인간 모유 미생물총(Human Milk Microbiota)의 개별화된 재구성: 실제 환경에서 실현 가능한 접근 방식

저온 살균 모유에서 영양 구조를 보존하는 특정 모유의 미생물총(microbiota)을 병원에서 구현할 수 있는 방법론을 통해 회수할 수 있는지 조사하고 있습니다. 우리의 목표는 신생아를 위한 새로운 영양 슈퍼 전략을 개발하고 가시성을 평가하는 것입니다. 우리는 인간 모유 미생물군을 실험적으로 재구성하는 데 있어 가장 큰 도전은 모유에 존재하는 원래 프로필에 훨씬 더 가까운 재구성을 달성하는 것이며 이를 신속하게 수행하는 것이라고 믿습니다.

이것은 효과를 향상시킬 뿐만 아니라 절차의 안전성을 더욱 높입니다. 우리는 이러한 새로운 영양 슈퍼 전략이 신생아에게 상당한 임상적 이점을 제공하는지 여부를 확인하는 것을 목표로 합니다. 우리는 실질적인 이점이 확인되면 이 전략이 모유 은행이 있는 모든 지역에서 쉽게 구현되어 전반적인 비성인 건강에 긍정적인 영향을 미칠 수 있다고 믿습니다.

필요한 동의를 얻은 후, 간호사의 감독 하에 전기 유축기를 사용하여 멸균된 용기에 산모가 젖을 짜도록 합니다. 채취 후 모유가 들어 있는 용기에 산모의 정보, 날짜 및 수집 시간을 표시합니다. 산모의 모유 또는 엄마는 섭씨 영하 4도 이하에서 최대 12시간 동안 보관하십시오.

플라스틱 뚜껑이 있는 멸균된 유리 용기에 보관된 생우유 또는 저온 살균 기증자 우유 또는 PDM을 섭씨 40도의 수조에서 해동합니다. 우유 온도가 섭씨 5도를 초과하기 전에 수조에서 인간 우유병을 제거하십시오. 다음으로 실험복, 마스크, 모자, 장갑을 착용합니다.

지역 기관 프로토콜에 따라 표면 세척 용액으로 작업 표면을 청소하십시오. 최대 1ml의 MOM의 분취액을 cryotube로 옮겨 후속 16S 염기서열분석 및 박테리아 수를 계산합니다. cryotube는 섭씨 영하 80도에서 보관하십시오.

멸균 피펫을 사용하여 최종 원하는 부피의 10%에 해당하는 MOM의 잔량을 식품 안전 용기로 옮깁니다. 용기를 섭씨 37도의 수조에 담그십시오. 다음으로, PDM의 1ml 분취액을 DNase/RNase Free cryotube로 옮겨 16S 염기서열분석 및 박테리아 수를 계산합니다.

cryotube는 섭씨 영하 80도에서 보관하십시오. 멸균 피펫을 사용하여 최종 원하는 부피의 90%에 해당하는 PDM을 MOM이 들어 있는 용기로 옮겨 접종된 모유를 형성합니다. 오염을 방지하기 위해 용기를 뚜껑으로 밀봉하고 섭씨 37도의 수조에 4시간 동안 담가 우유에 미생물이 증식할 수 있도록 합니다.

4시간 후, 발효된 접종된 모유가 담긴 용기를 수조에서 꺼냅니다. 16S 염기서열분석 및 박테리아 수를 위해 재구성된 우유의 1ml 분취액을 DNase/RNase Free cryotube로 옮깁니다. cryotube는 섭씨 영하 80도에서 보관하십시오.

남은 양의 재구성된 우유를 신생아 수유를 위해 소독된 용기로 옮깁니다.