Эти методы могут помочь ответить на ключевые вопросы в желчных атрезии. Из BA мнения о болезни, патогенез и лечение. Основным преимуществом этого метода является то, что метод инъекций неонатальной мыши поможет исследователям ознакомиться с методом для других исследований модели неонатальной мыши.
Последствия этого метода распространяются на терапию БА, как несколько наночастиц значение Хотя этот метод может обеспечить понимание лечения БА, он также может быть применен к другим системам, таким как неонатальные модели мыши патогенеза этого В целом в том, как это к этому методу будет, потому что небольшой размер неонатальных мышей может привести к созданию процесса инъекций. Чтобы установить желчный атрезия в модели мыши, загрузите ротовирус резуса в один миллилитр инсулиновый шприц, оснащенный иглой 29-го калибра, и интраперитонически доставите 1,2 раза от 10 до 5-го бляшка-формирующих единиц вируса в 20 микролитерах модифицированного орла Dulbecco Medium каждому новорожденному в течение 24 часов после рождения. Затем верните новорожденных к матери для ежедневного мониторинга и взвешивания.
Когда неонатальные животные начинают проявлять признаки желтухи, загрузите один миллилитр шприц, оснащенный иглой 29-го калибра с 50 микролитров свежеприготовленного раствора коллагена наночастиц серебра на животное и используйте безымянный палец, чтобы нажать ногу одного желтухи животного косо над правым бедром. Медленно введите иглу под углом 15 градусов в брюшной полышко, и, достигнув поверхности нижнего края печени, введите смесь коллагена наночастиц серебра. Когда вся смесь была введена, медленно удалить иглу и позволить животному отдохнуть в течение десяти минут, чтобы коллаген затвердеть и предотвратить мать от лизать место инъекции.
Затем вернуть мышей в свои клетки для ежедневного мониторинга. На девятый-двенадцать день после прививки стерилизовать верхнюю и нижнюю части живота 75%этанолом и обездвижить конечности инфицированной мыши. Откройте кожу, мышцы и брюшной полости вдоль средней линии к ксифоиду, и использовать стерильный ватный тампон, чтобы удалить желудочно-кишечного тракта, чтобы полностью подвергать диафрагмы.
Вставьте иглу выгруженного одного миллилитров инсулина шприц в левый желудочек сердца, и медленно втягивать шприц поршень, чтобы получить максимальный объем крови. Передача крови в 1,5 миллилитровую трубку в течение 30 минут инкубации при комнатной температуре и гранулы красных кровяных телец центрифугации. Затем соберите сыворотку для более длительного анализа.
Для экстрагепатической холангиографии используйте ватный тампон, чтобы полностью разоблачить печень, желчный пузырь и экстрагепатические желчные протоки. После фотографирования внешнего вида печени и желчных протоков под рассеченным микроскопом используйте офтальмологические типсы, чтобы аккуратно схватить дно желчного пузыря и медленно вставить иглу одного миллилитрового шприца, загруженного метиленовым синим раствором, в полость желчного пузыря. Хватая иглу типсами, медленно настоять 10-20 микролитров метиленового синего цвета.
Когда краситель проходит через экстрагепатические желчные протоки в jejunum, получить другую фотографию ткани. Затем для гематоксилина и эозина окрашивания, урожай печени от каждого животного для ночной фиксации в 10%формалин. На следующее утро, вставлять образцы в парафин для секций, а затем де-воск регидратации с этанолом серии и гематоксилин и эозин окрашивания в соответствии со стандартными гистопатологических протоколов анализа.
По сравнению с необработанными желчными мышами атрезии, наночастицы серебра обработанные животные демонстрируют снижение желтухи и поддерживать их нормальную массу тела. Уровни метаболизма билирубина и печеночной трансаминазы падают до нормальных значений контроля, предполагая, что наночастицы серебра значительно улучшают функцию печени. Экстрагепатическое холангиография с метиленовым синим окрашиванием подтверждает проходимость желчных протоков после лечения наночастицами серебра, а окрашивание H и E выявляет значительное снижение инфильтрации воспалительных клеток в области печеночных порталов мышей, обработанных наночастицами серебра по сравнению с контролем.
Участок потока и метрический анализ показывают наличие значительно меньшего количества НК-клеток в печени наночастиц серебра обработанных животных по сравнению с необработанными резус ротавирус инфицированных мышей. Дальнейшее иммуногистохимическое окрашивание выявляет существенно уменьшенное выражение окрашивания маркера НК-клеток в порталной триаде наночастиц серебра обработанных мышей по сравнению с резус-ротавирусом инфицированных животных. При попытке этой процедуры, важно помнить, что практика даст наилучшие результаты.
После этой процедуры, как методы, как спряжение наночастиц серебра к другим вещам могут быть выполнены, чтобы ответить на дополнительные вопросы о деятельности поражений в лечении БА в мышиных моделях. является развитие. Этот метод предоставил способ для исследователей в области гастроэнтерологии к БА или других заболеваний, таких как холестаз в печени.
Не забывайте, что работа с научно-исследовательским ротавирусом может быть чрезвычайно опасной, и, таким образом, такие меры предосторожности, как ношение соответствующего средства индивидуальной защиты, всегда должны приниматься при выполнении этой процедуры.
