1 Nach der Erstellung der Zelllinien2, die das HaloTag-Protein von Interesse und Halo-H2B exprimieren, 3 Bereiten Sie das Halo-Liganden-Färbereagenz 4 separat für beide vor. 5 Spülen Sie die Zellen mit zwei Millilitern PBS. 6 Fügen Sie einen Halo-Liganden hinzu, der Medium 7 enthält, und inkubieren Sie sie bei 37 Grad Celsius 8 mit 5 % Kohlendioxid für eine Stunde.
9 Nach dem Entfernen des Färbemediums 10 werden die Zellen viermal mit PBS 11 gespült und mit frischem Medium inkubiert, das frei von Halo-Liganden ist. 12 Nach vier solcher Spülinkubationszyklen 13 überträgt man den Deckglas mit den Zellen 14 in eine mit dem Mikroskoptisch kompatible Kammer 15 mit einer sterilen Pinzette. 16 Geben Sie vor der Bildgebung phenolrotfreies Medium in die Kammer.
