نموذج الفئران لتضخم البطين الأيمن الناجم عن الضغط الزائد والفشل عن طريق ربط الجذع الرئوي

Summary

نصف نموذج الفئران للضغط البطيني الأيمن الناجم عن زيادة الضغط الرئوي. يتم تضمين بروتوكولات مفصلة للتنبيب والجراحة والتنميط الظاهري عن طريق تخطيط صدى القلب في الورقة. تستخدم الأدوات المصنوعة حسب الطلب للتنبيب والجراحة ، مما يسمح باستنساخ سريع وغير مكلف للنموذج.

Abstract

يرتبط فشل البطين الأيمن (RV) الناجم عن الحمل الزائد للضغط ارتباطا وثيقا بالمراضة والوفيات في عدد من أمراض القلب والأوعية الدموية والرئة. التسبب في فشل عربة سكن متنقلة معقد ولا يزال غير مفهوم بشكل كاف. لتحديد استراتيجيات علاجية جديدة لعلاج فشل RV ، تعد النماذج الحيوانية القوية والقابلة للتكرار ضرورية. اكتسبت نماذج ربط الجذع الرئوي (PTB) شعبية ، حيث يمكن تقييم وظيفة RV بشكل مستقل عن التغيرات في الأوعية الدموية الرئوية.

في هذه الورقة ، نقدم نموذجا للفأر من الحمل الزائد لضغط RV الناجم عن PTB في الفئران البالغة من العمر 5 أسابيع. يمكن استخدام النموذج للحث على درجات مختلفة من أمراض RV ، بدءا من تضخم RV الخفيف إلى فشل RV اللا تعويضي. يتم تضمين بروتوكولات مفصلة للتنبيب وجراحة PTB والتنميط الظاهري عن طريق تخطيط صدى القلب في الورقة. علاوة على ذلك ، يتم إعطاء تعليمات لتخصيص الأدوات للتنبيب وجراحة PTB ، مما يتيح استنساخ سريع وغير مكلف لنموذج PTB.

تم استخدام مشابك ربط التيتانيوم لتضييق الجذع الرئوي ، مما يضمن درجة عالية من انقباض الجذع الرئوي قابلة للتكرار ومستقلة عن المشغل. تم تصنيف شدة PTB باستخدام أقطار مشبك ربط داخلية مختلفة (خفيفة: 450 ميكرومتر وشديدة: 250 ميكرومتر). أدى ذلك إلى أمراض RV تتراوح من تضخم مع وظيفة RV المحفوظة إلى فشل RV اللا تعويضي مع انخفاض النتاج القلبي والمظاهر خارج القلب. تم تقييم وظيفة RV عن طريق تخطيط صدى القلب في 1 أسبوع و 3 أسابيع بعد الجراحة. يتم عرض أمثلة على صور تخطيط صدى القلب والنتائج هنا. علاوة على ذلك ، يتم عرض نتائج قسطرة القلب اليمنى والتحليلات النسيجية لأنسجة القلب.

Introduction

فشل البطين الأيمن (RV) هو متلازمة سريرية مع أعراض قصور القلب وعلامات الاحتقان الجهازي الناتج عن خلل RV¹. يرتبط خلل RV بقوة بالمراضة والوفيات في عدد من أمراض القلب والأوعية الدموية^{والرئة 2}. مسببات خلل RV معقدة ، ولا تزال مسارات الإشارات الأساسية وتنظيمها غير موضحة بشكل كاف.

تظهر الملاحظات من العلاجات الحالية أن وظيفة RV المحسنة ترتبط ارتباطا وثيقا بتقليل الحمل اللاحق ، مما يشير إلى أن الأوعية الدموية الرئوية هي هدف العلاج^{الأساسي 3}. يشير هذا إلى أن العلاجات الحالية لها تأثير مباشر ضئيل فقط على وظيفة RV ، والتي يمكن أن تتدهور حتى بعد تحسين مقاومة الأوعية الدموية الرئوية

Protocol

تمت الموافقة على الدراسة من قبل مفتشية التجارب الحيوانية الدنماركية (رقم الترخيص: 2021-15-0201-00928) وتم إجراؤها وفقا للتشريعات الوطنية لحيوانات المختبر. استخدمت هذه الدراسة ذكور الفئران C57BL / 6N البالغة من العمر 5 أسابيع.

