Questa ricerca è stata sostenuta dal Ministero federale tedesco dell&#39;Istruzione e della ricerca (BMBF) finanziato &quot;Virtual Liver Network&quot;. Vorrei ringraziare Frank Schubert e Rene Gumpert dal media center di Jena University Hospital per il loro aiuto nella produzione di video e creare l&#39;animazione e Isabel Jank per registrare l&#39;audio.

Housing e tutte le procedure eseguite sono in conformità con la legislazione tedesca Animal Welfare. 1 Sensori di calibrazione (Seguire le istruzioni del produttore per la taratura dei sensori) 1.1) la calibrazione del catetere Millar. Pre-immergere la punta del catetere in acqua sterile o soluzione salina per 30 minuti prima di bilanciare (azzeramento) e la calibrazione. <ol><li> Collegare il sensore Millar al canale millar1 di ponte amplificatore e inserire la punta del sensore Millar nella colonna d&#39;acqua. </li><li> Impostare il valore della colonna d&#39;acqua a 0 cm H 2 O. Nella finestra del software di analisi dei dati, scegliere il ponte amplificare e azzerare esso. Il valore di riferimento 0 cm H 2 O può essere impostato. </li><li> Impostare il valore della colonna d&#39;acqua di 20 cm H 2 O. Esegui avanzamento finestra del software di analisi dei dati, e stop. Scegli &quot;unità&quot; nella finestra di ponte amplificare, impostare la linea di base di 0 e 20 cm H 2 O di conseguenza. Regolare l &#39;&quot;unità&quot; per cmH &lt;sub&gt; 2 O. </li><li> Calibrare il millar2 per la misurazione della PAC allo stesso modo (impostare due linea di base 90 e 110 cm H 2 O). </li></ol> 1.2) Calibrazione sonda flusso sanguigno <ol><li> Mettere la sonda in acqua deionizzata. Collegare la sonda con transonico sistema sonda di mandata. </li><li> Nella finestra del software di analisi dei dati, scegliere Input amplifica a zero la sonda di mandata. Regolare le unità. </li><li> Premere il pulsante di &quot;canale di test&quot; per raccogliere il segnale: se il segnale ha 3-4 bar, significa che il segnale è buono. Nel caso in cui un buon segnale viene acquisito, la procedura può essere continuata. </li><li> Premere il pulsante di &quot;canale zero&quot; e il canale di scala per vedere se il valore è stato calibrato o no. </li><li> Premere il pulsante di &quot;canale di misura&quot; per la misurazione successiva. </li></ol> 2 Preparare il mouse per la procedura chirurgica <ol><li> Posizionare il mouse in una camera di induzione e anestetizzare il mouse con il 2% isoflurano e0,3 ml / min di ossigeno. L&#39;operazione può essere eseguita se la convergenza pizzico ritiro riflesso del mouse è assente. </li><li> Accorciare il pelo delle regioni chirurgici, tra cui il collo sinistro e l&#39;addome. </li><li> Posizionare il mouse sulla tabella operazione e fissarla con nastri. Utilizzare veterinario unguento sugli occhi per prevenire la secchezza durante il periodo di funzionamento. </li><li> Inserire un cuscino garza sotto il collo per l&#39;esposizione ottimale del campo operatorio di collo. </li><li> Disinfettare il campo di funzionamento e posizionare garze sterilizzate per coprire il mouse solo lasciando il campo operatorio aperto. </li></ol> 3. parametri vitali di misura <ol><li> Inserire gli aghi ECG per via sottocutanea nelle zampe del topo. </li><li> Posizionare il sensore respiratorio sotto la parte posteriore del mouse. </li><li> Posizionare la sonda di temperatura nel retto del mouse. </li><li> Record di temperatura, ECG e la frequenza respiratoria del mouse nel software di analisi dei dati. </li></ol> 4. collo Operazione per Systemic monitoraggio cardiovascolare 4.1) Vessel dissezione <ol><li> Identificare la linea mediana del collo, punto medio della clavicola, l&#39;angolo della mandibola. </li><li> Effettuare una incisione longitudinale 2 centimetri dall&#39;angolo della mandibola al punto medio clavicola che è 0,5 centimetri sul lato sinistro della linea centrale. </li><li> Sezionare la ghiandola sottomandibolare, capovolgerlo e coprire con garza imbevuta di soluzione salina. </li><li> Identificare la vena giugulare, sezionarlo e posizionare tre 6-0 punti di sutura in seta sotto la vena per la legatura più tardi e la fissazione. </li><li> Identificare il muscolo sternocleidomastoideo, separarlo dal ventre superiore del ventre omoioideo e posteriore del muscolo