בנייה מחדש אישית של מיקרוביוטה של חלב אם: גישה ישימה בסביבות בעולם האמיתי

אנו בודקים אם ניתן לשחזר את המיקרוביוטה של חלב אם מסוים תוך שימור המבנה התזונתי בחלב מפוסטר באמצעות מתודולוגיה שניתן ליישם בבתי חולים. המטרה שלנו היא לפתח אסטרטגיית על תזונתית חדשה לתינוקות ולהעריך את הנראות שלה. אנו מאמינים כי האתגר הגדול ביותר בבנייה מחדש של מיקרוביוטת חלב האדם באופן ניסיוני הוא השגת שחזור הקרוב עוד יותר לפרופיל המקורי הקיים בחלב האם, ולעשות זאת במהירות.

זה לא רק לשפר את ההשפעות שלה, אלא גם להגדיל עוד יותר את הבטיחות של ההליך. אנו שואפים לקבוע אם אסטרטגיית העל התזונתית החדשה מציעה יתרונות קליניים משמעותיים עבור יילודים. אנו מאמינים כי אם יאושרו היתרונות המעשיים, ניתן יהיה ליישם את האסטרטגיה בקלות בכל האזורים עם בנקי חלב אם שתוביל להשפעה חיובית על הבריאות הכללית של אנשים שאינם מבוגרים.

לאחר קבלת ההסכמה הנדרשת, בקשו מהאם להעביר חלב באמצעות משאבת חלב חשמלית למיכל מעוקר בפיקוח האחות. לאחר האיסוף, תייגו את המיכל המכיל את החלב עם פרטי האם, תאריך ושעת האיסוף. יש לאחסן את חלב האם או את חלב האם בטמפרטורה של מינוס ארבע מעלות צלזיוס או פחות למשך עד 12 שעות.

הפשירו חלב גולמי או חלב תורם מפוסטר או PDM, מאוחסנים במיכלי זכוכית מעוקרים עם מכסי פלסטיק באמבט מים של 40 מעלות צלזיוס. הוציאו את בקבוק החלב האנושי מאמבט המים לפני שטמפרטורת החלב עולה על חמש מעלות צלזיוס. לאחר מכן, לבשו מעיל מעבדה, מסכה, כובע וכפפות.

נקו את משטח העבודה באמצעות פתרון ניקוי משטחים, בהתאם לפרוטוקול המוסדי המקומי. העבר את aliquot של עד מיליליטר אחד של MOM לתוך cryotube עבור ריצוף 16S הבאים וספירה חיידקית. אחסן את צינור ההקפאה במינוס 80 מעלות צלזיוס.

בעזרת פיפטה סטרילית, מעבירים את הנפח הנותר של MOM, שווה ערך ל-10% מהנפח הסופי הרצוי, למיכל בטוח למזון. לטבול את המיכל באמבט מים ב 37 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, העבר את aliquot מיליליטר אחד של PDM לתוך DNase / RNase חינם cryotube עבור ריצוף 16S וספירת חיידקים.

אחסן את צינור ההקפאה במינוס 80 מעלות צלזיוס. באמצעות פיפטה סטרילית, להעביר כמות של PDM שווה ערך ל 90% מהנפח הרצוי הסופי למיכל המחזיק את MOM, וליצור את חלב האם מחוסן. אטמו את המיכל עם מכסה כדי למנוע זיהום וטבלו אותו באמבט מים של 37 מעלות צלזיוס למשך ארבע שעות כדי לאפשר למיקרואורגניזמים להתרבות בחלב.

לאחר ארבע שעות, הסר את המיכל עם חלב האם המותסס והמחוסן מאמבט המים. העבר את aliquot מיליליטר אחד של חלב reconsformed לתוך DNase / RNase חינם cryotube עבור ריצוף 16S וספירת חיידקים. אחסן את צינור ההקפאה במינוס 80 מעלות צלזיוס.

העבירו את הנפח הנותר של חלב משוחזר למיכל מחוטא להאכלת תינוקות.