إعادة التكوين الفردية لميكروبات الحليب البشري: نهج ممكن في بيئات العالم الحقيقي

نحن نبحث فيما إذا كان من الممكن استعادة الجراثيم لحليب أم معين مع الحفاظ على البنية الغذائية في الحليب المبستر من خلال منهجية يمكن تنفيذها في المستشفيات. هدفنا هو تطوير استراتيجية غذائية فائقة جديدة لحديثي الولادة وتقييم ظهورها. نعتقد أن التحدي الأكبر في إعادة تكوين ميكروبات حليب الأم تجريبيا هو تحقيق إعادة بناء أقرب إلى المظهر الأصلي الموجود في حليب الأم ، والقيام بذلك بسرعة.

لن يؤدي ذلك إلى تعزيز آثاره فحسب ، بل سيزيد أيضا من سلامة الإجراء. نهدف إلى تحديد ما إذا كانت هذه الاستراتيجية الغذائية الفائقة الجديدة تقدم فوائد سريرية كبيرة لحديثي الولادة. ونعتقد أنه إذا تم تأكيد الفوائد العملية، يمكن تنفيذ الاستراتيجية بسهولة في جميع المناطق من خلال بنوك اللبن البشري مما يؤدي إلى تأثير إيجابي على الصحة العامة لغير البالغين.

بعد الحصول على الموافقة المطلوبة ، اطلب من الأم شفط الحليب باستخدام مضخة الثدي الكهربائية في حاوية معقمة تحت إشراف الممرضة. بعد الجمع ، قم بتسمية الحاوية التي تحتوي على الحليب بمعلومات الأم وتاريخ ووقت الجمع. قم بتخزين حليب الأم أو الأم عند أربع درجات مئوية تحت الصفر أو أقل لمدة تصل إلى 12 ساعة.

قم بإذابة الحليب الخام أو حليب المتبرع المبستر أو PDM ، المخزنة في عبوات زجاجية معقمة بأغطية بلاستيكية في حمام مائي 40 درجة مئوية. أخرج زجاجة الحليب البشري من الحمام المائي قبل أن تتجاوز درجة حرارة الحليب خمس درجات مئوية. بعد ذلك ، ارتد معطف المختبر والقناع والقبعة والقفازات.

قم بتنظيف سطح العمل بمحلول تنظيف الأسطح ، باتباع البروتوكول المؤسسي المحلي. انقل حصة ما يصل إلى ملليلتر واحد من MOM إلى أنبوب تبريد لتسلسل 16S اللاحق وعدد البكتيريا. قم بتخزين أنبوب التبريد عند 80 درجة مئوية تحت الصفر.

باستخدام ماصة معقمة، انقل الحجم المتبقي من MOM، أي ما يعادل 10٪ من الحجم النهائي المطلوب، إلى حاوية آمنة للطعام. اغمر الحاوية في حمام مائي عند 37 درجة مئوية. بعد ذلك ، قم بنقل كمية المليلتر الواحد من PDM إلى أنبوب تبريد خال من DNase / RNase لتسلسل 16S وعدد البكتيريا.

قم بتخزين أنبوب التبريد عند 80 درجة مئوية تحت الصفر. باستخدام ماصة معقمة، انقل كمية من PDM تعادل 90٪ من الحجم النهائي المطلوب إلى الحاوية التي تحتوي على MOM، لتشكيل حليب الأم الملقح. أغلق الحاوية بغطاء لمنع التلوث واغمرها في حمام مائي بدرجة حرارة 37 درجة مئوية لمدة أربع ساعات للسماح للكائنات الحية الدقيقة بالتكاثر في الحليب.

بعد أربع ساعات ، أخرج الحاوية التي تحتوي على حليب الأم المخمر من الحمام المائي. انقل كمية المليلتر الواحد من الحليب المعاد تكوينه إلى أنبوب تبريد خال من DNase / RNase لتسلسل 16S وعدد البكتيريا. قم بتخزين أنبوب التبريد عند 80 درجة مئوية تحت الصفر.

انقل الحجم المتبقي من الحليب المعاد تكوينه إلى وعاء معقم لتغذية الأطفال حديثي الولادة.