Un modello murino di ipertrofia ventricolare destra indotta da sovraccarico di pressione e insufficienza mediante bande del tronco polmonare

Riepilogo

Descriviamo un modello murino di sovraccarico di pressione ventricolare destra indotto dal banding polmonare del tronco. Nel documento sono inclusi protocolli dettagliati per l'intubazione, la chirurgia e la fenotipizzazione mediante ecocardiografia. Per l'intubazione e la chirurgia vengono utilizzati strumenti su misura, che consentono una riproduzione rapida ed economica del modello.

Abstract

L'insufficienza ventricolare destra (RV) causata da un sovraccarico di pressione è fortemente associata a morbilità e mortalità in una serie di malattie cardiovascolari e polmonari. La patogenesi dell'insufficienza ventricolare sinistra è complessa e rimane inadeguatamente compresa. Per identificare nuove strategie terapeutiche per il trattamento dell'insufficienza ventricolare destra, sono essenziali modelli animali robusti e riproducibili. I modelli di bendaggio del tronco polmonare (PTB) hanno guadagnato popolarità, poiché la funzione del ventricolo destro può essere valutata indipendentemente dai cambiamenti nella vascolarizzazione polmonare.

In questo articolo, presentiamo un modello murino di sovraccarico di pressione del ventricolo destro indotto da PTB in topi di 5 settimane. Il modello può essere utilizzato per indurre diversi gradi di patologia del ventricolo destro, che vanno dalla lieve ipertrofia del ventricolo destro al fallimento del ventricolo destro scompensato. Nel documento sono inclusi protocolli dettagliati per l'intubazione, la chirurgia PTB e la fenotipizzazione mediante ecocardiografia. Inoltre, vengono fornite le istruzioni per la personalizzazione degli strumenti per l'intubazione e la chirurgia PTB, consentendo una riproduzione rapida ed economica del modello PTB.

Sono state utilizzate clip di legatura in titanio per restringere il tronco polmonare, garantendo un grado di costrizione del tronco polmonare altamente riproducibile e indipendente dall'operatore. La gravità del PTB è stata classificata utilizzando diversi diametri della clip di legatura interna (lieve: 450 μm e grave: 250 μm). Ciò ha portato a una patologia del ventricolo destro che va dall'ipertrofia con funzione del ventricolo destro conservata all'insufficienza del ventricolo destro scompensata con ridotta gittata cardiaca e manifestazioni extracardiache. La funzione del ventricolo destro è stata valutata mediante ecocardiografia a 1 settimana e 3 settimane dopo l'intervento chirurgico. Esempi di immagini ecocardiografiche e risultati sono presentati qui. Inoltre, vengono mostrati i risultati del cateterismo cardiaco destro e le analisi istologiche del tessuto cardiaco.

Introduzione

L'insufficienza ventricolare destra (RV) è una sindrome clinica con sintomi di insufficienza cardiaca e segni di congestione sistemica derivanti da disfunzione RV¹. La disfunzione del ventricolo destro è fortemente associata alla morbilità e alla mortalità in un certo numero di malattie cardiovascolari e polmonari². L'eziologia della disfunzione del ventricolo destro è complessa e le sue vie di segnalazione e regolazione sottostanti rimangono inadeguatamente chiarite.

Le osservazioni delle terapie attuali mostrano che il miglioramento della funzione del ventricolo destro è strettamente correla....

Protocollo

Lo studio è stato approvato dall'Ispettorato danese per gli esperimenti sugli animali (numero di autorizzazione: 2021-15-0201-00928) ed è stato eseguito in conformità con la legislazione nazionale sugli animali da laboratorio. Questo studio ha utilizzato topi maschi C57BL/6N di 5 settimane.

1. Personalizzazione degli strumenti per l'intubazione e la chirurgia (Figura 1)

NOTA: Questa sezione descrive in dettaglio le fasi più importanti nella preparazione di strumenti su misura per l'intubazione e la chirurgia PTB con materiali economici e facilmente rep....

Discussione

In questo articolo, presentiamo un modello murino di ipertrofia e fallimento del ventricolo destro indotto da sovraccarico di pressione. Dimostriamo che: (i) il PTB nei topi giovani può indurre vari gradi di patologia del ventricolo destro, che vanno da una lieve ipertrofia del ventricolo destro all'insufficienza del ventricolo destro con segni extracardiaci di scompenso e fibrosi del ventricolo destro istologicamente confermata. (ii) I segni di disfunzione del ventricolo destro possono essere osservati e quantificati m.......

Materiali

Name	Company	Catalog Number	Comments
Biosyn 6-0, monofilament, absorbable suture	Covidien	UM-986
Blunt cannula, 27G 0.4x0.25,	Sterican	292832
Bupaq Multidose vet 0,3 mg/ml (Buprenorphinum)	Salfarm Danmark	VNR 472318
C57BL/6NTac mice	Taconic Biosciences	C57BL/6NTac
Dagrofil 1, braided, non-absorbable suture	B Braun	C0842273
Depilatory cream	Veet	3132000
Disinfection Swabs (82% Ethanol + 0.5% Chlorhexidine)	Mediq	3340122
Disposable scalpels, size 11	Swann-Morton	11708353
Dräger Vapor 2000 Sevoflurane	Dräger	M35054
Eye oinment neutral, "Ophta"	Actavis	MTnr.: 07586 Vnr: 53 96 68
Horizon ligating clips	Teleflex Medical	5200 (IPN914931)
Horizon Open Ligating Clips applier, curved, 6" (15 cm)	Teleflex Medical	537061
Kitchen roll holder	n.a.	n.a.
Metal wire of different thickness	n.a.	n.a.
Microsurgical instruments set	Thompson	n.a.
MiniVent Ventilator	Hugo Sachs	Type 845
MS505S transducer	Visual sonics	n.a.
Rimadyl Bovis vet. 50 mg/ml (Carprofen)	Zoetis	MTnr: 34547, Vnr: 10 27 99,
Sevoflurane Baxter 100 %	Baxter Medical	MTnr: 35015
Silicone tubing	n.a.	n.a.
Soft plastic sheet	n.a.	n.a.
Stereomicroscope, "Opmi Pico"	Carl Zeiss Surgicals GmbH	n.a.
Ultrasonic probe holder/rail	Visual Sonics	11277
Varming plate	Visual sonics	11437
Venflon ProSafety, 22G, 0,9 x 25mm	Becton Dickinson	393222