이러한 방법은 담즙 atresia의 주요 질문에 대답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 질병, 병기 및 치료에 대한 BA 보기. 이 기술의 주요 장점은 신생아 마우스 주입 기술이 연구원이 다른 신생아 마우스 모델 연구를위한 방법에 익숙해지는 데 도움이 된다는 것입니다.
이 기술의 의미는 BA 치료에 대한 통찰력을 제공할 수 있지만, 이 방법은 BA 치료에 대한 통찰력을 제공할 수 있지만, 일반적으로 이 방법으로 신생아 마우스의 작은 크기가 주입 공정의 구축을 초래할 수 있기 때문에 이 방법으로 이 방법으로 적용될 수 있다. 마우스 모델에 담즙 증쇠를 확립하기 위해, 29 게이지 바늘이 장착된 1밀리리터 인슐린 주사기에 rhesus rotovirus를 적재하고, 20마이크로리터의 20마이크로리터에서 5번플라크 형성 유닛에 1.2배의 바이러스를 전달하여 24시간 이내에 각각 신천시 마다 신생물에 대한 수정된 이글 매체를 제공합니다. 그런 다음 신생아를 어머니에게 돌려 보내 매일 모니터링하고 계량하십시오.
신생아 동물이 황달의 징후를 보이기 시작하면, 동물당 50 마이크로리터의 29 게이지 바늘을 장착 한 밀리리터 주사기를 적재하고 링 핑거를 사용하여 jadiced 동물의 다리를 오른쪽 허벅지 위에 비스듬히 누르는 다정한 동물의 다리를 누릅니다. 천천히 15도 각도로 바늘을 회합에 삽입하고, 간 하부 가장자리의 표면에 도달하면 은 나노 입자 콜라겐 혼합물을 주입한다. 모든 혼합물을 주입했을 때, 천천히 바늘을 제거하고 콜라겐이 고화하고 어머니가 주입 부위를 핥는 것을 방지하기 위해 10 분 동안 동물이 휴식을 취할 수 있게합니다.
그런 다음 매일 모니터링을 위해 마우스를 케이지로 돌려놓습니다. 접종 후 9일 또는 12일째에 75%에탄올로 상하 복부를 살균하고 감염된 마우스의 사지를 고정시합니다. 피부, 근육 및 복막은 중진선을 따라 xyphoid에 열고 멸균 면봉을 사용하여 위장관을 제거하여 횡격막을 완전히 노출시킵니다.
언로드된 1밀리리터 인슐린 주사기의 바늘을 심장의 왼쪽 심실로 삽입하고 주사기 플런저를 천천히 철회하여 최대 혈액 량을 얻습니다. 실온에서 30분 동안 1.5 밀리리터 튜브로 혈액을 옮기고 적혈구를 원심분리에 의해 펠릿을 전달한다. 그런 다음 나중에 분석을 위해 혈청을 수집합니다.
외형 담낭의 경우 면봉을 사용하여 간, 담낭 및 외간 담관을 완전히 노출하십시오. 해부 현미경으로 간과 담관의 모양을 촬영 한 후, 부드럽게 담낭의 바닥을 잡고 천천히 담낭 구멍에 메틸렌 블루 용액로드 한 밀리리터 주사기의 바늘을 삽입하는 안과 집게를 사용합니다. 집게로 바늘을 잡고 천천히 메틸렌 블루의 10-20 마이크로 리터를 주입합니다.
염료가 엑스트라간 담관을 통해 제주눔으로 통과하면 조직의 또 다른 사진을 얻을 수 있다. 그런 다음 헤마톡시린과 에오신 염색을 위해 각 동물로부터 간을 수확하여 10%의 포르말린에서 하룻밤 동안 고정하십시오. 다음 아침, 파라핀에 샘플을 포함시켜 단면을 위해, 표준 조직 병리학 적 분석 프로토콜에 따라 에탄올 계열 및 헤마톡시린 및 에신 염색으로 왁싱 재 수화를 제거했습니다.
치료되지 않은 담즙 아레시아 마우스에 비해 은 나노 입자 처리 된 동물은 황달감소를 입증하고 정상적인 체중을 유지합니다. 빌리루빈 대사와 간 트랜스아미나아제의 수준은 정상적인 대조값에 떨어지며, 은 나노 입자가 간 기능을 크게 향상시킨다는 것을 시사합니다. 메틸렌 블루 염색을 가진 엑스트라간 담랑지예술은 은 나노 입자 처리 후에 담관 가부장제를 확인하고, H&E 염색은 대조군과 비교하여 은 나노 입자로 취급된 마우스의 간 포털 영역에서 염증성 세포 침투의 현저한 감소를 제시합니다.
유량 부위 및 메트릭 분석은 치료되지 않은 류수스 로타바이러스 감염 마우스에 비해 은 나노 입자 처리 동물의 간에서 상당히 적은 NK 세포의 존재를 나타냅니다. 추가면역화학적 염색은 류수스 로타바이러스 감염된 동물에 비해 은 나노입자 처리마우스의 포털 트라이어드에서 염색되는 NK 세포 마커의 현현이 실질적으로 감소된 것을 보여준다. 이 절차를 시도하는 동안, 연습이 최상의 결과를 줄 것이라는 점을 기억하는 것이 중요합니다.
이 절차에 따라, 다른 것들에 은 나노 입자를 연상 같은 방법으로 마우스 모델에서 BA의 치료에 병변의 활동에 대한 추가 질문에 대답하기 위해 수행 될 수있다. 개발입니다. 이 기술은 BA 또는 간에서 cholestasis와 같은 그밖 질병에 위장학의 필드에 있는 연구원을 위한 방법을 제공했습니다.
연구 로타바이러스와 협력하는 것은 매우 위험할 수 있으므로 이 절차를 수행할 때 적절한 개인 보호 장비를 착용하는 것과 같은 예방 조치를 취해야 합니다.
