斑马鱼内生应激研究的行为方法

新的坦克检测将结合强大的基因工具在斑马鱼提供了一种方法，解剖大脑如何调节压力和神经回路如何可能解除调节。斑马鱼和哺乳动物之间的遗传和神经元信号通路高度保守，这种技术可以帮助我们进一步理解压力反应背后的机制。该方法不是斑马鱼特有的，已经用于墨西哥盲洞鱼，因此有可能扩展到其他鱼类物种。

试运行可能有助于确定动物与背景的正确照明和对比度，以实现成功的跟踪。检测很少使用，但可以是一个涉及的过程。可视化这些步骤将有助于其他研究人员成功执行该过程。

实验室博士后杰奎琳·钦和本科生莉迪雅·阿尔伯特将演示这一程序。首先，将250毫升的烧杯和至少两个储罐装满鱼系统水。在测试的早晨，将每个实验条件的至少10条成年斑马鱼转移到单独的保持池中，然后再将所有鱼转移到行为室至少一小时。

标记水箱，使动物的状况或基因型对实验者视而不见，并使用网轻轻地将单个成人放入预填充的烧杯中。让成年鱼在烧杯中适应10分钟，然后轻轻地将水从烧杯中倒入实验新水箱中的鱼和鱼。一旦鱼在鱼缸里，开始相机记录并离开设置，以防止鱼的额外痛苦。

录音完成后，将个人从新型水箱中取出，将鱼放入新的储罐中。要评估特定药物的效果，在系统水250毫升烧杯中稀释药物的工作浓度。仅使用带系统水的烧杯作为控制。

掩盖药物和控制烧杯的身份，以确保测试仪在分析后对治疗条件视而不见，并执行新的罐体测试，如证明获得基线行为应激反应。在基线记录结束时，使用网立即将鱼转移到测试烧杯之一 10 分钟，然后将鱼转移到仅含有新鲜系统水的洗净烧杯中。重要的是使用为每个治疗烧杯指定的单独蚊帐，以防止对控制鱼的意外给药，特别是在涉及几种药物治疗时。

10分钟后，将鱼放入新的新型鱼缸中进行第二次新型鱼缸测试。在测试结束时，将成年斑马鱼转移到一个新的保持水箱中，用新鲜的系统水替换第二新水箱中的系统水，以防止实验药物交叉污染。在所有的试验结束时，将个体返回鱼类设施。

在这里，在10分钟新颖的水箱测试的第一分钟和最后一分钟，一只斑马鱼的运动活动。当第一次引入鱼缸时，鱼通常大部分时间都花在新鱼缸的底部。然而，随着时间的推移，成年鱼表明在鱼缸顶部花费的时间逐渐增加。

事实上，与新型坦克测试的最后一分钟相比，第一分钟在坦克顶部花费的总时间要短得多。相比之下，第一分钟和最后一分钟之间的总距离没有显著差异。在这个具有代表性的实验中，对成年斑马鱼运动路径的分析表明，单独接触车辆的成年人在治疗前和治疗后游泳活动之间几乎没有差别。

相比之下，接触心解药物的成年人在水箱顶部花费了大量时间，而药物暴露前同一条鱼的运动路径则花费大量时间。这些差异并不是由于一般运动较少，因为任何组都测量了旅行距离的显著差异。由于行为节律受昼夜过程的影响，请确保在每个实验的同一时间在不同天执行实验复制。

可以执行其他行为检测，如开场测试或其他压力生理测量，以进一步验证从新型坦克潜水试验中获得的结果。此方法可用于高吞吐量检测，用于解决与压力、恐惧和焦虑相关的问题。