digastrico, e tirarlo con un divaricatore per una facile esposizione della carotide. </li><li> Sezionare l&#39;arteria carotide e posizionare tre 6-0 punti di sutura in seta sotto l&#39;arteria per la legatura più tardi e la fissazione. </li></ol> 4.2) misura il flusso di sangue dell&#39;arteria carotidea <ol><li> Posizionare il transonicosondare intorno alla carotide, mantenerlo stabile, e ottimizzare il contatto con ultrasuoni gel o soluzione salina. </li><li> Record velocità del flusso sanguigno dell&#39;arteria carotide come indicato sul piccolo schermo del dispositivo transonica utilizzando il software di analisi dei dati </li><li> Rimuovere la sonda dopo aver completato la misurazione </li></ol> 4.3) misurazione della pressione arteriosa carotidea (PAC) <ol><li> Legare l&#39;estremità distale della carotide e bloccare la sua estremità prossimale. </li><li> Mettere 2 suture di fissaggio intorno alla carotide. Utilizzare 10-0 prolene per il soggiorno sutura. </li><li> Fai una piccola incisione sulla parete anteriore della nave. </li><li> Inserire il catetere Millar e fissarlo con punti di sutura pre-posto. </li><li> Registrare la PAC nel software di analisi dei dati. </li></ol> 4.4) misura il flusso di sangue della vena giugulare <ol><li> Sollevare la vena giugulare e posizionare la sonda flusso transonico per misurare la portata. </li><li> Registrare la velocità di flusso nel software di analisi dei dati. </li></ol> 4.5) misurazione della pressione venosa centrale (CVP) <ol><li> Bloccare l&#39;estremità prossimale della vena giugulare e legare l&#39;estremità distale. </li><li> Tagliare una piccola incisione utilizzando microscissors sulla parete anteriore della nave. </li><li> Inserire il catetere pieno di liquido e fissarlo con le linee di sutura pre-posto. </li><li> Registrare il CVP nel software di analisi dei dati. </li></ol> 5. addominale funzionamento per l&#39;acquisizione di epatiche Emodinamica 5.1) Identificazione della nave <ol><li> Effettuare una incisione trasversale sull&#39;addome. </li><li> Eventerate l&#39;intestino a sinistra e coprire con garza umida. </li><li> Identificare la vena cava inferiore, la vena porta, l&#39;arteria epatica comune e l&#39;arteria epatica propria. </li><li> Eliminare alcuni salina calda nell&#39;addome e sulla superficie degli intestini ogni 5 min durante l&#39;intera procedura di monitoraggio. </li></ol> 5.2) Misurazione del portale flusso sanguigno <ol><li> Sezionare la vena porta. </li><li> Mettere 6-0 seta sotto la vena porta per facilitare il sollevamento della nave quando si posiziona la sonda di flusso. </li><li> Posizionare la sonda di flusso transonico attorno alla vena porta e misurare la sua velocità di flusso di sangue. </li><li> Registrare la velocità di flusso del sangue della vena porta. </li></ol> 5.3) Misura del flusso dell&#39;arteria epatica comune <ol><li> Sezionare l&#39;arteria epatica comune con cautela. </li><li> Posizionare un 6-0 sutura di seta intorno alla nave per facilitare il sollevamento della nave. </li><li> Posizionare la sonda di mandata intorno all&#39;arteria. </li><li> Misurare il flusso sanguigno e acquisire i dati. </li></ol> 5.4) Misura della pressione della vena porta (PVP) <ol><li> Scegli un ramo della vena mesenterica con pochi rami laterali, che drena direttamente nella vena porta. </li><li> Legare l&#39;estremità distale della vena mesenterica selezionato. Assicurarsi che la legatura è vicino al tubo intestinale. Legare i suoi piccoli rami </li><li> Mettere 2 Fissaggio suture utilizzando 6-0 prolene intorno alla vena. Il punto chiave di questa procedura è quello di evitare di toccare l&#39;arteria mesenterica quando legatura della vena. </li><li> Fissare l&#39;estremità prossimale della vena porta. </li><li> Place 2 Stay suture utilizzando 10-0 prolene. Alcuni sanguinamento si verifica in quanto il soggiorno sutura dovrebbe penetrare la parete vascolare dell&#39;ammenda vena mesenterica. </li><li> Fai una piccola incisione sulla vena con un microscissor obliquamente a un angolo di 45 gradi. </li><li> Inserire il catetere Millar attraverso la vena mesenterica nella vena porta e fissarla </li><li> Registrare la pressione della vena porta. Al termine della procedura, sacrificare i topi da dissanguamento sotto anestesia. </li></ol>