1. تخصيص أدوات التنبيب والجراحة (الشكل 1)

ملاحظة: يفصل هذا القسم أهم الخطوات في إعداد الأدوات المخصصة للتنبيب وجراحة PTB من مواد غير مكلفة ومتاحة بسهولة.

1. تحضير الأنبوب الرغامي (الشكل 1 أ).
   يمكن استخدام القسطرة الوريدية الشائعة (IV) للتنبيب وتهوية الفئران.
   1. اختر الحجم المناسب للقسط....

النتائج

تم اختيار الفئران C57BL / 6N (ذكور ، عمرها 5 أسابيع ، 17-20 جم) بشكل عشوائي إما إلى PTB شديد (sPTB ، 250 ميكرومتر ، n = 12) ، PTB خفيف (mPTB ، 450 ميكرومتر ، ن = 9) ، أو جراحة وهمية (وهمية ، ن = 15). تم إجراء تقييم وظيفة القلب عن طريق تخطيط صدى القلب 1 أسبوع و 3 أسابيع بعد الجراحة. تم إجراء قسطرة القلب اليمنى مع القتل الرحيم .......

Discussion

في هذه الورقة ، نقدم نموذجا للفأر لتضخم وفشل عربة سكن متنقلة ناتجة عن الضغط الزائد. نثبت أن: (i) PTB في الفئران اليافعة يمكن أن يحفز درجات متفاوتة من أمراض RV ، بدءا من تضخم RV الخفيف إلى فشل RV مع علامات خارج القلب من المعاوضة وتليف RV المؤكد نسيجيا. (ii) يمكن ملاحظة علامات خلل RV وقياسها عن طريق تخطيط.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Biosyn 6-0, monofilament, absorbable suture	Covidien	UM-986
Blunt cannula, 27G 0.4x0.25,	Sterican	292832
Bupaq Multidose vet 0,3 mg/ml (Buprenorphinum)	Salfarm Danmark	VNR 472318
C57BL/6NTac mice	Taconic Biosciences	C57BL/6NTac
Dagrofil 1, braided, non-absorbable suture	B Braun	C0842273
Depilatory cream	Veet	3132000
Disinfection Swabs (82% Ethanol + 0.5% Chlorhexidine)	Mediq	3340122
Disposable scalpels, size 11	Swann-Morton	11708353
Dräger Vapor 2000 Sevoflurane	Dräger	M35054
Eye oinment neutral, "Ophta"	Actavis	MTnr.: 07586 Vnr: 53 96 68
Horizon ligating clips	Teleflex Medical	5200 (IPN914931)
Horizon Open Ligating Clips applier, curved, 6" (15 cm)	Teleflex Medical	537061
Kitchen roll holder	n.a.	n.a.
Metal wire of different thickness	n.a.	n.a.
Microsurgical instruments set	Thompson	n.a.
MiniVent Ventilator	Hugo Sachs	Type 845
MS505S transducer	Visual sonics	n.a.
Rimadyl Bovis vet. 50 mg/ml (Carprofen)	Zoetis	MTnr: 34547, Vnr: 10 27 99,
Sevoflurane Baxter 100 %	Baxter Medical	MTnr: 35015
Silicone tubing	n.a.	n.a.
Soft plastic sheet	n.a.	n.a.
Stereomicroscope, "Opmi Pico"	Carl Zeiss Surgicals GmbH	n.a.
Ultrasonic probe holder/rail	Visual Sonics	11277
Varming plate	Visual sonics	11437
Venflon ProSafety, 22G, 0,9 x 25mm	Becton Dickinson	393222