母乳微生物叢の個別化再構成:実社会での実行可能なアプローチ

私たちは、病院で実施できる方法論を通じて、低温殺菌牛乳の栄養構造を維持しながら、特定の母乳の微生物叢を回復することが可能かどうかを調査しています。私たちの目標は、新生児のための新しい栄養スーパー戦略を開発し、その可視性を評価することです。私たちは、母乳微生物叢を実験的に再構成する上での最大の課題は、母乳に存在する元のプロファイルにさらに近い再構築を達成し、それを迅速に行うことであると考えています。

これにより、その効果が高まるだけでなく、施術の安全性がさらに向上します。これらの新しい栄養スーパー戦略が新生児に大きな臨床的利益をもたらすかどうかを判断することを目指しています。実際的な利益が確認されれば、この戦略はすべての地域で容易に実施でき、母乳バンクは成人以外の健康全体にプラスの影響を与えると考えています。

必要な同意を得た後、看護師の監督の下で、母親に電動搾乳器を使用して滅菌容器に搾乳してもらいます。収集後、母乳を入れている容器に母親の情報、日付、収集時間を記載したラベルを付けます。母親自身の母乳またはMOMは、摂氏マイナス4度以下で最大12時間保存してください。

生乳または低温殺菌されたドナーミルクまたはPDMを解凍し、プラスチック製の蓋が付いた滅菌ガラス容器に40°Cの水浴で保存します。ミルクの温度が摂氏5度を超える前に、母乳瓶を水浴から取り出します。次に、白衣、マスク、帽子、手袋を着用します。

作業面は、現地の施設のプロトコルに従って、表面洗浄液で清掃します。MOMの最大1ミリリットルのアリコートをクライオチューブに移し、その後の16Sシーケンシングと細菌数測定を行います。クライオチューブはマイナス80°Cで保管してください。

滅菌ピペットを使用して、MOMの残量(最終的な所望容量の10%相当)を食品安全容器に移します。容器を摂氏37度の水浴に浸します。次に、PDMの1ミリリットルアリコートをDNase/RNase Freeクライオチューブに移し、16Sシーケンシングと細菌カウントを行います。

クライオチューブはマイナス80°Cで保管してください。滅菌ピペットを使用して、最終的な所望量の90%に相当する量のPDMをMOMを保持している容器に移し、接種した母乳を形成します。容器を蓋で密封して汚染を防ぎ、摂氏37度の水浴に4時間浸して、微生物がミルク内で増殖できるようにします。

4時間後、発酵させた接種した母乳の入った容器を水浴から取り出します。再構成した牛乳の 1 ミリリットルのアリコートを DNase/RNase Free クライオチューブに移し、16S シーケンシングと細菌カウントを行います。クライオチューブはマイナス80°Cで保管してください。

再構成したミルクの残りの量を、新生児に授乳するための消毒された容器に移します。