<ol>
	<li>Albuszies, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+increased+cardiac+output+on+hepatic+and+intestinal+microcirculatory+blood+flow,+oxygenation,+and+metabolism+in+hyperdynamic+murine+septic+shock.">Effect of increased cardiac output on hepatic and intestinal microcirculatory blood flow, oxygenation, and metabolism in hyperdynamic murine septic shock.</a> Crit Care Med. 33 (10), 2332-2338 (2005).</li><li>Bernhard, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphatidylcholine+molecular+species+in+lung+surfactant:+composition+in+relation+to+respiratory+rate+and+lung+development.">Phosphatidylcholine molecular species in lung surfactant: composition in relation to respiratory rate and lung development.</a> Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 25 (6), 725-731 (2001).</li><li>Cheever, A. W., Warren, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Portal+vein+ligation+in+mice:+portal+hypertension,+collateral+circulation,+and+blood+flow.">Portal vein ligation in mice: portal hypertension, collateral circulation, and blood flow.</a> 18, 405-407 (1963).</li><li>Costa, G., Aguiar, B. G., Coelho, P. M., Cunha-Melo, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+increase+of+portal+pressure+during+the+acute+and+chronic+phases+of+murine+schistosomiasis+mansoni+and+its+reversibility+after+treatment+with+oxamniquine.">On the increase of portal pressure during the acute and chronic phases of murine schistosomiasis mansoni and its reversibility after treatment with oxamniquine.</a> Acta Trop. 89 (1), 13-16 (2003).</li><li>Cui, S., Shibamoto, T., Zhang, W., Takano, H., Kurata, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Venous+resistance+increases+during+rat+anaphylactic+shock.">Venous resistance increases during rat anaphylactic shock.</a> Shock. 29 (6), 733-739 (2008).</li><li>Geerts, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+three+research+models+of+portal+hypertension+in+mice:+macroscopic,+histological+and+portal+pressure+evaluation.">Comparison of three research models of portal hypertension in mice: macroscopic, histological and portal pressure evaluation.</a> Int. J. Exp. Pathol. 89 (4), 251-263 (2008).</li><li>Huang, H., Deng, M., Jin, H., Dirsch, O., Dahmen, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraoperative+vital+and+haemodynamic+monitoring+using+an+integrated+multiple-channel+monitor+in+rats.">Intraoperative vital and haemodynamic monitoring using an integrated multiple-channel monitor in rats.</a> Lab Anim. 44 (3), 254-263 (2010).</li><li>Krege, J. H., Hodgin, J. B., Hagaman, J. R., Smithies, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+noninvasive+computerized+tail-cuff+system+for+measuring+blood+pressure+in+mice.">A noninvasive computerized tail-cuff system for measuring blood pressure in mice.</a> Hypertension. 25 (5), 1111-1115 (1995).</li><li>Kuga, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+and+local+autoregulation+of+cerebrovascular+blood+flow:+a+deep-brain+imaging+study+in+the+mouse.">Rapid and local autoregulation of cerebrovascular blood flow: a deep-brain imaging study in the mouse.</a> J. Physiol.. 587 (Pt 4), 745-752 (2009).</li><li>Muraki, T., Strain Kato, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=difference+in+the+effects+of+morphine+on+the+rectal+temperature+and+respiratory+rate+in+male+mice.">difference in the effects of morphine on the rectal temperature and respiratory rate in male mice.</a> Psychopharmacology (Berl). 89 (1), 60-64 (1986).</li><li>Nielsen, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+ventricular+volume+measurement+in+mice+by+conductance+catheter:+evaluation+and+optimization+of+calibration.">Left ventricular volume measurement in mice by conductance catheter: evaluation and optimization of calibration.</a> Am. J. Physiol Heart Circ. Physiol. 293 (1), H534-H540 (2007).</li><li>Sakamoto, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+of+portal+hypertension+and+hepatic+blood+flow+in+cirrhotic+rats+by+oestrogen.">Improvement of portal hypertension and hepatic blood flow in cirrhotic rats by oestrogen.</a> Eur. J. Clin. Invest. 35 (3), 220-225 (2005).</li><li>Reverter, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+deep+sedation+on+the+accuracy+of+hepatic+and+portal+venous+pressure+measurements+in+patients+with+cirrhosis.">Impact of deep sedation on the accuracy of hepatic and portal venous pressure measurements in patients with cirrhosis.</a> Liver Int. 34 (1), 16-25 (2014).</li></ol>

Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari in competizione.

Il monitoraggio di emodinamica epatica è un importante strumento di ricerca in epatologia e chirurgia epatobiliare. Acquisizione dei dati emodinamici epatici aiuta a caratterizzare l&#39;effetto delle procedure epatobiliare sul sistema circolatorio. È necessaria l&#39;acquisizione di dati emodinamici epatici anche per studiare l&#39;effetto di farmaci che influenzano la pressione portale e flusso portale, ad esempio, a seconda delle necessità in studi di valutazione di farmaci vasoattivi. <p class="jove_...

L&#39;obiettivo generale di questo video è stato quello di dare prova di una procedura di monitoraggio in tempo reale per l&#39;acquisizione di parametri emodinamici sistemici ed epatico. Il razionale per lo sviluppo di questa procedura è il suo grande valore per gli interventi sperimentali nei topi che richiedono l&#39;ottenimento di parametri emodinamici sistemici ed epatico. La procedura può essere applicata agli animali naïve e durante o dopo un determinato intervento chirurgico sperimentale epato-biliare, come epatectomia parziale, legatura della vena porta e il trapianto di fegato. Acquisizione dei dati emodinamici epatici nei roditori richiede la procedura invasiva proposta. Perfusione epatica non può essere ottenuto in modo non invasivo. Tuttavia, ci sono alternative per l&#39;acquisizione della pressione arteriosa sistemica. Tecniche di monitoraggio come la tecnica bracciale coda 8 sono stati utilizzati per l&#39;acquisizione della pressione arteriosa in entrambi i ratti e topi. La tecnica bracciale coda può essere applicato in ben fatanimali unità organizzative. Quando la misurazione della pressione sanguigna, l&#39;animale deve essere posizionato e fissato in una posizione scomoda specifico. Nel manuale del dispositivo di coda-bracciale, il produttore dichiara che i topi possono diventare nervosi e stressati che possono diminuire la circolazione nella coda. In tale circostanza, la pressione del sangue periferico acquisito nella coda può essere molto inferiore rispetto alla pressione arteriosa centrale. La procedura di controllo completo è stato eseguito con un monitor multicanale integrato utilizzando una serie di sensori di acquisizione dati. La pressione sanguigna è stata ottenuta con l&#39;inserimento di un catetere nel rispettivo recipiente dopo un&#39;attenta dissezione microchirurgica e l&#39;esposizione al microscopio. La portata è stata misurata posizionando una sonda di flusso transonico attorno a ciascuna nave. Abbiamo già segnalato una simile procedura di monitoraggio intraoperatorio per i ratti con conseguente una serie completa di dati fisiologici emodinamici comparabili a singlE i dati riportati da altri gruppi di 7. Pertanto abbiamo considerato questa procedura per rappresentare una buona base per il suo adeguamento al mouse, una specie 10 volte più piccolo del ratto. La differenza fondamentale alla procedura ratto è l&#39;uso di cateteri Millar per acquisire dati sulla pressione sanguigna invece di un sistema di catetere fluidodinamica. Dati di flusso sono stati acquisiti con sonde di flusso transonico, solo quelli molto più piccoli che per i corrispondenti vasi di ratto. A causa delle piccole dimensioni dell&#39;animale, strumentazione di topi è tecnicamente impegnativo, ma fattibile. Una volta che la strumentazione è completata, l&#39;acquisizione dei dati e l&#39;analisi dei dati primari vita è semplice, dal momento che un file di impostazione predefinita può essere utilizzato. Il file di impostazione deve essere definita una volta all&#39;inizio di una serie di esperimenti e può essere immagazzinato e utilizzato per tutti gli esperimenti successivi. Fino ad ora abbiamo applicato questa procedura per valutare gli effetti emodinamici epatici negli esperimenti acuti. Abbiamo misurato CAP e PVP prima e subito dopo il 70% epatectomia parziale (PH) e nel bloccaggio / bloccaggio de-gli esperimenti. Abbiamo bloccato il legamento epato-duodenale del lobo destro che rappresenta il 20% del fegato massa seguita da breve (5min) di bloccaggio del lobo mediano e laterale sinistro che rappresenta totalmente il 90% della massa epatica. De-bloccaggio iniziato con rilasciando il morsetto dal lobo destro seguito da liberare la mediana e il lobo laterale sinistro. Tempo di serraggio massima era inferiore a 10 min.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="606">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:104px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">PowerLab 16/30&#160;</td>
			<td style="width:104px;">ADInstruments</td>
			<td>PL3516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Quad Bridge Amp</td>
			<td style="width:104px;">ADInstruments</td>
			<td>&#160;FE224</td>
			<td>Bridge amplifier&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Animal Bio Amp</td>
			<td style="width:104px;">ADInstruments</td>
			<td>&#160;FE136</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Needle Electrodes for FE136 (3 pk)</td>
			<td style="width:104px;">ADInstruments</td>
			<td>&#160;MLA1213</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Perivascular Flowmeter Module</td>
			<td style="width:104px;">Transonic</td>
			<td style="width:119px;">TS420&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Flowprobe MA0.5PSB/MA1PSB</td>
			<td style="width:104px;">Transonic</td>
			<td style="width:119px;">MA0.5PSB/MA1PSB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">SPR-1000 Mouse Pressure Catheter</td>
			<td style="width:104px;">Millar instruments</td>
			<td>841-0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">fluid filled catheter&#160;</td>
			<td>Terumo</td>
			<td style="width:119px;">SR+DU2619PX</td>
			<td>26G, 0.64&#215;19mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">micro scissors</td>
			<td>F&#183;S&#183;L</td>
			<td>No. 14058-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">micro serrefine</td>
			<td>F&#183;S&#183;L</td>
			<td>No.18055-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro clamps applicator</td>
			<td style="width:104px;">F&#183;S&#183;L</td>
			<td style="width:119px;">No. 18057-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Straight micro forceps</td>
			<td style="width:104px;">F&#183;S&#183;L</td>
			<td style="width:119px;">No. 00632-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Curved micro forceps</td>
			<td style="width:104px;">F&#183;S&#183;L</td>
			<td style="width:119px;">No. 00649-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">needle-holder</td>
			<td style="width:104px;">F&#183;S&#183;L</td>
			<td style="width:119px;">No. 12061-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;"></td>
			<td style="width:104px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">6-0 silk</td>
			<td style="width:104px;">ethicon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">6-0 prolene</td>
			<td style="width:104px;">ethicon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">7-0 prolene</td>
			<td style="width:104px;">ethicon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">10-0 prolene</td>
			<td style="width:104px;">ethicon</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Tail cut-off device&#160;</td>
			<td style="width:104px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">www.kentscientific.com</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">LabChart7</td>
			<td style="width:104px;">ADInstruments</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">data&#160; analysis software&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

