Aşırı Basınca Bağlı Sağ Ventrikül Hipertrofisi ve Pulmoner Gövde Bantlaması Başarısızlığının Murin Modeli

Özet

Pulmoner gövde bandının neden olduğu sağ ventrikül basıncının aşırı yüklenmesinin bir murin modelini tanımladık. Entübasyon, cerrahi ve ekokardiyografi ile fenotipleme için ayrıntılı protokoller makaleye dahil edilmiştir. Entübasyon ve cerrahi için özel yapım aletler kullanılır ve modelin hızlı ve ucuz bir şekilde çoğaltılmasına olanak tanır.

Özet

Aşırı basınç yüküne bağlı sağ ventrikül (RV) yetmezliği, birçok kardiyovasküler ve pulmoner hastalıkta morbidite ve mortalite ile güçlü bir şekilde ilişkilidir. RV yetmezliğinin patogenezi karmaşıktır ve yeterince anlaşılamamıştır. RV yetmezliğinin tedavisi için yeni terapötik stratejiler belirlemek için sağlam ve tekrarlanabilir hayvan modelleri gereklidir. Pulmoner gövde bandı (PTB) modelleri, RV fonksiyonu pulmoner vaskülatürdeki değişikliklerden bağımsız olarak değerlendirilebildiği için popülerlik kazanmıştır.

Bu yazıda, 5 haftalık farelerde PTB'nin neden olduğu RV basınç aşırı yükünün bir murin modelini sunuyoruz. Model, hafif RV hipertrofisinden dekompanse RV yetmezliğine kadar farklı derecelerde RV patolojisini indüklemek için kullanılabilir. Entübasyon, PTB cerrahisi ve ekokardiyografi ile fenotipleme için ayrıntılı protokoller makaleye dahil edilmiştir. Ayrıca, entübasyon ve PTB cerrahisi için aletlerin özelleştirilmesi için talimatlar verilmiştir, bu da PTB modelinin hızlı ve ucuz bir şekilde çoğaltılmasını sağlar.

Pulmoner gövdeyi daraltmak için titanyum bağlama klipsleri kullanıldı ve yüksek derecede tekrarlanabilir ve operatörden bağımsız derecede pulmoner gövde daralması sağlandı. PTB'nin şiddeti farklı iç bağlama klips çapları (hafif: 450 μm ve şiddetli: 250 μm) kullanılarak derecelendirildi. Bu, korunmuş RV fonksiyonu ile hipertrofiden, azalmış kardiyak debi ve ekstrakardiyak bulgular ile dekompanse RV yetmezliğine kadar değişen RV patolojisi ile sonuçlandı. RV fonksiyonu ameliyattan 1 hafta ve 3 hafta sonra ekokardiyografi ile değerlendirildi. Ekokardiyografik görüntü örnekleri ve sonuçlar burada sunulmuştur. Ayrıca, sağ kalp kateterizasyonu ve kalp dokusunun histolojik analizlerinden elde edilen sonuçlar gösterilmiştir.

Giriş

Sağ ventrikül (RV) yetmezliği, kalp yetmezliği semptomları ve RV disfonksiyonundan kaynaklanan sistemik tıkanıklık belirtileri olan klinik bir sendromdur¹. RV disfonksiyonu, bir dizi kardiyovasküler ve pulmoner hastalıkta morbidite ve mortalite ile güçlü bir şekilde ilişkilidir². RV disfonksiyonunun etiyolojisi karmaşıktır ve altta yatan sinyal yolakları ve regülasyonu yeterince aydınlatılamamıştır.

Mevcut tedavilerden elde edilen gözlemler, iyileşmiş RV fonksiyonunun art yük azalması ile yakından ilişkili olduğunu ve pulmoner vaskülatürü birincil tedavi hedefi olarak düşündürdüğünü göstermekt....

Protokol

Çalışma, Danimarka Hayvan Deneyleri Müfettişliği (yetki numarası: 2021-15-0201-00928) tarafından onaylanmıştır ve ulusal laboratuvar hayvanları mevzuatına uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Bu çalışmada 5 haftalık erkek C57BL / 6N fareleri kullanıldı.

1. Entübasyon ve cerrahi için aletlerin özelleştirilmesi (Şekil 1)

NOT: Bu bölüm, ucuz ve kolayca bulunabilen malzemelerden entübasyon ve PTB cerrahisi için ısmarlama aletlerin hazırlanmasındaki en önemli adımları detaylandırmaktadır.

1. Endotrakeal tüpü hazırlayın (Şekil 1A<....

Tartışmalar

Bu yazıda, basınç aşırı yüküne bağlı RV hipertrofisi ve başarısızlığının bir murin modelini sunuyoruz. Şunu gösteriyoruz: (i) genç farelerde PTB, hafif RV hipertrofisinden, ekstrakardiyak dekompansasyon belirtileri ve histolojik olarak doğrulanmış RV fibrozu ile RV yetmezliğine kadar değişen derecelerde RV patolojisini indükleyebilir. (ii) RV disfonksiyonu belirtileri, PTB ameliyatından 1 ve 3 hafta sonra ekokardiyografi ile gözlemlenebilir ve ölçülebilir. (iii) RV hipertrofisinin derecesi.......

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Biosyn 6-0, monofilament, absorbable suture	Covidien	UM-986
Blunt cannula, 27G 0.4x0.25,	Sterican	292832
Bupaq Multidose vet 0,3 mg/ml (Buprenorphinum)	Salfarm Danmark	VNR 472318
C57BL/6NTac mice	Taconic Biosciences	C57BL/6NTac
Dagrofil 1, braided, non-absorbable suture	B Braun	C0842273
Depilatory cream	Veet	3132000
Disinfection Swabs (82% Ethanol + 0.5% Chlorhexidine)	Mediq	3340122
Disposable scalpels, size 11	Swann-Morton	11708353
Dräger Vapor 2000 Sevoflurane	Dräger	M35054
Eye oinment neutral, "Ophta"	Actavis	MTnr.: 07586 Vnr: 53 96 68
Horizon ligating clips	Teleflex Medical	5200 (IPN914931)
Horizon Open Ligating Clips applier, curved, 6" (15 cm)	Teleflex Medical	537061
Kitchen roll holder	n.a.	n.a.
Metal wire of different thickness	n.a.	n.a.
Microsurgical instruments set	Thompson	n.a.
MiniVent Ventilator	Hugo Sachs	Type 845
MS505S transducer	Visual sonics	n.a.
Rimadyl Bovis vet. 50 mg/ml (Carprofen)	Zoetis	MTnr: 34547, Vnr: 10 27 99,
Sevoflurane Baxter 100 %	Baxter Medical	MTnr: 35015
Silicone tubing	n.a.	n.a.
Soft plastic sheet	n.a.	n.a.
Stereomicroscope, "Opmi Pico"	Carl Zeiss Surgicals GmbH	n.a.
Ultrasonic probe holder/rail	Visual Sonics	11277
Varming plate	Visual sonics	11437
Venflon ProSafety, 22G, 0,9 x 25mm	Becton Dickinson	393222