruyarak belirli bir anne sütünün mikrobiyotasını geri kazanmanın hastanelerde uygulanabilecek metodoloji ile mümkün olup olmadığını araştırıyoruz. Amacımız, yenidoğanlar için yeni bir beslenme süper stratejisi geliştirmek ve görünürlüğünü değerlendirmektir. Anne sütü mikrobiyotasının deneysel olarak yeniden yapılandırılmasındaki en büyük zorluğun, anne sütünde bulunan orijinal profile daha yakın bir rekonstrüksiyon elde etmek ve bunu hızlı bir şekilde yapmak olduğuna inanıyoruz.

Bu sadece etkilerini arttırmakla kalmayacak, aynı zamanda prosedürün güvenliğini daha da artıracaktır. Bu yeni beslenme süper stratejisinin yenidoğanlar için önemli klinik faydalar sağlayıp sağlamadığını belirlemeyi amaçlıyoruz. Pratik faydalar doğrulanırsa, stratejinin insan sütü bankalarının bulunduğu tüm bölgelerde kolayca uygulanabileceğine ve bunun da yetişkin olmayan genel sağlık üzerinde olumlu bir etkiye yol açabileceğine inanıyoruz.

Gerekli onayı aldıktan sonra, annenin hemşire gözetiminde sterilize edilmiş bir kaba elektrikli göğüs pompası kullanarak süt sağmasını sağlayın. Toplandıktan sonra, sütün bulunduğu kabı annenin bilgileri, toplama tarihi ve saati ile etiketleyin. Annenin kendi sütünü veya annesini eksi dört santigrat derece veya daha düşük bir sıcaklıkta 12 saate kadar saklayın.

Çiğ sütü veya pastörize donör sütünü veya PDM'yi çözün, 40 santigrat derece su banyosunda plastik kapaklı sterilize cam kaplarda saklayın. Süt sıcaklığı beş santigrat dereceyi aşmadan insan sütü şişesini su banyosundan çıkarın. Ardından, laboratuvar önlüğü, maske, şapka ve eldiven giyin.

Çalışma yüzeyini, yerel kurumsal protokole uygun olarak bir yüzey temizleme solüsyonu ile temizleyin. Sonraki 16S dizilimi ve bakteri sayımı için MOM'un bir mililitresine kadar olan alikotunu bir kriyotüpe aktarın. Kriyotüpü eksi 80 santigrat derecede saklayın.

Steril bir pipet kullanarak, istenen nihai hacmin %10'una eşdeğer kalan MOM hacmini gıdaya uygun bir kaba aktarın. Kabı 37 santigrat derecede bir su banyosuna daldırın. Daha sonra, PDM'nin bir mililitrelik alikotunu 16S dizileme ve bakteri sayımı için DNase / RNase Free kriyotüpe aktarın.

Kriyotüpü eksi 80 santigrat derecede saklayın. Steril bir pipet kullanarak, istenen nihai hacmin %90'ına eşdeğer miktarda PDM'yi, aşılanmış anne sütünü oluşturarak MOM'u tutan kaba aktarın. Kontaminasyonu önlemek için kabı bir kapakla kapatın ve mikroorganizmaların sütte çoğalmasına izin vermek için dört saat boyunca 37 santigrat derece su banyosuna daldırın.

Dört saat sonra, fermente edilmiş anne sütünün bulunduğu kabı su banyosundan çıkarın. Sulandırılmış sütün bir mililitrelik alikotunu 16S dizileme ve bakteri sayımı için DNase / RNase Free kriyotüpe aktarın. Kriyotüpü eksi 80 santigrat derecede saklayın.

Kalan sulandırılmış süt hacmini yenidoğanları beslemek için sterilize edilmiş bir kaba aktarın.