מודל מורין של היפרטרופיה של חדר ימין הנגרמת על ידי עומס יתר וכישלון על ידי רצועות גזע ריאתי

Summary

אנו מתארים מודל מוריני של עומס יתר על לחץ החדר הימני המושרה על ידי רצועות גזע ריאתי. פרוטוקולים מפורטים לאינטובציה, ניתוח ופנוטיפ על ידי אקוקרדיוגרפיה כלולים במאמר. מכשירים בהתאמה אישית משמשים לאינטובציה וניתוח, המאפשרים שכפול מהיר וזול של הדגם.

Abstract

כשל בחדר ימין (RV) הנגרם כתוצאה מעומס יתר קשור קשר הדוק לתחלואה ותמותה במספר מחלות לב וכלי דם וריאות. הפתוגנזה של כשל RV היא מורכבת ואינה מובנת כראוי. כדי לזהות אסטרטגיות טיפוליות חדשות לטיפול בכשל קרוואנים, מודלים חזקים וניתנים לשחזור של בעלי חיים הם חיוניים. מודלים של רצועת גזע ריאתי (PTB) צברו פופולריות, שכן ניתן להעריך את תפקוד RV ללא תלות בשינויים בכלי הדם הריאתיים.

במאמר זה, אנו מציגים מודל מורין של עומס יתר בלחץ RV המושרה על ידי PTB בעכברים בני 5 שבועות. ניתן להשתמש במודל כדי לגרום לדרגות שונות של פתולוגיה של RV, החל מהיפרטרופיה קלה של RV ועד לכישלון RV מפוצל. פרוטוקולים מפורטים עבור אינטובציה, ניתוח PTB ופנוטיפ על ידי אקוקרדיוגרפיה כלולים במאמר. כמו כן, ניתנות הוראות להתאמה אישית של מכשירים לאינטובציה ולניתוחי PTB, המאפשרים שכפול מהיר וזול של מודל ה-PTB.

אטבי קשירת טיטניום שימשו כדי לכווץ את תא המטען הריאתי, מה שהבטיח רמה מאוד ניתנת לשחזור ובלתי תלויה במפעיל של התכווצות גזע ריאתי. חומרת ה-PTB דורגה על ידי שימוש בקטרים שונים של קליפס קשירה פנימי (קל: 450 מיקרומטר וחמור: 250 מיקרומטר). זה הביא לפתולוגיה של RV החל מהיפרטרופיה עם תפקוד RV שמור ועד כשל RV מפוצל עם תפוקת לב מופחתת וביטויים חוץ-לבביים. תפקוד RV הוערך על ידי אקוקרדיוגרפיה שבוע ושלושה שבועות לאחר הניתוח. דוגמאות לתמונות ותוצאות אקוקרדיוגרפיות מוצגות כאן. כמו כן, מוצגות תוצאות של צנתור לב ימין וניתוחים היסטולוגיים של רקמת הלב.

Introduction

אי ספיקת חדר ימין (RV) היא תסמונת קלינית עם תסמינים של אי ספיקת לב וסימנים של גודש מערכתי כתוצאה מתפקוד לקוי של RV¹. תפקוד לקוי של RV קשור קשר הדוק לתחלואה ותמותה במספר מחלות לב וכלי דם וריאות². האטיולוגיה של תפקוד לקוי של RV היא מורכבת, ומסלולי האיתות והוויסות הבסיסיים שלה עדיין לא הובהרו כראוי.

תצפיות מהטיפולים הנוכחיים מראות כי תפקוד RV משופר נמצא בקורלציה קרובה להפחתת עומס לאחר מכן, מה שמרמז על כלי דם ריאתיים כיעד הטיפול העיקרי³. זה מצביע על כך שלטיפולים הנוכחיים יש רק השפעה ישירה מינימלית על תפקוד RV, אשר יכול להידרדר גם לאחר שיפור בהתנגדות כלי הדם הריאתיים

Protocol

המחקר אושר על ידי המפקח הדני על ניסויים בבעלי חיים (מספר הרשאה: 2021-15-0201-00928) ובוצע בהתאם לחקיקה הלאומית בנושא חיות מעבדה. במחקר זה נעשה שימוש בעכברי C57BL/6N זכרים בני 5 שבועות.