monitoring of systemic and hepatic hemodynamic parameters in mice

L&#39;uso di modelli murini di ricerca sperimentale è di enorme importanza per lo studio della fisiologia epatica e disturbi fisiopatologici. Tuttavia, a causa delle piccole dimensioni del mouse, dettagli tecnici della procedura di controllo intraoperatorio adatto per il mouse sono stati raramente descritti. In precedenza abbiamo riportato una procedura di controllo per ottenere i parametri emodinamici per i ratti. Ora, abbiamo adattato la procedura per l&#39;acquisizione dei parametri emodinamici sistemici e epatici nei topi, una specie dieci volte più piccolo di ratti. Questo film dimostra la strumentazione degli animali così come il processo di acquisizione dei dati necessari per valutare l&#39;emodinamica sistemica ed epatico nei topi. Parametri vitali, tra cui la temperatura corporea, la frequenza respiratoria e la frequenza cardiaca sono state registrate durante l&#39;intera procedura. Parametri emodinamici sistemici consistono di pressione carotidea (PAC) e la pressione venosa centrale (CVP). Parametri di perfusione epatica includono portale vpressione ein (PVP), portata portale, nonché la portata dell&#39;arteria epatica comune (tabella 1). Strumentazione ed acquisizione dati per registrare i valori normali sono stati completati entro 1,5 ore. Parametri emodinamici sistemici ed epatico sono rimaste entro i valori normali durante questa procedura. Questa procedura è impegnativo ma fattibile. Abbiamo già applicato questa procedura per valutare l&#39;emodinamica epatica in topi normali, così come durante il 70% epatectomia parziale e nel lobo epatico di serraggio esperimenti. PVP media dopo la resezione (n = 20), era 11,41 ± 2,94 cm H 2 O, che era significativamente più elevata (p &lt;0.05) rispetto a prima resezione (6,87 ± 2,39 cm H 2 O). I risultati del lobo epatico di serraggio esperimento hanno indicato che questa procedura di controllo è sensibile e adatto per rilevare piccole variazioni nella pressione portale e portata portale. In conclusione, questa procedura è affidabile nelle mani di un micro-chirurgo esperto, ma dovrebbe essere limitato a experiments in cui sono assolutamente necessari i topi.

Parametri vitali dei topi come la frequenza respiratoria e la frequenza cardiaca sono ovviamente molto superiore nel ratto. Media pressione arteriosa sistemica e della pressione venosa giugulare sono simili ai valori di ratto e anche simili ai dati umani. Dati emodinamici epatici sono ovviamente diversi. Abbiamo ottenuto valori normali da 8 topi. Portale flusso di sangue in topi normali era compresa tra 1,6-2,3 ml / min. Flusso in arteria epatica comune variava 0,10-0,35 ml / min. Pressione ...

Watch this Scientific Journal Video about Monitoring of Systemic and Hepatic Hemodynamic Parameters in Mice at JoVE.com

Monitoring of Systemic and Hepatic Hemodynamic Parameters in Mice

Questo film dimostra come acquisire l&#39;emodinamica sistemica e epatici nei topi. L&#39;intero controllo comprende l&#39;acquisizione dei parametri vitali, pressione sanguigna sistemica, pressione venosa centrale, portata arteria epatica comune, e di pressione della vena porta e la portata portale in topi.

Monitoraggio della sistemici e epatica parametri emodinamici nei topi

The use of mouse models in experimental research is of enormous importance for the study of hepatic physiology and pathophysiological disturbances. ...

monitoring-of-systemic-and-hepatic-hemodynamic-parameters-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

15.9K Views.  Jena University Hospital.  Questo film dimostra come acquisire l'emodinamica sistemica e epatici nei topi. L'intero controllo comprende l'acquisizione dei parametri vitali, pressione sanguigna sistemica, pressione venosa centrale, portata arteria epatica comune, e di pressione della vena porta e la portata portale in topi. 

