Ce protocole démontre la construction d’un vecteur d’expression génique long et complexe. Lorsqu’un fragment d’ADN complet ne peut pas être obtenu par une seule PCR à partir d’ADNc, ou que le vecteur d’expression génique complet ne peut pas être obtenu par recombinaison homologue à inserts multiples in vitro, cette méthode est applicable. Actuellement, le clonage par ligature à inserts multiples est utilisé pour obtenir un fragment d’ADN complet à cloner dans un vecteur approprié.
Cette méthode permet de réaliser la délétion ou la mutation de gènes cibles et de joindre efficacement un grand nombre de fragments d’ADN au vecteur d’expression.