1. התאמה אישית של מכשירים לאינטובציה ולניתוח (איור 1)

הערה: סעיף זה מפרט את השלבים החשובים ביותר בהכנת מכשירים בהתאמה אישית לאינטובציה וניתוחי PTB מחומרים זולים וזמינים.

1. הכינו את הצינור האנדוטרכאלי (איור 1A).
   ניתן להשתמש בצנתרים תוך-ורידיים נפוצים (IV) לאינטובציה ואוורור של עכברים.
   1. בחר את הגודל המתאים של קטטר תוך כלי המ....

תוצאות

עכברי C57BL/6N (זכר, בני 5 שבועות, 17-20 גרם) חולקו באקראי ל-PTB חמור (sPTB, 250 מיקרומטר, n = 12), PTB קל (mPTB, 450 מיקרומטר, n = 9), או ניתוח דמה (דמה, n = 15). הערכת תפקוד הלב בוצעה על ידי אקוקרדיוגרפיה שבוע ושלושה שבועות לאחר הניתוח. צנתור לב ימין עם המתת חסד לאחר מכן בוצע 3 שבועות לאחר הניתוח. איברים נשקלו, ורקמת לב הוכנ.......

Discussion

במאמר זה, אנו מציגים מודל מורין של היפרטרופיה וכישלון של RV הנגרמים על ידי עומס יתר. אנו מראים כי: (i) PTB בעכברים צעירים יכול לגרום לדרגות שונות של פתולוגיה של RV, החל מהיפרטרופיה קלה של RV ועד כשל RV עם סימנים חוץ-לבביים של פירוק ופיברוזיס RV מאושר היסטולוגית. (ii) סימנים של תפקוד לקוי של RV ניתן לראות.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Biosyn 6-0, monofilament, absorbable suture	Covidien	UM-986
Blunt cannula, 27G 0.4x0.25,	Sterican	292832
Bupaq Multidose vet 0,3 mg/ml (Buprenorphinum)	Salfarm Danmark	VNR 472318
C57BL/6NTac mice	Taconic Biosciences	C57BL/6NTac
Dagrofil 1, braided, non-absorbable suture	B Braun	C0842273
Depilatory cream	Veet	3132000
Disinfection Swabs (82% Ethanol + 0.5% Chlorhexidine)	Mediq	3340122
Disposable scalpels, size 11	Swann-Morton	11708353
Dräger Vapor 2000 Sevoflurane	Dräger	M35054
Eye oinment neutral, "Ophta"	Actavis	MTnr.: 07586 Vnr: 53 96 68
Horizon ligating clips	Teleflex Medical	5200 (IPN914931)
Horizon Open Ligating Clips applier, curved, 6" (15 cm)	Teleflex Medical	537061
Kitchen roll holder	n.a.	n.a.
Metal wire of different thickness	n.a.	n.a.
Microsurgical instruments set	Thompson	n.a.
MiniVent Ventilator	Hugo Sachs	Type 845
MS505S transducer	Visual sonics	n.a.
Rimadyl Bovis vet. 50 mg/ml (Carprofen)	Zoetis	MTnr: 34547, Vnr: 10 27 99,
Sevoflurane Baxter 100 %	Baxter Medical	MTnr: 35015
Silicone tubing	n.a.	n.a.
Soft plastic sheet	n.a.	n.a.
Stereomicroscope, "Opmi Pico"	Carl Zeiss Surgicals GmbH	n.a.
Ultrasonic probe holder/rail	Visual Sonics	11277
Varming plate	Visual sonics	11437
Venflon ProSafety, 22G, 0,9 x 25mm	Becton Dickinson	393222