Video: Monitoring of Systemic and Hepatic Hemodynamic Parameters in Mice

The bm12 Inducible Model of Systemic Lupus Erythematosus (SLE) in C57BL/6 Mice

Systemic lupus erythematosus (SLE) is an autoimmune disease with diverse clinical and immunological manifestations. Several spontaneous and inducible animal models mirror common components of human disease, including the bm12 transfer model. Upon transfer of bm12 splenocytes or purified CD4 T cells, C57BL/6 mice rapidly develop large frequencies of T follicular helper cells (Tfh), germinal center (GC) B cells, and plasma cells followed by high levels of circulating anti-nuclear antibodies. Since this model utilizes mice on a pure C57BL/6 background, researchers can quickly and easily study disease progression in transgenic or knockout mouse strains in a relatively short period of time. Here we describe protocols for the induction of the model and the quantitation Tfh, GC B cells, and plasma cells by multi-color flow cytometry. Importantly, these protocols can also be used to characterize disease in most mouse models of SLE and identify Tfh, GC B cells, and plasma cells in other disease models.

The bm12 Inducible Model of Systemic Lupus Erythematosus SLE in C57BL/6 Mice

The transfer of bm12 lymphocytes into a C57BL/6 recipient is an established model of systemic lupus erythematosus. Here we describe how to initiate disease using this model and how to characterize T follicular helper cells, germinal center B cells and plasma cells by flow cytometry.

Il BM12 inducibile modello di Lupus Eritematoso Sistemico (LES) in C57BL / 6 Mice

Systemic lupus erythematosus (SLE) is an autoimmune disease with diverse clinical and immunological manifestations. Several spontaneous and inducible ...

Ricerca

Medicina

Uncontrolled Hemorrhagic Shock Modeled via Liver Laceration in Mice with Real Time Hemodynamic Monitoring

Uncontrolled hemorrhage is an important cause of preventable deaths among trauma patients. We have developed a murine model of uncontrolled hemorrhage via a liver laceration that results in consistent blood loss, hemodynamic alterations, and survival.
Mice undergo a standardized resection of the left-middle lobe of the liver. They are allowed to bleed without mechanical intervention. Hemostatic agents can be administered as pre-treatment or rescue therapy depending on the interest of the investigator. During the time of hemorrhage, real-time hemodynamic monitoring via a left femoral arterial line is performed. Mice are then sacrificed, blood loss is quantified, blood is collected for further analysis, and organs are harvested for analysis of injury. Experimental design is described to allow for simultaneous testing of multiple animals.
Liver hemorrhage as a model of uncontrolled hemorrhage exists in the literature, primarily in rat and porcine models. Some of these models utilize hemodynamic monitoring or quantify blood loss but lack consistency. The present model incorporates quantification of blood loss, real-time hemodynamic monitoring in a murine model that offers the advantage of using transgenic lines and a high-throughput mechanism to further investigate the pathophysiologic mechanisms in uncontrolled hemorrhage.

Uncontrolled hemorrhage, an important cause of mortality among trauma patients, can be modeled using a standard liver laceration in a murine model. This model results in consistent blood loss, survival, and allows for testing hemostatic agents. This article provides the step-by-step process to perform this valuable model.

Scossa emorragica non controllata modellata mediante Lacerazione del fegato nei topi con monitoraggio emodinamico in tempo reale

Uncontrolled hemorrhage is an important cause of preventable deaths among trauma patients. We have developed a murine model of uncontrolled hemorrhage via ...

Invasive Hemodynamic Characterization of the Portal-hypertensive Syndrome in Cirrhotic Rats

This is a detailed protocol describing invasive hemodynamic measurements in cirrhotic rats for the characterization of portal hypertensive syndrome. Portal hypertension (PHT) due to cirrhosis is responsible for the most severe complications in patients with liver disease. The full picture of the portal hypertensive syndrome is characterized by increased portal pressure (PP) due to the increased intrahepatic vascular resistance (IHVR), hyperdynamic circulation, and increased splanchnic blood flow. Progressive splanchnic arterial vasodilation and increased cardiac output with elevated heart rate (HR) but low arterial pressure characterizes the portal hypertensive syndrome.
Novel therapies are currently being developed that aim to decrease PP by either targeting IHVR or increased splanchnic blood flow &#8212; but side effects on systemic hemodynamics may occur. Thus, a detailed characterization of portal venous, splanchnic, and systemic hemodynamic parameters, including measurement of PP, portal venous blood flow (PVBF), mesenteric arterial blood flow, mean arterial pressure (MAP), and HR is needed for preclinical evaluation of the efficacy of novel treatments for PHT. Our video article provides the reader with a structured protocol for performing invasive hemodynamic measurements in cirrhotic rats. In particular, we describe the catheterization of the femoral artery and the portal vein via an ileocolic vein and the measurement of portal venous and splanchnic blood flow via perivascular Doppler-ultrasound flow probes. Representative results of different rat models of PHT are shown.

