这些方法可以帮助回答胆道间体症中的关键问题。BA对疾病、发病机制和治疗的看法。该技术的主要优点是,新生儿小鼠注射技术将有助于研究人员熟悉其他新生儿小鼠模型研究的方法。
该技术的影响延伸到BA的治疗作为几个纳米粒子的意义虽然这种方法可以提供对BA治疗的洞察力,它也可以应用于其他系统,如新生儿小鼠模型的发病机制这一般的方式,这种方法将因为小尺寸的新生儿小鼠可以导致注射过程的建立。为了在小鼠模型中建立胆道动脉瘤,将恒河罗托病毒加载到装有29量针的1毫升胰岛素注射器中,并在出生后24小时内将Dulbecco"修改鹰"的20微升中第5个斑块形成细胞的1.2倍至第5个斑块形成单位的病毒。然后将新生儿返回给母亲进行日常监测和称重。
当新生儿动物开始出现黄斑迹象时,装上一毫升注射器,用29粒针,每只动物用50微升新准备的银纳米粒子胶原液溶液,用无名指将一只黄斑动物的腿斜按在右大腿上。慢慢地将针以15度角引入内膜,到达肝脏下边缘的表面时,注射银纳米粒子胶原蛋白混合物。当所有混合物都注射后,慢慢取出针头,让动物休息十分钟,让胶原蛋白凝固,防止母亲舔注射部位。
然后将小鼠返回到笼子进行日常监测。在接种后的第九天或第十二天,用75%乙醇对上腹部和下腹部进行消毒,并固定受感染小鼠的四肢。沿中线打开皮肤、肌肉和内皮,使用无菌棉签去除胃肠道,完全暴露膜片。
将卸载的一毫升胰岛素注射器的针头插入心脏的左心室,然后缓慢缩回注射器柱塞以获得最大血量。将血液转移到1.5毫升管中,在室温下孵育30分钟,通过离心使红血球产生颗粒。然后收集血清,供以后分析。
对于肝外胆管术,使用棉签充分暴露肝脏、胆囊和肝外胆管。在解剖显微镜下拍摄肝脏和胆管的外观后,使用眼膜钳轻轻抓住胆囊底部,并缓慢地将装有甲基蓝溶液的一毫升注射器的针头插入胆囊腔。用钳子抓住针头,慢慢注入10-20微升的甲基蓝。
当染料通过肝外胆管进入杰朱努姆时,获取另一张组织的照片。然后对于赤氧素和 eosin 染色,从每种动物中收获肝脏,在 10% 的甲醛中过夜固定。第二天早上,将样品嵌入石蜡中进行分段,然后根据标准组织病理学分析方案,用乙醇系列和血氧素和 eosin 染色去蜡再水化。
与未经治疗的胆汁闭塞小鼠相比,银纳米颗粒处理动物表现出减少黄斑并保持正常体重。胆红素代谢水平和肝转亚酶水平下降到正常控制值,表明银纳米粒子大大改善肝功能。与银纳米粒子处理后,用甲基蓝色染色的异肝胆管学证实胆管具有抗性,H&E染色显示,与对控组相比,用银纳米粒子治疗的小鼠的肝入口区域炎症细胞渗透显著减少。
流位和公制分析表明,与未经治疗的恒河轮状病毒感染小鼠相比,银纳米粒子治疗动物肝脏中的NK细胞明显减少。与恒河轮状病毒感染动物相比,进一步免疫组织化学染色表明,在银纳米粒子处理小鼠的门户三合会中,NK细胞标记染色的表达大幅减少。在尝试此过程时,重要的是要记住,练习将获得最佳效果。
按照这个程序,如结合银纳米粒子与其他的东西的方法可以执行,以回答有关在小鼠模型中BA治疗BA的病变活性的其他问题。就是发展。这项技术为胃肠病学领域的研究人员提供了一条治疗BA或其他疾病(如肝脏胆结)的方法。
不要忘记,使用研究轮状病毒可能极其危险,因此在执行此程序时应始终采取预防措施,例如佩戴适当的个人防护设备。