Here we describe a detailed protocol for invasive measurements of hemodynamic parameters including portal pressure, splanchnic blood flow, and systemic hemodynamics in order to characterize the portal hypertensive syndrome in rats.

Emodinamico invasivo caratterizzazione della sindrome Portal-ipertesi in ratti cirrotici

This is a detailed protocol describing invasive hemodynamic measurements in cirrhotic rats for the characterization of portal hypertensive syndrome. ...

Invasive Hemodynamic Monitoring of Aortic and Pulmonary Artery Hemodynamics in a Large Animal Model of ARDS

One of the leading causes of morbidity and mortality in patients with heart failure is right ventricular (RV) dysfunction, especially if it is due to pulmonary hypertension. For a better understanding and treatment of this disease, precise hemodynamic monitoring of left and right ventricular parameters is important. For this reason, it is essential to establish experimental pig models of cardiac hemodynamics and measurements for research purpose. 
This article shows the induction of ARDS by using oleic acid (OA) and consequent right ventricular dysfunction, as well as the instrumentation of the pigs and the data acquisition process that is needed to assess hemodynamic parameters. To achieve right ventricular dysfunction, we used oleic acid (OA) to cause ARDS and accompanied this with pulmonary artery hypertension (PAH). With this model of PAH and consecutive right ventricular dysfunction, many hemodynamic parameters can be measured, and right ventricular volume load can be detected. 
All vital parameters, including respiratory rate (RR), heart rate (HR) and body temperature were recorded throughout the whole experiment. Hemodynamic parameters including femoral artery pressure (FAP), aortic pressure (AP), right ventricular pressure (peak systolic, end systolic and end diastolic right ventricular pressure), central venous pressure (CVP), pulmonary artery pressure (PAP) and left arterial pressure (LAP) were measured as well as perfusion parameters including ascending aortic flow (AAF) and pulmonary artery flow (PAF). Hemodynamic measurements were performed using transcardiopulmonary thermodilution to provide cardiac output (CO). Furthermore, the PiCCO2 system (Pulse Contour Cardiac Output System 2) was used to receive parameters such as stroke volume variance (SVV), pulse pressure variance (PPV), as well as extravascular lung water (EVLW) and global end-diastolic volume (GEDV). Our monitoring procedure is suitable for detecting right ventricular dysfunction and monitoring hemodynamic findings before and after volume administration.

We present a protocol of creating right ventricular dysfunction in a pig model by inducing ARDS. We demonstrate invasive monitoring of left and right ventricular cardiac output using flow probes around the aorta and the pulmonary artery, as well as blood pressure measurements in the aorta and pulmonary artery.

Monitoraggio emodinamico invasivo dell'emodinamica dell'arteria aortica e polmonare in un modello animale grande di ARDS

One of the leading causes of morbidity and mortality in patients with heart failure is right ventricular (RV) dysfunction, especially if it is due to ...

Measurement of the Hepatic Venous Pressure Gradient and Transjugular Liver Biopsy

Here we provide a detailed protocol describing the clinical procedure of hepatic venous pressure gradient (HVPG) measurement in patients with advanced chronic liver disease followed by an instruction for transjugular biopsy. Under local anesthesia and ultrasound guidance, a catheter introducer sheath is placed in the right internal jugular vein. Using&#160;fluoroscopic guidance, a balloon catheter is advanced into the inferior vena cava (IVC) and inserted into a large hepatic vein. Correct and sufficient wedge position of the catheter is ensured by injecting contrast media while the balloon is blocking the outflow of the cannulated hepatic vein. After calibrating the external pressure transducer, continuous pressure recordings are obtained with triplicate recordings of the wedged hepatic venous pressure (WHVP) and free hepatic venous pressure (FHVP). The difference between FHVP and WHVP is referred to as HVPG, with values &#8805;10 mm Hg indicating clinically significant portal hypertension (CSPH). Before removing the catheter, pressure readings obtained in the IVC at the same level, as well as the right atrial pressure are recorded.
Finally, a transjugular liver biopsy can be obtained via the same vascular route. Different systems are available; however, core biopsy needles are preferred over aspiration needles, especially for cirrhotic livers. Again, under fluoroscopic guidance a biopsy needle introducer sheath is advanced into an hepatic vein. Next, the transjugular biopsy needle is gently advanced through the introducer sheath: (i) in case of aspiration biopsy, the needle is advanced into the liver parenchyma under aspiration and then removed quickly, or (ii) in case of a core biopsy, the cutting-mechanism is triggered inside the parenchyma. Several separate passages can be safely performed to obtain sufficient liver specimens via transjugular biopsy. In experienced hands, the combination of these procedures takes about 30-45 min.

Here, we present a protocol for measurement of hepatic venous pressure gradient (HVPG),the gold standard to diagnose clinically significant portal hypertension. Moreover, we describe how to perform a transjugular liver biopsy within the same session.

Misurazione del gradiente di pressione venosa epatica e della biopsia epatica transgiugulare

Here we provide a detailed protocol describing the clinical procedure of hepatic venous pressure gradient (HVPG) measurement in patients with advanced ...

Standardized Hemorrhagic Shock Induction Guided by Cerebral Oximetry and Extended Hemodynamic Monitoring in Pigs

Hemorrhagic shock ranks among the main reasons for severe injury-related death. The loss of circulatory volume and oxygen carriers can lead to an insufficient oxygen supply and irreversible organ failure. The brain exerts only limited compensation capacities and is particularly at high risk of severe hypoxic damage.This article demonstrates the reproducible induction of life-threatening hemorrhagic shock in a porcine model by means of calculated blood withdrawal. We titrate shock induction guided by near-infrared spectroscopy&#160;and extended hemodynamic monitoring to display systemic circulatory failure, as well as cerebral microcirculatory oxygen depletion. In comparison to similar models that primarily focus on predefined removal volumes for shock induction, this approach highlights a titration by means of the resulting failure of macro- and microcirculation.

Hemorrhagic shock is a severe complication in seriously injured patients, which leads to life-threatening oxygen undersupply. We present a standardized method to induce hemorrhagic shock via blood withdrawal in pigs that is guided by hemodynamics and microcirculatory cerebral oxygenation.

Induzione da shock emorragico standardizzato guidato da ossimetria cerebrale e monitoraggio emodinamico esteso esteso nei suini

Hemorrhagic shock ranks among the main reasons for severe injury-related death. The loss of circulatory volume and oxygen carriers can lead to an ...

Induzione dose-dipendente dell'endotossiemia nei suini tramite infusione di LPS

Lipopolysaccharide Infusion as a Porcine Endotoxemic Shock Model

Sepsis and septic shock are frequently encountered in patients treated in intensive care units (ICUs) and are among the leading causes of death in these patients. It is caused by a dysregulated immune response to an infection. Even with optimized treatment, mortality rates remain high, which makes further insights into the pathophysiology and new treatment options necessary. Lipopolysaccharide (LPS) is a component of the cell membrane of gram-negative bacteria, which are often responsible for infections causing sepsis and septic shock. 
The severity and high mortality of sepsis and septic shock make standardized experimental studies in humans impossible. Thus, an animal model is needed for further studies. The pig is especially well suited for this purpose as it closely resembles humans in anatomy, physiology, and size. 
This protocol provides an experimental model for endotoxemic shock in pigs by LPS infusion. We were able to reliably induce changes frequently observed in septic shock patients, including hemodynamic instability, respiratory failure, and acidosis. This will allow researchers to gain valuable insight into this highly relevant condition and evaluate new therapeutic approaches in an experimental setting.

Autore in primo piano: Induzione di shock endotossicomico sperimentale nei suini per lo studio dell'insufficienza emodinamica e respiratoria

We provide a protocol for an experimental endotoxemic shock model in pigs by infusion of lipopolysaccharide.

Infusione di lipopolisaccaridi come modello di shock endotossiemico suino

Sepsis and septic shock are frequently encountered in patients treated in intensive care units (ICUs) and are among the leading causes of death in these ...

<meta charset="utf8"></head><body>Scompenso respiratorio acuto indotto dall'acido oleico nei suini

A Porcine Model of Acute Respiratory Failure with a Continuous Infusion of Oleic Acid

This protocol outlines an acute respiratory distress model utilizing centrally administered oleic acid infusion in Yorkshire pigs. Prior to experimentation, each pig underwent general anesthesia, endotracheal intubation, and mechanical ventilation, and was equipped with bilateral&#160;jugular vein central vascular access catheters. Oleic acid was administered through a dedicated pulmonary artery catheter at a rate of 0.2 mL/kg/h. The infusion lasted for 60-120 min, inducing respiratory distress. Throughout the experiment, various parameters including heart rate, respiratory rate, arterial blood pressure, central venous pressure, pulmonary artery pressure, pulmonary capillary wedge pressure, end-tidal carbon dioxide, peak airway pressures, and plateau pressures were monitored. Around the 60 min mark, decreases in partial arterial oxygen pressure (PaO2) and fraction of oxygen-saturated hemoglobin (SpO2) were observed. Periodic hemodynamic instability, accompanied by acute increases in pulmonary artery pressures, occurred during the infusion. Post-infusion, histological analysis of the lung parenchyma revealed changes indicative of parenchymal damage and acute disease processes, confirming the effectiveness of the model in simulating acute respiratory decompensation.

<meta charset="utf8"></head><body>Autore in primo piano: Esplorazione delle forme d'onda venose per il monitoraggio respiratorio non invasivo nei suini

Infusing oleic acid continuously into the pulmonary artery of an anesthetized adult pig induces acute respiratory failure, enabling controlled experimentation during acute respiratory decompensation.